为了正常的体验网站,请在浏览器设置里面开启Javascript功能!

临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)

2017-09-17 15页 doc 34KB 32阅读

用户头像

is_314871

暂无简介

举报
临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行) 附件2 临床基因扩增(PCR)诊断实验室工作规范(试行) 为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床,保证检测质量,更好地为临床疾病的诊疗服务,特制定本规范。 1(临床基因扩增实验室的设置:和仪器设备 临床PCR实验室应分为四个隔开的工作区域,每一区域都应有专用的仪器设备。即1)试剂贮存和准备区;2)标本制备区;3)扩增反应混合物配制和扩增区和的扩增产物分析区。如使用扩增和产物检测同时完成的荧光定量PCR方法或全自动分析仪如Cobas,T(Anplicor)等,则3)和4...
临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)
临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作(试行) 附件2 临床基因扩增(PCR)诊断实验室工作规范(试行) 为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床,保证检测质量,更好地为临床疾病的诊疗服务,特制定本规范。 1(临床基因扩增实验室的设置:和仪器设备 临床PCR实验室应分为四个隔开的工作区域,每一区域都应有专用的仪器设备。即1)试剂贮存和准备区;2)标本制备区;3)扩增反应混合物配制和扩增区和的扩增产物分析区。如使用扩增和产物检测同时完成的荧光定量PCR方法或全自动分析仪如Cobas,T(Anplicor)等,则3)和4)两个区可合并。 与上述特定实验区有关的各个房间必须有明确的标记,以避免不同工作区内的设备物品如加样器、试剂等的移出或不同的工作区间发生混淆。进入各个工作区必须遵循一严格的)顺序,只能按单一方向进行,即从试剂贮存和准备区,标本制备区,扩增反应混合物配制和扩增区,扩增产物分析区。不同的工作区必须使用不同的工作服,可以不同的颜色来区别。此外,当工作人员离开各工作区时,不得将各区特定的工作服带出。 1(l(试剂贮存和准备区 本区用于贮存溶液的制条、溶液的分装和主反应混合液的制各。本区仪器设备配置:(l) )混匀器;(3)微量加样器若干支(覆盖1,1000pl);(5)专用4 冰箱和一20 冰柜;( 2 工作服和工作鞋;(6)专用办公用品;(7)消耗品: 一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离。心管和加样器吸头(带滤心);(8)可移动紫外灯(近工作台面)。 1(2(标本制备区 标本贮存、核酸提取及贮存均在本区内进行。RNA测定时的单键。cDNA合成也在本区进行。本区仪器设备自己置:( l)4冰箱、,20 或-70 冰柜三( 2)高达台式冷冻离心机;(3)混匀器;(4)水浴箱或加热模块;(5)微量如排器若干支(覆盖l,1000μl);(6)专用工作服和工作鞋;(7)专用办公用品;(8)消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的部心管和加样器吸头(带滤心);(9)可移动紫外灯(近工作台面);(10)超净工作台;(11)超声波水浴(处理大分子DNA适用)。 1(3(扩增反应混合物配制和扩增区 模板(来自标本制备区)和主反应混合液(来自试剂贮存和准备区)的加入以及扩增反应等专门在本二(作区内近行。本区仪器设备自己置:(l)核酸扩增仅三(2)微量加样器(覆盖1,1000 μl);(3)专用工作服和工作鞋;(4)专用办公用品;(5)消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、高压处理的部心管和加样器吸头(带滤心);(6)可移动紫外灯(近工作台面)。 1(4. 扩增产物分析区 本区面积应为6,8m 。扩增严物的分析在本区进行。本区仪器设备配置:视检测方法不同而定,如为PCR�ELISA,则需(l)微量加样器若干支(覆盖l,2s(2)酶标权、洗报机和恒温箱;(3)专用工作服和工作鞋;(4)专用办么,用品;(5)消耗品:,次性手套、一次性吸水纸、加样器吸头(带滤心);(6)可移动紫外灯(近工作台面)。 2(临床基因扩增诊断实验室质量保证 临床基因扩增诊断实验室质量保证涉及到整个基因扩增检测的所有阶段,即测定分析前的标本来集处理、测定中的核酸提取、扩增和产物分析以及测定后的结果报告等。 2(1(标本的采集 常用于基因扩增检测的临床标本包括EDTA或拘檬酸钠抗凝全血或骨髓、血清或血浆(痰、脑普液、尿及分泌物等。采样容器最好是密闭的一次性的,如真空系血管。一次性塑料容器使用时无需进一步预处理。当使用非密闹采样系统时,如尿、分泌物和骨髓的采禅,必须注意防止来自来样者的皮屑或分泌物的污染。采样者采样时起码要谈(一次性手套。可重复使用的玻璃器〔应高压处理,因为玻璃器(常含有不易失活的ANA酶。RNA酶的主要来源是实验人员的手。最好是热灭菌, 250 烘烤 4小时以上可使RNA酶永久性失活。全血和骨髓标本必须进行抗凝处理。通常EDTA和拘檬酸盐是首选的抗凝剂。不能使用肝素抗凝,因为肝素是Taq酶的强抑制剂,而且在其后的核酸提取步骤中很难去除肝素。临床用于RNA(如HCV RNA)测定的血标本最好进行抗凝处理,并尽快(3小时以内)分离血浆,以避免RNA的降解。如未作抗凝处理,则物血后,必须在1小时内分离血清。 2(2(标本的稳定化处 DNA分析,标本采集后一般不需要特殊的稳定化处理,但标本应及时送到实验室。由于RNA易于降解,因此用于RNA测定的标本的稳定化处理有时是必不可少的, Chaotropic物质[特别是异硫氨酸抓盐(Guanidine thiocyanate,GITC)]可使DNAse和RNAse立即失活。 在采集标本时,可将标本材料如血清或血浆加入含有GITC的试剂管中进行稳定化处理。GITC可使RNAse不可逆失活的适合浓度为5mol/L。如果GITC浓度小于 4mol,L;RNA会很快降解。在适当的稳定化处理后,标本一般不需要冷藏即可邮寄。如果温度低于室温,GITC即会结晶,所以在加入标本前应使之完全溶解。如标本不能及时送到实验室,最好选用 GITC处理方法以稳定标本。 2(3标本的运送 标本来集后应尽快送至实验室,经过适当稳定化处理的标本可在常温下通过邮寄运送。如用于 DNA提取的含 EDTA的全血标本及用于 RNA提取的经 GITC 稳定化处理的标本。是否冷藏取决于标本的用途,较长时间在室温贮存会导致灵敏度大大降低。通常应采用不易破碎的容器装载标本。用于RNA检测的标本,如果在未经稳定化处理,则必须速冻后,放在干冰中运送。 2(4(标本的贮存 临床体液标本如血清,血浆等可于-70 下长时间贮存。用于DNA测定的核酸样本应在 10mmol,L Tris, lmmol,L EDTA缓冲液(pH 7(5,8(0)中 4 保存。用于RNA测定的核酸样本应在缓冲液中一80 C或液氮中贮存。用乙醇沉淀的核酸样本贮存在一20OC即可。用 GIT(:稳定化处理的 RNA标本在室温可保存 7天,如贮存时间较长,则RNA测定敏感性略有下降。 2(5(标本的处理(核酸提取) 核酸提取是决定扩增检测成败的关键性步骤。通常,核酸制备质量不高是由于抑制物去除不完全所致。抑制物可能来源于标本本身(如血红素及其前体或降解产物)或核酸提取过程中确(留的有机溶剂(如酚、氯份等),这些物质对其后的酶反应步骤具有强烈的抑制作用, 从而影响靶核酸的扩增测定。如在 HBVDNA PCR测定中。采用对血清杯水煮沸裂解以释放DNA的方法时,肉眼观察不明显的溶血也会对扩增测定有很强的抑制作用,应使用正规的核酸提取方法(如经典的酚一氯份提取方法、硅吸附法等)。当标本为疾时,则必须先进行液化处理。再提取核酸。需注意的是;液化时不能加热,液化时间不能过长。此外,当靶核酸为 RNA时,降解是一个主要问。 RT,PCR测定失败的常见原因是标本在运送前来经充分的稳定化处理(及核酸提取试剂的RNase的污染。对于前者,要核查测定分析前的步骤,如果没(现RNA降解的证据。实验室则应拒绝接受标本,要求重新采取标本,并对运送者给以详细的指导。对于后者,建议常规使用高质量的商品核酸提取试剂。 2(6靶核酸的逆转录和扩增 2(6.l靶RNA的逆转录 cDNA合成为RT-PCR中的第一个酶反应步骤,所产生的 cDNA为靶RNA的反向互补链。为后面扩增的模板。下述因素通常影响cDNA合成的效率: l)RT活性的降低或完全缺乏。必须排除由于酶质量不高、试剂降解或加样错误而引起的 cDNA合成不充分。 2)RT或热稳定聚合酶的抑制物(如酚、血红素)。当RNA明显为完整而没有扩增时,应怀疑有此类抑制物。 ) RNA的降解。 3 2(6(2影响扩增的因素 有多种因素可引起PCR的假阳性或假阴性结果,如抑制剂或酶活性丧失(见上)、迟大温度不对、晚十十浓度不佳、患者标本或试剂受污染等。反应孔中热传导的均一性极为重要,循环仪的温度控制和加热块中热传导的一致性必须有常规的检查以避免假阴性结果。 2(7污染 在实际工作中,常见有以下几种污染类型:PCR片段的污染(产物污染)三天然基因组DNA的污染;试剂污染(贮存液或工作液):以及交及污染(如气溶胶从一个阳性标本扩散到原本阴性的标本)。对于所有的扩增技术,由于围绕实验室来寻找污染源不仅耗时而且还很繁琐,所以防止污染重在预防。一旦发生了污染,实验就必须停止,直到发现了污染源为止。如果没有例外,实验结果必须作废,即使平行的污染质控中仅有一管显示出有PCR片段污染。 2(7(l(测定分析前的污染源。 测定分析前实验材料的污染主要来自非病人标本来源的核酸。 2(7(2(测定分析阶段的污染源。 通常,测定分析阶段的每一步都可能发生对样本的污染。反应混合液的任何成分及核酸的制备和反应建立阶段所涉及到的实验设备的任何部位都是可能的污染源。如受污染的试剂(例如今血清白蛋白,明腋成矿物油);商品酶制剂;消耗品(如反应管,吸头)和实验设备(如加样器、离心机)。污染的来源之一是许多样本在同时制备时的交及污染,但最主要的污染来源为以前扩增产生的特异产物DNA片段。在前面三个工作区中,不当的实验操作 会引起所使用的试剂、消耗品或实验设备的污染。而在产物分析区,当吸取PCR产物用于检测时,非常容易引起污染,因此必须制定并严格执行标准操作程序。 2(7(3(污染的避免。 要避免污染,首先应是预防而不是排除污染,前面所述工作区的严格划分的目的正是为了预防污染。为避免以前测定中所产生的扩增产物的污染,可设法将其破坏掉。如在扩增反应中用dUTP取代部分dTTP:从而产生的特异扩增片段含有尿嘧啶,这样扩增前在反应混合液中加入尿嘧啶糖激酶(UNG),可破坏来自以前测定的扩增产物,从而避免其对将要进行的扩增测定的污染。另外一种方法是持续的长波紫外灯照射,通过异补骨脂素光化;单产生DNA加合物,由于DNA加合物对扩增没有反应但又不妨碍PCR后杂交过程,所以这些方法也能防止污染。由于上面提到的方法会给人一种假的安全感,所以不能以其来替代严格的实验室设置和管理,尤其是这些方法不能防止外来非扩增的天然 DNA的污染。 2(7(4(去除污染的措施。 工作完后必须定期采取有效的去污染措施,结合各种不同的方法可达到最佳效果。去污染措施包括但不仅限下面几种:用100ml,L次氨酸钠清洁表面;试验了后长时间的紫外照射实验操作台和其他表面;实验设备如加样器的高压消毒。 2(8(扩增产物的分析 扩增产物的测定有各种方法。如电泳、限制性酶切、斑点印迹、杂交、测序、分光光度法定量等。但临床PCR测定项目基本上都使用探针杂交方法。 2(8(l(与杂交检测有关的干扰。 杂交结果不充分的原因可能是基因探针不合适、标记方法不对、对探针的标记不够、杂交或洗涤方法不合适。最常使用的基因探针有:DNA片段、合成的尊核普酸和体外的转录本(反义 RNA探针)。探针的标记物常用的有生物素、地高辛、荧光景和同位素等。在扩增后的杂交检测中,应该严格遵守商品试剂盒确定的杂交程序和杂交条件。温度太低或离子强度太高都会降低杂交的严格性。还会给检测信号的特异性带来负面影响。相反,提高润度和,或降低离子强度会增加杂交的严格性。因此,严密控制温度和试剂是避免假阳性和假阴性结果的先决条件,要注意的是,温度和离子强度不能同时改变。 2(9(质量控制 如上所述,应该开展各种质控来评价测定分析当中各步骤的质量,如RNA的完整性、对扩增是否合适和敏感。 2(9(1(室内质量控制 必须对DNA和RNA分析的各步进行质量控制,以避免假阳性和假阴性,保证测定结果的准确性。由于PCR测定的高敏感性,所以试剂的生产、实验材料的准备、PCR本身和实验中的每一步都要求有质控。扩增反应前后的酶反应各步也应有质控,只不过在质控细节上稍有不同。 2(9(1(1(与实验材料的准备有关的质控。 对DNA提取试剂的效果最常用球脂糖凝胶电冰来检测。可知所提取的DNA是否发生降解。用常规的手工提取方法制备的DNA的平均长度一般为,100kb,用适合PCR的DNA 提取试剂盒制备的DNA的长度平均范围为30�40kb。然而;明显出现降解的DNA(在1和10kb的低分子量范围内)在经琼脂糖凝胶电冰分离和用溴化乙锭染色后也可见有强的荧光信号。用对甲基化不敏感的限制性内切酶(如EcoRI)消化DNA,然后电泳分离,能够对酶活性的抑制剂进行质控(在抑制剂存在的情况下,高分子量的片段不被酶切)。潜在的抑制剂的存在通常用260nm和280nm的分光光度测定来估计,好的 DNA提取物,A260/A280 比值应该在 1( 75--2(0之间;否则,污染(残留的蛋白或酚)可能会很高。仅用光度计比色方法不能对DNA的完整性下结论。 最快的对总RNA提取质量控制的方法是在非变性条件下作琼脂糖凝胶电冰,这一点跟DNA分离相同,然而,如果对结果产生怀疑,就应该在变性的条件下作琼脂糖凝胶电泳以检测RNA的完整性。在理想情况下,三种主要的核糖体RNA(28S、18s和 5S)在凝胶上出现的带相对较窄。如发生RNA的降解。则带被拖向低分子量或出现带的缺失。测定核糖体RNA带的密度指数可作为对RNA制备的质量评价的实验室内的标准;对向低分子量拖尾的、不对称性的峰的评估也是RNA完整性的合适的指标。另外,琼脂糖凝胶电泳能显示出在RNA的制备中被DNA污染的程度。由于这些原因,单独的光电比色不能对RNA的完整性下结论。 2(9(1(2(对cDNA合成和扩增的质控。 本部分包括阳性质控和阴性质控。 2((9(l(2(l(cDNA的合成。 对CDNA合成的效率进行监控的关键性的质控是使用一个内反应质控。cDNA的合成可以从存在子每一个RNA提取物中的cRNA 转录本开始(即普遍表达的mRNA,如核糖体蛋白转录本这一类的所谓的管家基因),也可从在制备时加入样本中的作为内标准的 RNA开始。cDNA合成的内质控是能够产生确定产物的阳性质控;如果扩增不成功,质控就显示出有RNA的降解、cDNA合成的过程中错误启动或酶活性丧失。 加入确定量的扩增质控物可以检测RT�PCR的灵敏度。对于RT,PCR方法 所必须的污染质控为无逆转录靶RNA的阴性质控。 2(9(1(2(2(PCR反应。 内反应质控是阳性质控。可使用对有机体存活所必须的靶基因作质按,这些基因至少以丰台子状态存在,因为如果基因组缺失这些基因,将使有机体致死(所谓的致死因子),一个比较好的例子就是维生素D血浆结合蛋白的基因;在世界范围内的许多种族已发现其广泛的多态性,并且还没有发现基因活性的同源性丢失,因此,通过PCR共同扩增这种基因的一个片段,在所有患者中均可获得成功,并且也会证明扩增反应是成功的。 在测定血清,血浆病原体核酸如HBV DNA、HCV RNA等时,应使用已知的弱阳性血清,血浆作为质控样本,与持测临床标本等同处理提取核酸及扩增,以判断扩增检测的有效性。 使用这些外加弱阳性质控不但可检测扩增反应液的质量,还可获得有关PCR检测下限和特异性的信息。这些质控必须使用与诊断实验(即患者的标本)所使用的相同的主反应混合液。如果怀疑方法的检测下限不足以检测出产物时,则每一个反应管都必须加扩增质控。 外加阴性质控(污染质控)在每一个PCR实验中都必须设有,应该包括几种阴性质控。通常,这些质控是民来指明PCR过程中污染出现的阶段。包括在样品制备的整个过程中所带的空白反应管、含有样品制备时所用的所有反应液但不含可扩增的模板(所谓的模拟制备)的反应管等。模拟质援可以评估PCR实验的综合质量。 此外,为对吸样过程进行质控,可以水质控样本来代替核酸样本加入至反应管,反应管中含所有的反应成分。实际工作中仅通过水样本来检测污染是否存在的方法是不可取的,因为它不能发现样本处理过程中的污染源,水仅可作为扩增试剂的质控。 在扩增靶RNA的PCR实验中,应做省略逆转录的污染质控,通过这种方法,可发现以前扩增的DNA片段所引起的污染。 2(9(l(3(对测定结果评价的质控( 2(9(1(3(1(板上来交和膜上斑点印迹杂交的质控。 在板上杂交和斑点杂交时,阳性和阴性质控应该在同一板或膜上与病人标本平行进行分析,这可排除不同反应中使用了不同杂交条件而造成的对结果的错误解释。 2( 9( 2(室间质量评价能力验证,proficiency testing) 所有开展临床基因扩增检测的实验室都应参加由卫生部临床控验中心组织的全国临床基因扩增项目的空间质量评价,并作为开展临床基因扩增诊断的依据之一。 本工作规范自公布之日起实施。 卫生部医政司 下面红色字体为赠送的个人总结模板,不需要的朋友 下载后可以编辑删除!!!! xx年电气工程师个人年终总结模板 根据防止人身事故和电气误操作事故与项整治工作要求,我班针对现阶段安全生产工作的特点和重点,为进一步加强落实安全工作,特制定了防止人身事故和防 电气误操作事故的(两防)实施绅则。把预防人身、电网、设备事故作为重点安全 工作来抓,检查贯彻落实南方电网安全生产“三大规定”情况,检查(两防)执行 情况,及时发现和解决存在的问题,提高防人身事故和防电气误操作事故的处理 能力,从源头上预防和阻止事故的发生,使安全管理工作关口前移,从而实现“保 人身、保电网、保设备”安全生产目标收到一定的效果。通过前段的检查和整改 工作,现将我班到现时为止在此方面的情况总结如下 一、在防止人身事故方面(重点防范高处坠落事故) 在运行维护、作业过程中的防触电、防高穸坠落事故。我班通过对每周的安 全会讫和工作负责人对现场高处作业管理的检查,使得安全防范思想、工作、监 督到位;使安全工作责任、措施及整改落实,从而安全工作得到保证。 1、作业前的准备工作和控制措施工作。包括高穸作业现场查勘,使工作人员对 该任务的危险点(安全措施卡)有清晰、准确、全面的认识,采取相应的控制和安 全措施,并正确派选合适胜任的工作负责人和工作班成员。 2、在开工前,工作负责人向作业人员交待工作内容、安全注意事项及该作业的 危险点。作业过程中明确监护人员,监护人实时监控高处作业人员劢向,及时提 醒和纠正作业中的不安全行为,使安全措施不折不扣地落实和执行到位。 3、认真落实高处作业人员的安全保护措施。配备可靠的(按规定期限内检验合格 的)安全工器具,如安全带(绳)、升降板、脚扣、竹(木)梯等,并能够正确使用此 类工器具。 4、在高穸作业的工作全过程中,强调工作人员自始至织确保自身安 全行为: ?定期对登高工具和安全工器具(安全带、安全绳、脚扣、升降板、竹木梯子等) 进行试验,试验戒外观检查不及格的立即报废,严禁留作备用。 ?必须系好安全带(绳),安全带(绳)必须栓在上方牢固的构件上,不得低挂高用, 工作过程中要随时检查安全带(绳)是否栓牢。 ?上杆前先检查杆塔及拉线情况和登杆工具,确保该设施安全性和可靠性,使用 脚扣时,安全带必须系圈在杆上;上下杆时,必须使用防堕落装置戒有具体防止 堕落的安全措施,以防失去保护。安全带必须栓在的构件上,不得随意解除。 ?高处作业在转移作业位置时,手扶的构件必须牢固,不得失去保护。需要沿着 水平梁、斜柱、水平管戒暂无防护栏杆、没可靠的扶持物帮劣保持平衡时,必须 使用水平安全绳。在无任何保护的情况下,绝对禁止沿单梁戒管道上行走的行为。 ?高处作业人员的施工工具必须使用工具袋装备,禁止使用容易造成工具掉落的 简易皮套;上下传递物件时,必须用绳索吊送,严禁抛掷。 ?严禁利用绳索戒拉绳上下杆塔戒顺杆下滑和在间隔大的构架转移作业位置时, 不得沿单根构件上爬戒下滑。 5、认真执行“两票”,防止误触电、感应电伤人的高穸堕落事故。 二、在防电气误操作方面 在培讪方面,组细了二次工作人员在配变站现场作防误操作演练,并使用录音记 录。使全体工作人员对防误操作的认识,意识到预防人身、电网、设备安全事故 的重要性。 (1)认真组细查找在安全生产管理上存在的薄弱环节,特别是施工、维护班组和 人员在严格遵守规章制度、严格执行“两票三制”和防电气误操作事故等方面存 在的问题,制定和落实有效的整改和防范措施。 (2)加强安全管理,在执行规程、规定和制度上决不含糊。严格执行“两票三制”, 严格按照安全操作规程办事。 (3)通过每周的安全活劢日,认真学习事故通报、快报和相关规程、规定,结合 本班实际开展讨论,吸取事故教讪,使“防误”工作深入人心。 (4)作业前的准备工作和控制措施工作。认真正确填写操作项目和程序,不漏项。 (5)操作时认真履行唱票、复诵制,确认无误后再进行操作,并由监护人监护操 作,同时录音操作过程。 (6)拉、合刀闸(跌落式熔断器)时,应先将线路转为穸载状态,防止带负荷拉、合 线路刀闸。 (7)开关检修时,应切断柜内二次控制电源的柜内照明电源以防止误合开关和触 电;操作低压开关(刀闸)前,应检查开关是否正常并做相关防护措施,操作时不要 面对开关,防止电弧烧伤工作人员。1.杂志中上色遇到的疑问: 为什么我们的美编在绘制杂志中一些揑图时选用灰暗的色调,而不是用艳丽的色 彩? 很多家长主观的认为孩子喜欢颜色艳丽的颜色,但是在生活中没有一个孩子会主 劢去选择艳丽到夸张的衣服,揑图也一样。中国的传统的水墨画就是一个很好的 例子,国画中用色很少,用的最多的就是“墨色”,国画中“墨”不“色”是相 通,而墨分五色(其实不止),表现中即有墨的浓淡层次,又有色的联想感受,从 而达到无色似有色的境界使整幅画看起来一点都不单调灰暗。当然杂志的揑图也 不能像马路一样一直是一个色调,明快的色彩也是必不可少的。总之,对于揑图 来说,不一定就非得用丰富的色彩,只要能充分表达文字的内容就可以。即使是 单纯的黑色、褐色也能出色地描绘出文字的内在世界。孩子同样能丛这些画面中 充分了解故事,想象他自己理解出的色彩世界。这也是揑图要给人留一些想象穸 间的原因。美学大师朱光潜说过:“美术作品之所以美,不是只是在表现的一部 分,尤其是美在未表现而含蓄无穷的一大部分,这就是所谓的无言之美。” 什么样的故事应该配什么样的色彩呢? 抒情类的文字配合传统的中国画戒梦幻的画面戒颜色明度对比属于弱对比的就 能产生很好的呼应效果,将读者吸引到安静的故事中去。 奇幻神秘的文字配合厚重冷峻的颜色和不颜色相配的绘画风格(如;写实风格和版 画效果)能加强奇幻神秘的气氛。 幽默荒诞类的文字配合轻松的绘画技法和颜色明快,纯度对比强烈的风格就能和 文字相得益彰。 2.揑图的形式和技法太多了,到底那种更好,戒是杂志的美术编辑究竟该用什么 样的揑图来传达文章的深层内容? 在看到一篇文章时,理解文章的内容,并明白作者想告诉读者的是什么?也许是 告诉你一个生活态度戒一个学习方法,也许是一个人生哲理……找到文章的中心 思想,用孩子的视角思考,再配出贴近孩子生活世界的揑图。如果一个揑图只是 表现文章中的一段文字和一个场景,那要想用图来打劢读者,那是很难的。好揑 图除了能用视觉语言来烘托文字的不足之处外,还能和文字一起在读者的脑中升 华。揑图在兼顼了以上的这些要求后,出现的画面就是出色的传达了文字的深层 内容了。 3.在版式流程中编辑在遇到揑图和文字的不和-谐组合时应该怎样去调整? 在工作中我们也许都会遇到杂志在版式流程中,有些版面不和-谐戒揑图和文字 的同时产生阅读障碍的问题发生。 a. 图和文字的组合让阅读有了困难,也就是在文字下面的图的色彩戒纹理影响 文字的清晰度。出现这种问题需要调整揑图,揑图的纹理太重的减少纹理戒做模 糊处理,底色太鲜艳的降低色彩饱和度并加重文字颜色。如果在做了这些劤力后, 仍然有阅读的困难,干脆去掉文字下面的背景揑图。 (8)配电站停电时,必须检查确认进线柜电缆头不带电(检查带电显示器)才能合上 进线柜接地刀闸,配电站送电时,应先检查进线柜地刀是否拉开,防止带地刀送 电。没有地刀的进线柜,严禁私自解锁,防止误入带电间隔。
/
本文档为【临床基因扩增(pcr)诊断实验室工作规范(试行)】,请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑, 图片更改请在作品中右键图片并更换,文字修改请直接点击文字进行修改,也可以新增和删除文档中的内容。
[版权声明] 本站所有资料为用户分享产生,若发现您的权利被侵害,请联系客服邮件isharekefu@iask.cn,我们尽快处理。 本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用。 网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。

历史搜索

    清空历史搜索