气相色谱法测定米格列奈钙中6种有机溶剂残留量

气相色谱法测定米格列奈钙中6种有机溶剂残留量 气相色谱法测定米格列奈钙中6种有机溶剂 残留量 药物分析杂志ChinJPharmAnal2006,26(11)--——1681.——— 气相色谱法测定米格列奈钙中6种有机溶剂残留量 寻延滨,姜连阁,白政忠 (黑龙江省药品检验所,哈尔滨150001) 摘要目的:建立米格列奈钙中6种有机溶剂残留量的分离测定方法.方法:采用顶空进样毛细管气相色谱法,FID检测器, 色谱柱为HP—INNOWax毛细管柱,载气为氮气,柱温3O?,测定了米格列奈钙原料中乙醚,四氢呋喃,乙酸乙酯,甲醇,二氯 甲烷和乙醇的残留量.结果:6种有机溶剂完全分离,在所考察范围内线性关系良好,加样回收率均得到满意结果.结论:本 实验建立的方法灵敏,准确,适用于米格列奈钙中有机溶剂残留量的检测. 关键词:米格列奈钙;有机溶剂残留量;顶空气相色谱法 中图分类号:R917文献标识码:A文章编号:0254—1793(2006)11—1681—03 Capillarygaschromatographicdetermination ofsixresidualsolventsinmitiglinidecalcium XUNYan—bin,JIANGLian—ge,BAIZheng—zhong (HeilongiiangInstituteforDrugControl,Harbin150001,China) AbstractObjective:Toestablishamethodfordeterminationofsixresidualsolventsinmitigli nidecalcium. Methods:Theresidualsolventsinmitiglinidecalciumwhichareether,tetrahydrofuran,ethyl acetate,methanol,di— chloromethane.ethanolwerequantitativelydeterminedbyheadspaceGConHP—INNOWaxcolumn.withFIDde. tector,nitrogenasthecarriesgas,theintialtemperaturewaske:ptat30?.Results:SixresidualsolventswereCOrn— pletelyseparated.Thereweregoodlinearityandtherecoveriesweresatisfied.Conclusion:Th emethodissensitive, accurateandcanbeusedforqualitycontro1. Keywords:mitiglinidecalcium;residualsolvents;headspaceGC 米格列奈(mitiglinide)是刚上市的抗糖尿病药, 米格列奈钙为米格列奈的水合钙盐形式(图1).米 格列奈的作用机制类似于磺酰脲,但用药后的起效 速度比磺酰脲更快,且作用持续时间不长,可仅降低 的 糖尿病人的餐后血糖,从而避免了持续降糖引发 血糖过低.本品在合成过程中使用了乙醚,四氢呋 喃,乙酸乙酯,甲醇,二氯甲烷和乙醇等多种有机溶 剂_】|2J,但溶剂残留量的检测方法国内未见报道. 本文采用毛细管气相色谱法同时测定上述6种有机 溶剂,方法简便,灵敏,准确. l仪器与试剂 Agilent6890N型气相色谱仪,Agilent7694E型 顶空进样器,FID检测器(安捷伦科技有限公司). 乙醚,四氢呋喃,乙酸乙酯,甲醇,二氯甲烷,无水乙 醇和硫酸均为色谱纯,水为超纯水,米格列奈钙样品 第一作者Tel:(0451)53638792—8223:E—mail:xunxyb@yahoo.coln.cn 由某公司提供(批号:040401). H C H 图1米格列奈钙的分子结构式 Fig1Structuralformulaofmitiglinidecalcium 2气相色谱条件 色谱柱:HP—INNOWax弹性石英毛细管柱(固 定相为交联变性聚乙二醇,30m×0.32mm×0.5 m);气化室温度250~C;检测器温度250~C;柱温: 药物分析杂志ChinJPharmAnal2006,26(11) 30;载气(N2)流速:1.0mL?min,;空气流速: 450mL?min,;氢气流速:40mL?min,;分流比为 15:1.顶空温度80?,平衡时间25min. 3储备液配制 分别精密称取乙醚,四氢呋喃,乙酸乙酯,甲醇, 二氯甲烷和无水乙醇适量,置25mL量瓶中,加1 mol?L的硫酸溶解制成每1mL中含乙醚2.0 mg,四氢呋喃0.288mg,乙酸乙酯2.0mg,甲醇1.2 mg,二氯甲烷0.24mg,乙醇2.0mg的溶液,作为标 准储备液. 4线性关系考察 精密移取标准储备液0.5,1.0,2.0,3.0,4.0, 5.0rnL,分别置10mL量瓶中,加1mol?L的硫酸 溶液稀释至刻度,摇匀,作为标准溶液I,?. 取标准溶液I一?各5.0mL,分别置20mL顶 空瓶中,加盖密封,在80下平衡25min后进样, 标准溶液?的图谱见图2.以峰面积y为纵坐标, 浓度(,g?mL)为横坐标进行线性回归,得线 性方程.结果见表1. 1 3 2』\夏一6 网26种有机溶剂的分离色谱图 Fig2Chwmmogamsofthesixsolvents 1.乙醚(ether)2.四氢呋喃(tetrahydrofuran)3.乙酸乙酯(ethyl acetate)4.甲醇(methano1)5.二氯甲烷(diehlommethane)6.乙 醇(ethano1) 表1回归方程与线性范围l,l=6) Tab1Linearrangeandregressionequationsofcalibrationcurve 5最低检出限和定量限 在本方法所确定的实验条件下,逐步稀释标准 储备液,根据乙醚,四氢呋喃,乙酸乙酯,甲醇,二氯 甲烷,乙醇6种残留溶剂在气相色谱上响应值与噪 声的比值(S/N=3),确定最低检出限分别为 0.125,0.720,0.391,2.296,0.376,3.472g. mL..;以S/N=10计算定量限,结果分别为0.417, 2.4O0,1.303,7.653,1.253,l1.57g?mL,. 6精密度试验 照"3"项下标准储备液的配制方法,称取等量 的对照品,置100mL量瓶中,同法稀释至刻度,作为 对照品溶液.取6份,每份5.0mL,分置20mL顶 空瓶中,同法测定,结果乙醚,四氢呋喃,乙酸乙酯, 甲醇,二氯甲烷,乙醇的RSD分别为4.9%,3.1%, 4.0%,9.7%,5.4%,6.5%. 7回收率试验 取本品(已知溶剂含量)0.5g,精密称定,共9 份,置20mL顶空瓶中,分别加入下述溶液各5.0 mL(照"3"项下标准储备液的配制方法,按中国药 典附录指导原则中J,照各溶剂检查限度的 80%.100%和120%分别称取相应的对照品各3 份,置100mL量瓶中,加1mol?L..的硫酸稀释至 刻度),加盖密封,同法操作,得样品加入相应浓度 溶液后的色谱图.按外标法计算回收率.结果见表 2. 8稳定性实验 取对照品溶液,于0,6,8,24h分别进样测定, 各组分乙醚,四氢呋喃,乙酸乙酯,甲醇,二氯甲烷, 乙醇峰面积的RSD分别为7.2%,7.7%,3.6%, 9.7%,4.1%,6.8%,表明此溶液在24h内稳定. 9样品测定 精密称取样品约0.5g,置20mL顶空瓶中,精 密加1mol?L的硫酸5.0mL,加盖密封,照上述 色谱条件测定,3批样品中6种有机溶剂均未检出. 药物分析杂志ChinJPharmAnal2006,26(11)一1683一 lO讨论 lO.1溶剂的选择本品在冰醋酸中易溶,在甲醇 和水中微溶,在?,?一二甲基甲酰胺(DMF)和二甲 基亚砜(DMSO)中几乎不溶.考虑到该药中检查乙 醇的残留量,而冰醋酸在加热条件下可能和乙醇反 应生成乙酸乙酯,所以改用其他溶剂J.鉴于该药 在冰醋酸中易溶,提示在酸性条件下可能溶解,所以 改用不挥发的无机酸.经实验发现1tool-L的硫 酸能溶解样品,且实验证明回收率在89%,120% 之间,最后确定采用ltool?L的硫酸作为溶剂. lO.2色谱柱的选择本实验先后选择了HP一5, DB一624和HP—INNOWax毛细管柱,但在HP一5 柱上甲醇,乙醇和乙醚的分离效果不好,在DB一624 柱上乙醇和乙醚的分离效果也不理想,所以最后选 择HP—INNOWax毛细柱,能满足实验要求(理论板 数均不低于10000). lO.3柱温的选择由于被测成分中四氢呋喃和 乙酸乙酯峰位很近,乙醚出峰时间较短,其他组分保 留时间均不超过10rain,调整各种条件最终确定为 30?,可以达到理想的分离效果. 10.4顶空时问的选择精密度试验显示,6次进 样的RSD均小于10%,表明顶空时间为25rain时 气液两相达到了平衡. 参考文献 1AmericanPatent(美国专利).US006133454A 2JapanesePatent(日本专利).特阴2001—261644 3ClaP(中国药典).2005.Vo1?(二部):172 4ChP(中国药典).2005.V01?(二部):54 (本文于2006年8月2日修改回) 欢迎订阅2007年《中国药物化学杂志》 《中国药物化学杂志》是由沈阳药科大学与中国药学会共同主办,沈阳药科大学承办,国内惟一专 门反映药物化学学科的科技成果与科研动态的专业性学术期刊.本刊设有研究,研究简报,快报, 综述等栏目,涉及新药研究,药物合成方法,合成工艺改进,天然药物有效成分研究,重要药物中间体合 成等内容.本刊被美国化学文摘(CA)等文摘性刊物收录,为国家科技部中国科技论文统计原期刊.本 刊为双月刊,大l6开,64页,每期定价6.50元.国内邮发代号8—101,国外发行代号BM5991.欢迎广 大读者通过当地邮局订阅. 地址:沈阳市文化路103号邮编:l10016 电话:024—23986082,024—23986086.024—23994540; 传真:024—23986086 E—mail:zgyh@chinajourna1.net.cn