【doc】维拉帕米与1—荷包牡丹碱合用对体外KB细胞增殖的影响

【doc】维拉帕米与1—荷包牡丹碱合用对体外KB细胞增殖的影响 维拉帕米与1—荷包牡丹碱合用对体外KB 细胞增殖的影响 /}l一 维拉帕米与卜荷包牡丹碱合用对体外KB细胞增殖的影响 第三军医大学三新制药]-(630038)赵春景 云南省肿瘤研究~(650051)吐. 2 /提要低剂量1一荷包牡丹碱和无毒剂量的雏拉帕米夸用对细胞增殖的抑制作用 比单用l_荷包牡丹碱时增强.其半 /掷制浓度Ic值下降刮单独应用l前包牡丹碱的1/8.联合用药后的细胞集落形成 率比单独用卜荷包牡丹碱下降i/3~20 '————,一 Effectofl-DicentrineWithVerapamilontheProliferationofKBCellsinVitro ZhaoChunjing/SanxingPharmaceuticalFactroy.TheThirdMilitaryMedicalUniversity(6~0381 JiaWel/CancerInstituteofYunnanProvince(63~051) ABSTRACTTheeffectsofl-dicentrinealoneandtogetherwithverapamilontheproliferationofKBcelinvitro werestudiedIC?ofl-dicentrinealonetoKBcellswasabout59× l01mol,Lwhichwaftdecreasedto73×10一mo— l'L-,whenpluBverapamil10flg/mlIncolonytest,thesurvivalfractionsoftheceHstreatedwith卜dicentrine2.4,l6,08 × 10'mol,Lplusverapamil60#g/mlwere1/20,1/8,1/3ofthecellstreatedwith1-dicentrinealone,respectively.The resultssuggestthatverapamilc~tnenhanceantitumoractivityofl-dicentrineinvitroandmaybeusedasanenhancerof 卜dicentrineinvivo KEYWoRDSverapamill-elicentrineKBcel 荷包牡丹碱对人肺癌GLC细胞系,HeLa细胞均有较好的 杀伤作用?以前曾用其作为镇痛药使用,虽然安全剂量每次 20--60mg~较大.但其严重的胃肠道反应阻碍了其进一步在 临床应用.本文旨在探讨维拉帕米是否能增强荷包牡丹碱对 KB细胞的杀伤作用,进而为荷包牡丹碱过渡到临床作为抗癌 药物使用提供有效的证据. 一 ,材料和方法 盐酸维拉帕米rver)系德国Knoll公司产品,l前包牡_丹碱 系云南中医学院中草药资源开发研究室提供,盐酸Ver加生理 盐水溶解,过滤,灭菌.卜荷包牡丹碱加lNHSO.溶解后,加1 NNaOH调pH5--6.过滤,灭菌,药物均加生理盐水调配成所 需浓度.放4.C备用. KB细胞由云南省肿瘤研究所提供.用含15~20小牛血 清的PRMI一1640~养液(加适量青链霉紊),37C培养. 体外培养细胞增殖抑制实验:将KB细胞按6,7×10'/ml 浓度(共0.9m1)接种于小圆瓶(内置11×llmm盖玻片),4h后, 分为4组:生理盐水对照组,Ver组.荷包牡丹碱组.荷包牡丹碱 +Ver组.加药后,置37.C培养.48h后,Carnoys液固定,HE 染色,镜下计数,结果以加药组与对照组活细胞数表示. 体外培养细胞集落形成率测定:收获对数生长期细胞.胰 酶消化,反复吹打成单个细胞悬液,按50~O/ml浓度(共0.8m1) 接种于小圆瓶(内置II×1Imm盖玻片),候其贴壁,分4组加人 药物:生理盐水对照组,Ver组.荷包牡丹碱组.荷包牡丹 碱+Ver组.加药后置37.C培养1,5h,然后除去吉药培养液,加 入5ml培养液,置37.C培养,待多数集落达到5O个细胞以上后, Carnoy,8液固定,HE染色,镜检各盖玻片上细胞集落数,结果 以实验组与对照组集落数%表示. 二,结果 中国药房l996年第7卷第3期 1.卜荷包牡丹碱单用及与Ver合用对KB细胞增殪的影 响以对细胞增殖有一定抑制作用的卜荷包牡丹碱浓度f1.5 ×10mol?L以下1,和对细胞增殖无影响的Ver浓度f10 .结果表明,以卜荷包牡丹碱1.5 #g/m1),单独和联用于KB细胞 ×10,,3×10,,3×10mol-L1单独处理为对照,卜荷包 牡丹碱浓度增加,活细胞数目下降,半抑制浓度IC.值由 5.9×10一tool-L1下降为7.3×10mol?L.即IC值下降到 单独应用荷包牡丹碱的1/8.这说明Ver的使用大大增强了荷 包牡丹碱对肿瘤细胞增殖的抑制作用. 2,Ver对卜荷包牡丹碱细胞毒性的影响显示细胞毒性 的细胞集落形成率实验结果表明:2.41.60.8×10一mo— l?L1的I一荷包牡丹碱与60#g/mlVer联合处理,集落数分别下 降为对照组的0.05,1.9,19,9,联台用药较单独用药分 别下降20,8和3倍,这充分说明Ver使卜荷包牡丹碱对细胞的杀 伤作用增强.因为60#g/mlVer单独处理KB细胞后对细胞集 落形成率无影响. 三,讨论 在癌症化疗中失败的原因之一往往是由于在治疗过程中 肿瘤细胞对药物产生抗性".虽然高剂量药物能在一定程度 上克服抗性,但是剂量加大对正常组织的毒性也台增加,维拉 帕米能增强博来霉素A5在体外对小鼠肉癌S一180细胞增殖的 抑制作用,在体内能增强博来霉素A5的抑瘤效应,在博来霉紊 A5单用的基础上适当延长荷癌小鼠的存活时间.本实验表 明,无毒剂量的维拉帕米能增强卜荷包牡丹碱对KB细胞增殖 的抑制作用,还能增强卜荷包牡丹碱对KB细胞的毒性.这个事 实说明有可能以低剂量的卜荷包牡丹碱加上Ver获得与高剂 量卜荷包牡丹碱单用相同的疗效,从而减轻卜荷包牡丹碱的不 良胃肠道反应,这为具有镇痛作用的卜荷包牡丹碱过渡到临床 作为抗癌药使用提供了充分的证据和有效合理的,给临床 l1l }fz,,// 颐康冲剂对顺铂,喜树碱,环磷酰胺的增效作 用及其对毒性影响的实验研 哈尔滨医科大学肿瘤药物研究所(150o40)堡查堡逝|吴玉波于桂兰 /提要颐康冲荆是用香菇,当归,缸参颁等l6昧药材制成的纯中药肿瘤化疗增效荆. 本文研究了颐康冲荆对顺铂, 喜树碱环磷酰胺的增效作用厦其对毒性的影响,结果表明.颐康冲剂对顺铀,喜树 碱有显着增效作用,p<0.05,0.001; 但对环磷酰胺有极显着减效作用,p<0.OOL.对3种化疗药物所致小鼠免疫器官 萎缩,巨噬细胞吞噬功能降低,NK细胞活 性下降,染色体畸变厦白细胞减少等毒副反应,有显着拮抗作用,井能明显提高机 体免疫琦能 关键词颐康冲荆顺铂喜树碱环磷酰胺增效作用毒性 _——一,,——,,, AnExperimentalStudyontheSynergeticandAdveresReactionResistantEffectsof YikangGranuleonCis-.p】 LatinumDiamtnodlachlorideCampotothecineandCyclophosphamtde ZhangYongheng,LiFengyun.WuYubo,.YuGuilan/InstituteofAntine0pla8ticAgents. HarbinMedicalUniversiltry,(1500+0) ABsTRACTYikon~granuleisasynergistofant_neoplasticagents.Itiscompos~of16herbssuchLentinus edode~RadixAngellicaeSinensisandRtedix(HensengRubraThesynergeticandadversereactionre8iBtan'effec:tsof "ikanggranuleoncplatinumdiaminodiachlor'ide(CPD)1compotothecine{CAM)andcyclophosphamide{CYC)were studiedTher曲llltsshowedthattheSynergcticeffectsweresignificantonCPDandCAM(p<0.05~0.?1)andmarkedly 日iEni丘can'onCYC(p<O0O1):ItCOUldlsignificantlyresisttheadversereactions,suchaBatrop hyofimmueorgans, decreaseofphagocyticfunctionofmacrophage.decreaseofactivittryofNKcell,chromosom alaberra~LOnandleukopenia. inducedbychemicalanticarcinogenicdrugsinrats;Itcouldenhancethe~amuni竹ofbody KEYWORDSYikanggranulecis—platinumdiaminediachloridecampotothecine effecttoxc】try 颐康冲剂对阿霉索丝裂霉素,氟尿啼啶的增效解毒作用, 已见报道n.现将颐康冲剂与顺铂,喜树碱,环磷酰胺联合用药 的增效作用及其对毒性影响的实验研究情况.报道如下. 一 ,实验材料 1.药物颐康冲剂(JTT一?),本院肿瘤药物研究室制备. 由香菇,当归,红参须等16味药材提取制成,每l冲剂含生药总 量1000mg.顺铂针剂(DDP),出东齐鲁制药厂产.喜村碱针 剂(CPT).广西东兰制药厂产.环磷酰胺粉针(CTX】.上海第十 二药厂产. 2.动物与囊谱昆明种和C小鼠,旱S兼用.体重 20+2g.由黑龙江省肿瘤研究所动物室提供.瘤谱用小鼠S HLewis3种,从中国医学科学院肿瘤研究所引进.本院肿瘤 药物研究室传代接种. 二,方法与结果 cyclophosphamidesynergetic 1.JTT?对DDP,CTP殛CTXI呻囊率的影响按全国抗 癌药物研究筛选规程依法实验.依表1剂量ip给药.连续7d.处 死动物.称取瘤重,计算抑瘤率.结果见表l_ 表1JTT一?对DDP,CP,r殛CTX抑囊率的影响n=10x2 -——:—————:———:—— @自276~0明】18~0.鲫289~0 @DDP'~1O%?039Oa2?014O站?024B9202BB682 …0DDP+1OE-5~026O14~0t0O聘?017日0…嚣13…79?? J盯一?目300 0白31O~2.8g2??03B c 嚣:一 ?800 0白2Ii0~076120~0?2蚰?O柏 @cf瑚2012h~047052~0"1.10?O鹞砧抽怫 c假:~bcrx+?t*?00?O2T1?OlO.1…27曲",啦92… ?{? p<0岵?p<mm…p<O~l 从表l可厦+JTT--?与DDP,CPT及CTX分别伍用抑瘤率 曾经用作镇痛药的荷包牡丹碱带来了新的希望,使荷包地不 容?等药用植物资源的利用有了新的可能性.维拉帕米增强卜 荷包牡丹碱抗癌活性的机理有待于研究. 参考文献 [1]赵春景.等.中国药理学通报1992;81[5]~:398 [2]云南省药品标准.昆明:云南科技出版杜,1974:241 车课题为黑龙扛省中医局八五重点资助课题 112' [3]SchableFM.etalCancer(Phila119"『5:35:l5 [4]SchableFM,eta1.ConceptsforControllingDmr resistantTumotCe】】8,In:M[ourrideen丑IT.Palahof T.ede.BreastCancer.Oxford:PergamonPress. 1980:l99,21l [5]何农高,等.中国药理1990;11(4):381 [6]闵知大,等.中草药1984;15(1):8 中国药房l帅6年第7卷第3期