[宝典]紫外分光光度法测定维生素c的含量

[宝典]紫外分光光度法测定维生素c的含量 紫外分光光度法测定维生素C的含量 维生素C(VitC)又名抗坏血酸，可降低毛细血管通透性，降低血脂，增强机体的抵抗能力，并有一定的解毒功能和抗组胺作用 ,1, 。临床主要用于坏血病、急慢性中毒、心肌炎、慢性肝炎等病症。对于其含量测定，纵观各种质量均采用2，6-二氯吲哚酚滴定法等滴定法，该方法简便、快速、准确，中国药典(2000年版)也采用碘量法。虽然该法对于维生素C原料药的测定结果比较满意，但对于制剂中维生素C含量的测定结果就不甚满意了。由于维生素C易被空气中的氧所氧化，再加上制剂辅料对测定的干扰，测定前必须先做处理。采用紫外分光光度法测定维生素C时，存在于维生素C或复合维生素制剂中的辅料一般不对测定产生干扰 ,2, 。所以本法既可以测定维生素C各种制剂及复合维生素片剂，也可以测定多种饮料中的维生素C的含量。 1 仪器与试剂 UV-260紫外分光光度计，VitC对照品及VitC片(规格:50mg)均由河南某药厂提供，硫酸溶液(pH=6)。 2 实验操作 2.1 标准曲线的绘制 精密称取VitC对照品0.05g溶于100ml硫酸溶液，再稀释成一系列不同浓度的对照品溶液(0,14μg/ml)，分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。该曲线是经过原点的一条直线，可求出该曲线的斜率。 2.2 样品测定 取VitC20片，精密称定，研细，精密称出适量(相当于VitC50mg)，置于100ml量瓶中，加硫酸溶液溶解并稀释至刻度，滤过，精密量取续滤液2ml置于另一100ml量瓶中，加硫酸溶液稀释至刻度，测出其吸光度A 样 。由标准曲线查出样品的浓度C 样品,3, 。 2.3 结果计算 根据精密称出的样品的质量、溶解及稀释的体积可求出C 样 。 VitC含量=C 样品 /C 样 或VitC含量=A 样 /K×C 样 注:K为标准曲线的斜率。 3 讨论 维生素C的还原能力强而易被氧化，特别是在碱性溶液中易被氧化。另外在碱性溶液或强酸性溶液中还能进一步发生水解。因此，选择硫酸溶液使成弱酸性。 测定时溶液pH的选择:维生素C的紫外最大吸收波长与溶液的pH值有着密切关系。在pH=2.0时，溶液的最大吸收波长在245nm;在pH=12时，溶液的最大吸收波长在300nm;在pH=5,10范围时，溶液的最大吸收波长在267nm，况且在pH=6.0时吸收度值最大。所以，选择测定溶液的pH=6.0。 本方法对仪器的要求不是很高，适用于大批量样品的定量分析。但是，若仪器搬动或重新校正波长、或者更换仪器时，标准曲线必须重新绘制。 参考文献 1 郑虎.药物化学.北京:人民卫生出版社，2003，443. 2 刘文英.药物分析.北京:人民卫生出版社，1999，212. 3 Chp(中国药典).2000，Vol?(二部):792. 作者单位:475003河南医药技师学院