酵母菌培养基
麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。马铃薯葡萄糖培养基
有时也可用于培养放线菌。豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的 一种优良培养基。
察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。麦芽汁培养基为天然培养基,马铃薯葡萄糖培养
基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而察 氏培养基则为合成培养基。培养基
配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。
(一)麦芽汁培养基的配制
1(培养基成分
新鲜麦芽汁一般为10-15波林。
2(配制方法
(1)用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15?阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、
中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,
贮存备用。
(2)取一份麦芽粉加四份水,在65?水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检
查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。
(3) 糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水
20 m1,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。
(4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至6(4。
如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用。
(5)如配固体麦芽汁培养基时,加入2,琼脂,加热融化,补充失水。
(6)分装、加塞、包扎。
(7)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。
(二)马铃薯葡萄糖培养基的配制
1、培养基成分
马铃薯 20g 葡萄糖 2 g 琼脂 1.5-2g 水 100ml 自然pH
2(配制方法
(1)配制20,马铃薯浸汁 取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000m1。80?浸泡lh,
用纱布过滤,然后补足失水至所需体积。100 Pa灭菌20 min。即成20,马铃薯浸汁,贮存
备用。
(2)配制时,按每100 m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,继续加热
融化并补足失水。
(3)分装、加塞、包扎。
(4)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。
(三)豆芽汁葡萄糟培养基的配制
1(培养基成分
黄豆芽 10g 葡萄糖 5g 琼脂 1.5-2g 水 100ml 自然pH
2(配制方法
(1)称新鲜黄豆芽10g,置于烧杯中,再加入100 m1水,小火煮沸30 min,用纱布过滤,
补足失水,即制成10,豆芽汁。
(2)配制时,按每100 m1 10,豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g琼脂,继续加热融化,
补足失水。
(3)分装、加塞、包扎。
(4)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。
(四)察氏(czapck)培养基的配制
1(培养基成分
蔗糖 3g NaN03 0.3g K2HP04 0.1g
KCl 0.05g MgSO4?7H2O 0.05 g FeS04 0.001
g
琼脂 1.5-2g 蒸馏水 100ml 自然pH 2(配制方法
(1)称量及溶化 量取所需水量约2,3左右加入到烧杯中,分别称取蔗糖、NaNO3 、
K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培养基加入1ml 0.1,的FeS04
溶液。
(2)定容 候药品全部溶解后,将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。
(3)加琼脂 加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。
(4)分装、加塞、包扎。
(5)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。
YPD培养基
YPD 或YPED,:Yeast Extract Peptone Dextrose Medium(1L),又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养
基,加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖(YPD)琼脂培养基
用于酵母菌的培养
配方:1% Yeast Extract(酵母膏) ,2% Peptone(蛋白胨) ,2% Dextrose (glucose)(葡
萄糖),若制固体培养基,加入2%琼脂粉
配制方法:
1 溶解10gYeast Extract(酵母膏), 20gPeptone(蛋白胨)于900ml水中,如制平板加入
20g琼脂粉
2 高压 121度 20min
3 加入100ml 10×Dextrose (glucose)(葡萄糖),(葡糖糖溶液灭菌后加入)
注:葡萄糖,yeast extract ,peptone溶液混合后在高温下可能会发生化学反应,导致培养基
成分变化,所以要分别灭菌后再混合。
YPEG:除了用3%乙醇和3%甘油代替葡萄糖作为碳源外,其他成分同YPD