茶树菇粗多糖水提醇沉工艺优化研究

茶树菇粗多糖水提醇沉优化研究 茶树菇粗多糖水提醇沉工艺优化研究,科学论坛, 赵 海 约2054字 【摘要】:目的:优化筛选茶树菇粗多糖水提醇沉工艺。方法:以茶树菇多糖得率为考察指标，采用正交设计法对提取工艺中水提取次数、提取时间、提取次数三个因素进行优化研究;再对醇沉的工艺中醇沉液的乙醇浓度三个因素进行优化研究。结果:茶树菇粗多糖提取以加水量10倍、提取时间2小时，提取次数3次为最优化工艺;醇沉液的乙醇浓度为85%时醇沉效果最佳。 【关键词】: 茶树菇;粗多糖;水提醇沉;工艺优化 中图分类号:Q5 文献标识码:B 文章编号:1002-6908(2007)0120054-01 茶树菇(Agrocybe aegerita)隶属于担子菌门、层菌纲、伞菌目、粪锈伞科、田蘑属，又名柱状田头菇。中医学认为茶树菇性平甘温，有祛湿、利尿、健脾胃等功效。其主要成分多糖，具有抗衰老，降低胆固醇，增强免疫作用，防癌和抗癌等功效，是一种极具开发潜力的真菌[1]。但目前，对其多糖提取分离方法的系统研究报道极少，因此文章对茶树菇粗多糖的提取分离方法的工艺流程进行了系统的考察。 1(仪器与材料 仪器:751G分光光度计(上海仪器厂);电子天平(上海精科天平厂);旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)等。 材料:茶树菇(自购);葡萄糖标准品(上海化学试剂公司);苯酚(成都化学试剂厂);其它试剂均为分析纯。 2(方法与结果 2.1 多糖含量测定方法的确定 2.1.1 葡萄糖标准溶液的配制 取葡萄糖0.25g，精密称定，加蒸馏水定容于250ml容量瓶中，摇匀，精密吸取10ml置100ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，作为对照品溶液。 2.1.2 标准曲线的绘制 分别精密吸取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml置干燥具塞试管中，分别加水使成2.0ml，再分别加人4, 苯酚溶液1.0ml摇匀，最后迅速加入浓硫酸7.Oml，充分振摇，在4O? 水浴中加热30min，取出置冷水浴中放5min，在490nm处进行比色测定，同时做空白对照，测定吸光度。以吸光度对葡萄糖浓度作线性回归,得回归方程:y=5.64x-0.0522 (R=0.9997)。实验结果表明，葡萄糖在0.02,0.10mg范围内相关性良好。 2.2 提取工艺的优化 2.2.1 提取方法的考察因素与水平 据文献及预试验结果[2],采用水煮沸浸提,其中加入的溶剂量,提取时间,提取次数对实验结果有影响,因此本实验采用正交设计法L9 (34 )表,以茶树菇粗多糖含量为考察指标进行实验。 2.2.2茶树菇水提供试品的制备 将干茶树菇子实体粉碎，分别称取20g，置圆底烧瓶中，按L9 (34 )表中各因素水平安排进行提取，提取液过滤、浓缩、定容至100ml，按以蒸馏水做对照，按2.1.2项下方法分别测定其多糖含量。提取结果及方差分析见表2、3。 2.3醇沉精制工艺 将干茶树菇子实体粉碎，分别称取3份，各20g，按所得最佳提取工艺提取，浓缩至相对密度1.1，分别加无水乙醇使乙醇浓度分别达65%、75%和85%，醇沉24小时，将醇沉物过滤，洗涤，加水溶解定容100ml。以蒸馏水做对照，按2.1.2项下方法分别测定多糖含量.平行实验3次，结果见表4。 2.4 提取正交试验结果和分析 由实验结果可知，因素C对试验结果有显著影响，而因素A和C对试验结果的影响不显著，影响提取的因素主次顺序为C,B,A。结合经济、节约的原则可确定最佳提取工艺为加水量10倍、提取时间2小时，提取次数3次，效果最佳。 2.5 醇沉结果分析 由实验结果可知，醇沉液的乙醇浓度达85%效果最佳。 3(讨论 文章的粗多糖的含量测定方法采用苯酚-硫酸法[3]，是利用多糖在强酸条件下脱水生成糠醛或其衍生物，然后与酚类缩合生成有特殊颜色的物质进行比色。该法操作简单、快速、反应灵敏，重现性好。经水提后得到的粗多糖，由于含有单糖、蛋白质等杂质，醇沉后可有效的消除这些杂质成分，得到相对较纯的多糖产品。 参考文献 [1] 许旭萍、余晨兴、李惠珍，柱状田头菇的栽培及生物化学研究概况[J](药物生物技术，2003，10(2):117,120. [2] 王红梅、鲍大鹏、杨立民，柱状田头菇胞内外多糖的提取和测定[J](安徽农业技术师范学院学报，2000，14(3):18-20. [3] 黄瑞松, 中草药多糖含量测定方法概述[J]. 中国药师, 2005，8(1): 68,70. 注:本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。