血清胸腺因子(fts)对荷瘤小鼠干扰素、白介素-2分泌的影响
血清胸腺因子(FTS)对荷瘤小鼠干扰素、白介素-2分泌的影响
血清胸腺因子(FTS)对荷瘤小鼠干扰素、白介素-2分泌的影响
【摘要】 目的 观察 FTS对提高荷瘤动物干扰素(IFN-ν)、白介素
-2(IL-2)分泌的影响。方法 对荷瘤动物皮下注射不同剂量的FTS
后,取其血清,测定血清中IFN-ν的含量,并测定其脾细胞在ConA
刺激下分泌IL-2的含量。结果 与对照组比, FTS 2.5mg/kg、
1.25mg/kg能够使荷瘤小鼠血清中的干扰素含量显着提高(P0.01),
同时也使脾细胞分泌IL-2的能力提高。结论 FTS能够刺激机体提高
分泌细胞因子的能力,对抗肿瘤有着积极的作用。 【关键词】 血清
胸腺因子 干扰素 白介素-2 抗肿瘤 【Abstract】 Objective
Observation the FTS to enhance the Dutch lump animal IFN-ν,
IL-2 secretion influence.Methods After Dutch lump animal hypodermic injection different dosage of FTS, takes its blood serum, in the determination blood serum IFN-ν the content, and
determines its spleen cell to secrete IL-2 under the ConA stimulation the content. Results With the control group compared to, FTS 2.5 mg/kg, 1.25 mg/kg can cause in the Dutch lump mouse in blood serum of the interferon content remarkable enhancement (P 0.01), simultaneously also causes the spleen cell to secrete IL-2 ability enhancement. Conclusion FTS can stimulate organism enhancement secretory cell factor ability, the resistance tumor has the positive function. 【Key words】
FTS; IFN; IL - 2; anti-tumor 据报道,血清胸腺因子
(Thymulin,FTS)来源于胸腺组织,其氨基酸序列为
NH2/Glu-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Ser-Asn,是一类小分子肽,1,,对
参与获得性和先天免疫的细胞FTS都能产生作用,2,,在鸡模型中,
FTS能参加IL-2R的
达,特别对CD4+ 细胞,它也影响人IFN-ν受
体的表达,使细胞更易被细胞因子刺激,3,,本文通过研究FTS对荷
瘤动物分泌IFN及IL-2的影响,了解FTS对免疫低下机体的细胞因
子的作用,从而为国内进一步研究FTS在抗肿瘤方面的应用打下良好
的基础。 1 材料与方法 1.1 药物与试剂 血清胸腺因子(FTS) ,
批号060821,由深圳市翰宇生物
有限公司提供,其纯度为96%,冻干粉末,冷冻保存,临用前取FTS 1mg,加1ml消毒生理盐水稀释为1mg/ml的原液,供皮下注射用。阳性对照药为胸腺肽,冻干粉末,200mg/支,黑龙江迪龙药业有限公司提供,批号20061001;小鼠干扰素-γELISA试剂盒,晶美生物工程有限公司提供,批号20060529;刀豆蛋白A(ConA),SIGMA公司提供,浓度为10μg/ml和30μg/ml;MTT,SIGMA公司提供,使用浓度为5mg/ml,20μl/孔。 1.2 瘤株 小鼠H22,取接种于小鼠的腹腔第7天的瘤株,配成106/ml瘤细胞悬液,接种于小鼠前肢腋窝皮下0.2ml/鼠。 1.3 动物 实验用体重18,20g的SPF级雄性昆明小鼠;C57 BL/6小鼠,6,8W 雄性,动物合格证号:SCXK京(2005-2006),均由中国药品生物制品检定所实验动物中心提供。饲养观察2天后使用。实验动物室为无菌空气二级过滤,人工日光灯h自动照明,恒温、恒湿送风,温度22,24?,相对湿度40%,45,。鼠笼具为塑料盒,不锈钢丝盖。 1.4 荷瘤动物模型 用18,20g的昆明小鼠皮下注射H22瘤株,24h后小鼠随机分组用于实验。 1.5 给药方法 分别取荷瘤小鼠,健康动物及免疫缺陷型动物各50只,均分为5组,分别按高、中、低3个剂量注射FTS,对照组注射NS,用胸腺肽做阳性对照,均皮下注射给药,每日给药1次,共给药14天。 1.6 小鼠IL-2的产生 将给药后的小鼠断颈放血,取脾置于无血清RPMI-1640培养液中去杂质,研磨成单个细胞后用100目筛及200目筛过滤,将滤液1000rpm,5min离心,取上清,除红细胞后,用无血清RPMI-1640培养液洗1次,最终用含10%小牛血清的RPMI-1640培养液配成0.5×107/ml,加入24孔细胞培养板中500μl/孔,同时加入等体积的ConA(10μg/ml),37?,5%CO2,培养24h,取出2500rpm,20min离心,收取上清,除菌后,-20?保存备用。 1.7 小鼠胸腺细胞的制备 将C57 BL/6小鼠断颈放血,取胸腺置于无血清RPMI-1640培养液中去杂质,研磨成单个细胞后用100目筛及200目筛过滤,将滤液1000rpm,5min离心,去上清,除红细胞后,用含5% 小牛血清的RPMI-1640培养液洗二次,最终用含10%小牛血清的RPMI-1640培养液配成1.0×107/ml。 1.8 小鼠血清的制备 将给药后的小鼠从眼静脉丛取血,待凝固后分离血清,-20?保存备用。 1.9
检测指标 用酶标仪测定各组的OD值,IFN-ν测定用490nm,MTT测
定用550nm。实验数据用x?s表示,组间比较用t检验。