复方高原春颗粒对缺氧脑损伤cai区fos蛋白表达的影响

复方高原春颗粒对缺氧脑损伤cai区fos蛋白表达的影响 复方高原春颗粒对缺氧脑损伤CAI区Fos蛋白表达的影响 复方高原春颗粒对缺氧脑损伤CAI区Fos蛋白表达的影响 作者:李朝晖 韩文 郭志坚 张如珍【摘要】 目的 研究中藏药高原 春颗粒对缺氧脑损伤CAI区Fos蛋白表达的影响。方法 利用缺氧脑 损伤模型，通过免疫组织化学方法，观察24 h缺氧结束时及复氧后 24 h两个时段大脑海马CAI区Fos蛋白表达的变化，同时观察预防 性应用高原春颗粒后对上述指标的影响。结果 缺氧后大脑海马CAI 区Fos蛋白表达减少，而服用高原春颗粒后，缺氧大脑海马CAI区 Fos蛋白表达有一定程度的增加。结论 中藏药复方高原春颗粒的抗 缺氧作用可能与影响大脑海马CAI区Fos蛋白表达有关。 【关键词】 高原春颗粒 缺氧 组织化学 fos蛋白 THE EFFECT OF GAO YUANCHUN COMPOUND PILLS ON Abstract Objective To study the effect of Gao Yuanchun Compound on Fos protein expression of CAI area in anoxic brain injury. Methods Objective To use of anoxic brain injury model and detected with Immunohistochemical method. The changes of the brain CAI area Fos expression in two stages of 24h at the end of hypoxia and reoxygenation after 24h was observed. At the same time, the impact of these indicators after the application of TCM herbs was also observed. Results The expression level of the hippocampus CAI area Fos protein reduced in anoxic brain, and a certain degree of growth in same area after the use of TCM herbs. Conclusion Role of anti-anoxia of the Gao Yuanchun compound pills is that it may affect the brain hippocampus CAI area Fos protein expression. Key words Gao Yuanchun pills Anoxic Immunohistochemistry Fos protein 国 内外学者近年来就传统中药在抗脑缺血缺氧损伤中的作用及机制开 展了一系列研究，结果表明人参、银杏、丹参、当归、黄芪等中药具 有一定的抗缺血缺氧作用 ,,，,,。 本研究利用缺氧脑损伤模型， 观察缺氧24 h结束时及复氧24 h时两个时段大脑海马CAI区Fos蛋 白表达的变化情况，并观察预防性应用复方高原春颗粒后对上述指标 变化的影响，以探索高原春颗粒抗脑缺氧损伤作用及其相关机制。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 试验药物 高原春颗粒主要成分为中藏药黄芪、红景天、葶苈子等。处方由青海大学医学院中医系提供，颗粒剂由广东一方制药有限公司提供(批号:0304)。颗粒剂采用动态提取，真空低温浓缩、瞬时喷雾干躁和干法制粒工艺制备，经理化和薄层鉴别，在性状、气味、理化反应、水分、溶化性、含量、卫生学检查等方面均符合相应质量。 1.1.2 实验动物与主要试剂 实验动物:SD大鼠由上海市实验动物中心提供，25只，体重200?20 g，雌雄不拘。试剂:免疫组化试剂，兔抗C-Fos抗体(工作浓度1:1000)和生物素化羊抗兔IgG、 ABC Kit、Texas Red(工作浓度1:200)、 3，3二氨基联苯胺DBA Sigma购自Sigma公司。 1.2 实验方法 1.2.1 分组:25只大鼠适应性喂养1周后，随机分为3组:药物组(10只)、低氧组(10只)、常氧组(5只)。 1.2.2 给药方法:药物组于实验前48、24、1 h灌胃给药，高原春颗粒给药剂量为1g/kg/d，溶于生理盐水，浓度为20,;低氧组和常氧组只给等量生理盐水。 1.2.3 动物模型建立:将低氧组和药物组大鼠放入低压舱，暴露于相当于海拔5000米高度的空气压力环境中，维持24 h。常氧组大鼠置低压氧舱中24 h。 1.2.4 Fos 免疫组化染色与Fos 检测:对缺氧24 h模型大鼠行戊巴比妥(50,100 mg/kg)腹腔注射麻醉，开胸，左心室插管，灌注肝素盐水50 ml(100 u/ml)，迅速剪开右心耳继续灌注4%多聚甲醛磷酸缓冲液300 ml，续灌30 min后开颅取脑，去除小脑和脑干，以4%多聚甲醛固定，常规方法制切片。采用ABC法检测Fos蛋白。另一部分动物出舱后，在常氧条件下饲养24 h，然后再取脑组织作免疫组织化学研究。