[资料]保健食物中脱氢表雄甾酮

[资料]保健食物中脱氢表雄甾酮 保健食品中脱氢表雄甾酮(DHEA)的测定 1 范围 本方法了保健食品中脱氢表雄甾酮(DHEA)含量的测定方法。 本方法适用于添加在片剂、胶囊等试样类型中功效成分脱氢表雄甾酮(DHEA)含量的测定。 本方法的最低检出量6.00mg/kg。本方法的最佳线性范围:0.0400,10.0mg/mL。 2 原理 将粉碎的胶囊和片剂试样使用流动相进行提取和稀释，根据高压液相色谱紫外检测器定性定量检测。 3 试剂 (1)甲醇:优级纯 (2)脱氢表雄甾酮(DHEA)溶液:准确称量脱氢表雄甾酮(DHEA)标准品(Sigma公司，纯度99%)0.0100g，加入检测用流动相并定容至10mL。此溶液每mL含1mg脱氢表雄甾酮(DHEA)。 4 仪器设备 )高效液相色谱仪:附紫外检测器(UV)。 (1 (2)超声波清洗器。 (3)离心机。 5 分析步骤 (1)试样处理:取20粒以上片剂或胶囊试样进行粉碎混匀，准确称取试样(精确至0.001g)于容量瓶中，加入流动相定容至10.0mL，使浓度为每mL中含脱氢表雄甾酮(DHEA)1mg。超声提取5min后以3000rpm/min离心3min。准确取2.0mL试样溶液于试管中，加入流动相定容至5.0mL，摇匀。经0.45μm滤膜过滤后，备用。 (2)液相色谱参考条件 a 色谱柱:C18柱 4.6×250nm。 b 柱温:室温。 c 紫外检测器:检测波长215nm。 d 流动相:甲醇:水,80:20 e 流速:0.6mL/min。 f 进样量:10μL。 g 色谱分析:取10μ L 标准溶液及试样溶液注入色谱仪中，以保留时间定性，以试样峰高或峰面积与标准比较定量。 h 色谱图(图略):在上述色谱条件下，脱氢表雄甾酮(DHEA)的保留时间为7.40。 (3)标准曲线制备:分别配制浓度为0.0、0.0400、0.200、1.00、5.00、10.0mg/mL脱氢表雄甾酮(DHEA)标准溶液，在给定的仪器条件下进行液相色谱分析，以峰高或峰面积对浓度作标准曲线。 (4)分析结果表示 a 计算 h1×C×V5 X, ————— h2×m×2 式中: X-试样中脱氢表雄甾酮(DHEA)的含量，mg/g; h1-试样峰高或峰面积; C-标准溶液浓度，mg/mL; V-试样定容体积， mL; H2-标准溶液峰高或峰面积; m-试样质量，g。 b结果表示 保留三位有效数字。 6 技术参数 准确度:方法的回收率在91.5,,96.0,之间。 允许差:平行样相对误差??5,。