血细胞分析作业指导书

血细胞分析作业指导书 血细胞分析检验程序 1 检验目的 检测血液中血细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量、白细胞分类及相关参数(HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW及MPV等)的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。 2 检测原理 血常规检查方法采用血细胞自动分析仪法，参见《全国临床检验操作规程》 11，部分白细胞分类计数采用显微镜检查法，参见《全国临床检验操作规程》p7, p5,7。 2.1 电阻抗法血细胞计数(光电6318-K):即在细胞检测器微孔的两侧各有一个电极，两电极间通有恒定电流，经过稀释液(电解质溶液)稀释的血样(血细胞)在通过检测器微孔时，产生了一个电脉冲;脉冲的高低代表细胞体积的大小，脉冲的个数代表细胞的数量。 2.2 细胞化学和光散射法白细胞计数(Ac.T 5-diff):即将血液经过细胞化学试剂染色，不同的白细胞胞浆内部即可出现不同的酶化学反应。当这些细胞通过测量区时，由于酶反应强度不同和细胞体积大小差异，激光束射到细胞上的前向角和散射角不同，以X轴为吸光率，Y轴为光散射，每个细胞产生两个信号结合定位在细胞分布散点图上。计算机对存储的测量信息进行分析处理，得出白细胞总数和分类计数结果。 2.3 多角度激光法白细胞计数(XE-2100 XT-1800i):在白细胞分类通道:全血加入溶血剂(FD-?和FD-?)作用后，嗜酸性粒细胞内颗粒被染色;其它白细胞略有皱缩。WBC/BASO通道:全血加入溶血剂(FB)溶血。除BASO外，其它白细胞均明显皱缩。仪器从低角度及高角度分析白细胞的内部结构。计算机对存储的测量信息进行分析处理，得出白细胞总数和分类计数结果。 2.4 光电比色法测量血红蛋白:在稀释的血样中加入溶血剂使红细胞膜破裂释放出血红蛋白，后者与溶血剂中有关成分结合形成Hb衍生物，进入Hb测试系统，在特定波长(一般在530,550nm)下比色，吸光度的变化与液体中Hb含量成正比，仪器便可显示其浓度。不同型号的血细胞分析仪配套溶血剂配方不同，形成的Hb衍生物亦不同，其吸收光谱各异但最大吸收均接近540nm。 2.5 光散射法红细胞和血小板计数(Ac.T 5-diff):以二维激光散射法检测红细胞和血小板。红细胞测试原理是:在测试系统中，全血与红细胞/血小板稀释液混合，使自然状态下双凹盘状扁平圆形的红细胞成为球形并经戊二醛固定，此种处理并不影响MCV体积。红细胞无论以何种方位通过测量区时，被激光束照射后所得的信号是相同的。激光束以低角度前向光散射和高角度光散射同时测量一个红细胞，根据低角度光散射转换能量大小，测量单个红细胞体积与总数;根据高角度光散射得出单个红细胞内血红蛋白浓度。血小板与红细胞在一个系统中测量，其原理是:根据同质性球体光散射的Mie理论，当球形化的血小板单个通过激光照射区时，仪器在两个角度测定激光的散射强度:高角度主要测细胞的折射指数(RI)，它与细胞的密度有关;低角度主要测细胞体积的大小。血小板的体积在1,30fl，RI在1.35,1.40之间。计算机对存储的测量信息进行分析处理，得出红细胞和血小板计数结果。 2.6 显微镜白细胞分类计数:把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，经瑞氏染料染色后，在显微镜下根据白细胞形态特征予以分类计数，得出相对比值(百分率)，并观察细胞形态的变化。 3 设备性能参数 血细胞分析仪的操作性能因仪器的种类与型号不同而异。 3.1 XE-2100 XT-1800i血细胞分析仪 93.1.1 本仪器检测血细胞的线性范围为:WBC:(0.0,100.0)×10/L，RBC: 129(0.0,8.00)×10/L;HGB:0.0,250g/L，PLT:(0.0,1000)×10/L。 3.1.2 本仪器检测血细胞的精密度为:WBC:?2.0%，RBC:?2.0%，HGB:?2.0%，PLT:?5.0%。 3.2 MEK-6108K MEK-6318K血细胞分析仪 93.2.1 本仪器检测血细胞的线性范围为:WBC:(0.0,99.99)×10/L，RBC: 129(0.00,9.99)×10/L，HGB:0,299g/L，PLT:(10,999)×10/L。 3.2.2 本仪器检测血细胞的精密度为:WBC:?3.0%，RBC:?2.0%，HGB:?2.0%和PLT:?5%。 3.3 Ac.T 5diff 血细胞分析仪 93.3.1 本仪器检测血细胞的线性范围为:WBC:(0.4,90.0)×10/L，RBC:(0.23, 1297.70)×10/L，HGB:0,229g/L，PLT:(4,1000)×10/L。 3.3.2 本仪器检测血细胞的精密度为:WBC:?3.0%，RBC:?2.0%，HGB:?2.0%和PLT:?6%。 4 标本 4.1 临床护士抽取患者抗凝静脉血2,3ml。 4.2 采血后立即送到临床检验科。 4.3 血量不够1ml或血液凝固、溶血或严重脂血标本不能作检测。 5 设备和试剂 5.1 设备:XE-2100、XT-1800i、MEK-6108K、MEK-6318K 血细胞分析仪。 5.2 试剂 5.2.1 稀释液、溶血剂和清洗液。 5.2.2 CBC试剂、DIFF试剂、消泡剂和鞘液冲洗液。 5.2.3 瑞氏染液及缓冲液。 5.3 购买的试剂应放室温保存，注意防尘、防潮。 5.4 开封后的试剂应尽快用完，变质、超过有效期的试剂不能使用。 6 容器及试剂添加剂 血液标本采集的容器是一次性含EDTA-K2抗凝剂的真空采血管;血液标本必需添加剂是EDTA-K2抗凝剂。 7 校准步骤 血细胞分析仪的操作过程分别见XT-2100 XT-1800i血细胞分析仪标准操作程序、Ac.T 5-diff血细胞分析仪标准操作程序、和MEK6108-K MEK6318K血细胞分析仪标准操作程序中仪器校准程序。 8 操作步骤 8.1 申请单及标本编号 整理血液常规检验申请单及血液标本，审核合格后，对检验申请单和血液标本进行编号。 8.2 上机测试 操作过程分别见XE-2100血细胞分析仪标准操作程序、XT-1800i血细胞分析仪标准操作程序、Ac.T 5diff血细胞分析仪标准操作程序和MEK6108-K MEK-6318K 血细胞分析仪标准操作程序标准操作程序。 8.3 检验结果的输入 8.3.1 打开电脑，启动“检验程序”，输入用户名及口令后，进入检验程序。 8.3.2 单击“检验”菜单，选择“检验结果录入\修改”，进行检验结果的录入及修改。通过申请序号进行结果的输入，选择“工作单号”(XE-2100 XT-1800i 自动传输:扫入当前检验标识序号;Ac.T 5diff自动传输:扫入当前检验标识序号;MEK-6108K MEK-6318K测定结果和其它非自动传输标本:输入病人姓名)，仪器会自动传输入检测结果;同时输入当前患者的样品“采集时间”和“接收时间”。 8.3.3 仪器检测结果必要进一步镜检标准 8.3.3.1MEK-6318K和MEK6108-K血细胞分析仪等三分类仪器检测的标本全部需要镜检血涂片。 8.3.3.2XE-2100 XT-1800i和Ac.T 5diff血细胞分析仪等五分类仪器检测结果根据本程序第18款[白细胞五分类血细胞分析仪的白细胞分类筛选原则]选出需要做血涂片检查的血标本。 8.3.3.3 临床医生要求做红细胞、白细胞、血小板等形态检查的血标本。8.4 显微镜检查操作步骤 8.4.1 制片:静脉抗凝血标本混匀或末梢血标本，采血后推成厚薄适宜的血膜片，血膜应呈舌状，头、体、尾清晰可分。推好的血膜在空气中晃动，以促使快干，以免细胞变形缩小。 8.4.2 染色:平置玻片于染色架上，滴加瑞氏染色液3,5滴，使其迅速盖满血膜，约1分钟后，滴加缓冲液5,10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分混和，5,10分钟后用水冲去染液，待干。 8.4.3 镜检:先用低倍镜或高倍镜阅览全片，注意观察血片染色情况:如有无血小板或红细胞聚集，片尾有无巨大异常细胞，再结合仪器警告的，分别重点从白细胞分类、红细胞参数和血小板参数等方面进行观察，记录各类细胞结果。 8.5 镜检结果的输入及确认 单击“结果处理”菜单，选择“报告确认”进入结果确认，通过选择“工作单元”、“报告日期”、“单张”或“批量”后，按“提取”键提取检测结果，对检验结果进行逐一确认。 8.6 检测过标本及废物的处理 检测过的血液标本、废液及经血液标本污染的各种废物按血液常规标本的采集与处理程序(文件编号:PLA301-LJK–CJ-001)中4.14进行处理。 9 质量控制 9.1 室内质控:周一,五每天做室内质控(厂家提供的质控物)。测定过程是:从4,8?冰箱取出全血质控物置室温，血细胞分析仪开机后预热20min，分别将质控物混匀后上机检测，打印结果并与允许值范围对比，质控合格后才能检测病人血标本。对于失控应按质量控制程序处理，仪器质量控制当天的情况进行逐一登记。 9.2 室间质控:每月参加科内的室间质控考评2次。每年参加卫生部和WHO室间质控。 9.3 细胞分类计数的质量控制 9.3.1 影响分类计数准确性的因素 9.3.1.1 细胞分布不均 在一般涂片的尾部中性粒细胞较多，淋巴细胞较少。涂片越薄细胞分布越差，粗糙的推片所制成的血涂片，细胞分布明显不均。当白细胞有聚集现象时，细胞分布极不规则，以致无法准确地进行分类。胞体在的细胞和幼稚细胞分布在涂片的尾部和边缘，相反，淋巴细胞和嗜碱性粒细胞则位于涂片的头部和体部。因此，在日常操作中，应尽量注意这些问题，减少 10 干扰因素 10.1 严重的黄疸或脂血使血红蛋白结果假性增高。 10.2 红细胞冷凝集可使红细胞和血小板计数结果假性减低，白细胞假性增高(电阻抗法)或假性减低(激光法)和MCV假性增高。 10.3 冷凝球蛋白增高使白细胞和血小板计数结果假性增高。 10.4 有血小板凝集者可使血小板计数结果假性减低。 11 结果计算及测量不确定度 按仪器设计原理，只对红细胞常数(红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白量、红细胞平均血红蛋白浓度)进行计算，可根据RBC、HGB及HCT结果求出。 11.1 红细胞平均体积(MCV) 每升血液中红细胞比积HCTMCV(fl),, 每升血液中红细胞个数 RBC根据RBC及HCT，由下式求出。 11.2 红细胞平均血红蛋白量(MCH) 根据RBC及HGB，由下式来求出。 每升血液中血红蛋白含量HGBMCH(pg),, 每升血液中红细胞个数 RBC11.3 红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC) 根据HCT及HGB，由下式来求出。 每升血液中血红蛋白含量HGBMCHC(g/L),, 每升血液中红细胞比积 HCT11.4 RDW由血细胞分析仪测量获得，是反映周围血红细胞体积异质性的参数。当红细胞通过小孔的一瞬间，计数电路得到一个相应大小的脉冲，不同大小的脉冲信号分别贮存在仪器内装计算机的不同通道，计算出相应当体积及细胞数，统计处理而得RDW。 11.5 测量不确定度 11.5.1 SF-3000血液分析仪仪器检测血细胞测量不确定度为:WBC:? 9990.22×10/L(均值=3.87)、?0.46×10/L(均值=6.07)和?0.80×10/L(均值 1212=13.27);RBC:?0.22×10/L(均值=2.39)、?0.24×10/L(均值=4.18)和? 120.36×10/L(均值=6.02);HGB:?2.60g/L(均值=82.60)、?3.66g/L(均值 9=129.53)和?5.48g/L(均值=168.07);PLT:?15.66×10/L(均值=64.60)、? 9925.80×10/L(均值=200.40)和?40.82×10/L(均值=340.93)。 11.5.2 BC-2000血液分析仪仪器检测血细胞测量不确定度为:WBC:? 9990.22×10/L (均值=3.87)、?0.46×10/L (均值=6.07)和?0.80×10/L (均 1212值=13.27);RBC:?0.22×10/L (均值=2.39)、?0.24×10/L (均值=4.18) 12和?0.36×10/L (均值=6.02);HGB:?2.60g/L (均值=82.60)、?3.66g/L (均 9值=129.53)和?5.48g/L (均值=168.07);PLT:?15.66×10/L (均值=64.60)、 99?25.80×10/L (均值=200.40)和?40.82×10/L (均值=340.93)。 小11.5.3 MEK 6108K血液分析仪仪器检测血细胞测量不确定度为:WBC:?0.28 999×10/L(均值=3.20)、?0.62×10/L(均值=8.56)和?0.94×10/L(均值 1212=15.09);RBC:?0.22×10/L(均值=2.30)、?0.24×10/L(均值=4.03)和? 120.42×10/L(均值=6.03);HGB:?2.06g/L(均值=62.80)、?4.08g/L(均值 9=132.70)和?6.00g/L(均值=162.23);PLT:?20.56×10/L(均值=80.63)、? 9932.00×10/L(均值=203.50)和?43.67×10/L(均值=334.67)。 11.5.4 ADVIA 120血液分析仪仪器检测血细胞测量不确定度为:WBC:?0.26×9910/L(均值=3.69)、?0.32×109/L(均值=5.36)和?0.74×10/L(均值=13.32); 1212RBC:?0.20×10/L(均值=2.41)、?0.22×10/L(均值=4.13)和?0.30×1210/L(均值=5.19);HGB:?2.90g/L(均值=82.90)、?3.66g/L(均值=130.63) 9和?4.38g/L(均值=1625.10);PLT:?10.32×10/L(均值=50.17)、? 9924.02×10/L(均值=201.13)和?30.54×10/L(均值=329.10)。 12 生物参考区间 12.1 白细胞 99成年人静脉血:3.5,10.0×10/L;手指血:4.0,10.0×10/L;新生儿:15.0, 9920.0×10/L;6个月,2岁:11.0,12.0×10/L。 12.2 红细胞 1212成年男性:4.3,5.86×10/L;成年女性:3.77,5.17×10/L;新生儿:6.0, 127.0×10/L。 12.3 血红蛋白 成年男性:135,180g/L;成年女性:115,155g/L;新生儿:170,200g/。 的一12.4 红细胞压积 成年男性:0.400,0.517; 成年女性:0.367,0.467。 12.5 血小板 9100,300×10/L。 12.6 其它参数 MCV:80 , 100fL;MCH:27.2,34.3pg;MCHC:320,360g/L;RDW:<0.145;PCT:男性 0.183?0.041;女性 0.198?0.042;MPV:男性 10.07?1.78fL;女性 10.24?1.58fl;PDW:16.8%?0.63%;瞬13 患者检验结果可报告区间 91213.1 阻抗法仪器:WBC:(0.2,99.99)×10/L，RBC:(0.50,9.99)×10/L， 9HGB:0,299g/L，PLT:(10,999)×10/L。 91213.2 激光法仪器:WBC:(0.02,400)×10/L，RBC:(0.05,7.00)×10/L， 9HGB:0,225g/L，PLT:(5,3500)×10/L。 14 警告/危急值 9129白细胞<0.5×10/L;红细胞<1.0×10/L;血红蛋白<30g/L;血小板<20×10/L。 15 实验室解释 15.1 白细胞计数 15.1.1 白细胞生理变化 915.1.1.1 年龄:初生儿白细胞较高，一般在15×10/L左右，个别可高达30×910/L以上。通常在3,4天后降至10×109/L左右，约保持3个月，然后逐渐降低至成人水平。初生儿外周血白细胞主要为中性粒细胞，到第6,9天逐渐下降至与淋巴细胞大致相等。以后淋巴细胞逐渐增多，整个婴儿期淋巴细胞数均较高，可达70%。到2,3岁后，淋巴细胞逐渐下降，中性粒细胞逐渐上升，到4,5岁二者又基本相等，形成中性粒细胞和淋巴细胞变化曲线的两次交叉，至青春 期时与成人基本相同。 15.1.1.2 日间变化:白细胞数在静息状态时较低，活动和进食后较高;早晨较低，下午较高;一日之间最高值与最低值之间可相差1倍。运动、疼痛和情绪变化、一般的体力劳动、冷热水浴、日光或紫外线照射等，均可使白细胞轻度增高;而剧烈运动、剧痛和激动可使白细胞显著增高。如剧烈运动，可于短时间内使白 9细胞高达35×10/L，以中性粒细胞为主;当运动结束后迅即恢复原有水平。这种短暂的变化，主要是由于循环池和边缘池的粒细胞重新分配所致。 15.1.1.3 妊娠与分娩:妊娠期常见白细胞增多，特别是最后1个月，常波动于 99(12,17)×10/L之间，分娩时可高达34×10/L。分娩后2,5日内恢复正常。由于白细胞的生理波动很大，只有通过定时和反复观察才有意义。 15.1.2 白细胞病理变化 15.1.2.1 白细胞增高 15.1.2.1.1 急性感染:急性化脓性感染时，白细胞增高程度取决于感染微生物的种类、感染灶的范围、感染的严重程度、患者的反应能力。如感染很局限且轻微，白细胞总数仍可正常，但分类检查时可见中性粒细胞有所增高;中度感染时， 9白细胞总数常增高大于10×10/L，并伴有轻度核左移;严重感染时，白细胞总 9数常明显增高，可达20.0×10/L以上，且伴有明显的核左移。 15.1.2.1.2 严重的组织损伤或大量血细胞破坏:在较大手术后12,36小时，白 9细胞常达10.0×10/L以上，其增多的细胞成分以中性分叶核粒细胞为主。急性心肌梗塞后1,2天内，常见白细胞数明显增高，借此可与心绞痛相区别。急性溶血反应时，也可见白细胞增高。 15.1.2.1.3 急性大出血:在脾破裂或宫外孕输卵管破裂后，白细胞迅速增高， 9常达(20,30)×10/L。其增多的细胞也主要是中性粒细胞。 15.1.2.1.4 急性中毒:化学药物如安眠药、敌敌畏等中毒时，常见白细胞数增 9×10/L或更高，代谢性中毒如糖尿病酮症酸中毒及慢性肾炎尿高，甚至可达20 毒症时，也常见白细胞增高，均以中性粒细胞为主。 15.1.2.1.5 肿瘤性增高:白细胞呈长期持续增高，最常见于粒细胞性白血病， 9其次也可见于各种恶性肿瘤的晚期。此时不但总数常达(10,20)×10/L或更高，且可有较明显的核左移现象，呈所谓类白血病反应。 15.1.2.2 白细胞减低 15.1.2.2.1 某些感染:某些革兰氏阴性杆菌如伤寒杆菌感染时，如无并发症， 9白细胞数均减少甚至可低到2×10/L以下。一些病毒感染如流感时白细胞亦减少，可能是由于在细菌内毒素及病毒作用下使贴壁的即边缘池粒细胞增多而导致循环池中粒细胞减少所致，也可能与内毒素抑制骨髓释放粒细胞有关。 15.1.2.2.2 某些血液病:如典型的再生障碍性贫血时，呈“三少”表现。此时 9白细胞可少到1×10/L以下，分类时几乎均为淋巴细胞，乃因中性粒细胞严重减少所致的淋巴细胞相对增多。小部分急性白血病其白细胞总数不高反而减低， 9称非白血性白血病(aleukenic leuemia)，其白细胞可<1×10/L，分类时也呈淋巴细胞相对增多，此时只有骨髓检查才能明确诊断。 15.1.2.2.3 慢性理、化损伤:电离辐射(如X线等)、长期服用氯霉素后，可因抑制骨髓细胞的有丝分裂而致白细胞减少，故于接触和应用期间每周应作一次白细胞计数。 15.1.2.2.4 自身免疫性疾病:如系统性红斑狼疮等，由于自身免疫性抗核抗体导致白细胞破坏而减少。 15.1.2.2.5 脾功能亢进:各种原因所致的脾肿大，如门脉肝硬化、班替综合征 。其机制为肿大的脾中的单核-等均可见白细胞减少巨噬细胞系统破坏了过多的白细胞;肿大的脾分泌了过多的脾素，而此种体液因子能来活促进粒细胞生长的某些因素。 15.2 白细胞分类结果异常 15.2.1 中性粒细胞 15.2.1.1 中性粒细胞增加:急性感染性化脓性炎症，中毒(尿毒症、糖尿病酸中毒)急性出血、急性溶血及手术后等。 15.2.1.2 中性粒细胞减少:某些传染病(伤寒、疟疾等)化学药物及放射损害，某些血液病、过敏性休克、恶病质、脾功能亢进及自身免疫性疾病等。 15.2.2 淋巴细胞 15.2.2.1 淋巴细胞增加:淋巴细胞性白血病，百日咳，传染性单核细胞增多症、水痘、麻疹、结核病、狭窄排斥反应前期，传染病恢复期等。 15.2.2.2 淋巴细胞减少:免疫缺陷病，丙种球蛋白缺乏症，淋巴细胞减少症，应用肾上腺皮质激素后，放射病等。 15.2.3 单核细胞 单核细胞增多:常见于亚急性细菌心内膜炎、伤寒、疟疾、黑热病、活动性结核、单核细胞性白血病，急性感染恢复期等。 15.2.4 嗜酸性粒细胞 15.2.4.1 嗜酸性粒细胞增多:见于过敏性疾病、皮肤病、寄生虫、血液病、猩红热、溃疡性结肠炎、X线照射后，脾切除、传染病恢复期等。 15.2.4.2 嗜酸性粒细胞减少:多见于伤寒、副伤寒，以及应用肾上腺皮质素或促肾上腺皮质素后。 15.2.5 嗜碱性粒细胞 嗜碱性粒细胞增多:见于慢性粒细胞白血病、淋巴网细胞瘤、脾切除后等，恶性肿瘤、严重传染病、败血病、中毒(药物或重金属)大面积烧伤等。严重感染中性粒可出现毒性颗粒、空泡、Dohle氏体，核棘突，退行性变及细胞大小不均等变化。 15.3 红细胞结果异常 15.3.1生理性变化 年龄与性别的差异:初生儿由于出生前以弥散方式从母体血液获得氧气，通常处于生理性缺氧状态，故红细胞明显增高，但在出生2周后就逐渐下降。小儿生长发育时铁供应不足亦可引起贫血。男性儿童在6,7岁时最低，随着年龄增大而逐渐上升，到25,30岁时达高峰，30岁后随着年龄增高而逐渐下降，直到60岁尚未停止。在女性儿童也随年龄逐渐增高，到13,15岁时达最高值，而后受到月经、内分泌等因素影响逐渐下降，到21,35岁维持最低水平后又逐渐增高与男性水平相近。男女两性的红细胞计数在15,40岁期间差异明显，主要可能与在此期间，男性雄激素水平较高，而睾酮有促进红细胞造血作用有关。 精神因素:感情冲动、兴奋、恐惧、冷水浴刺激均可使肾上腺素增多，导致红细胞暂时增加。 剧烈体力运动和劳动:主要由于氧需要量增加，引起相对缺氧。一般成人在安静时全身每分钟耗氧0.3,0.4L，肌肉运动时可增加到2,2.5L，最高可达到4,4.5L，此时由于红细胞生成素生成增加而骨髓加速释放红细胞，导致红细胞增多。 气压降低:因缺氧刺激，红细胞可代偿性增生。高山地区居民和登山运动员红细胞数均高于正常，此因大气稀薄、氧分压低，机体红细胞生成素水平增高，引起骨髓产生更多的红细胞所致。 妊娠中、后期:为适合胎盘循环的需要，通过神经、体液调节，孕妇的血浆容量明显增加而引起血液稀释。 15.3.2 红细胞增高 15.3.2.1 相对性增高:常见于剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、大量出汗、多尿和水的摄入量显著不足的患者。 15.3.2.2 绝对性增高:与组织缺氧有关。可引起继发性红细胞增多，如慢性肺源性心脏病、发绀性先天性心脏病，慢性一氧化碳中毒，登山病等。 1215.3.2.3 真性红细胞增多症，红细胞可达(7,10)×10/L 15.3.3 红细胞减少 15.3.3.1 生理性贫血:妊娠期因血浆量相对增多，故红细胞相对减少。3个月的婴儿至15岁的儿童，因生长发育迅速而致造血原料相对不足，红细胞和血红蛋白可较正常人低10%~20%。老年人由于骨髓造血功能逐渐减低，均可导致红细胞和血红蛋白含量减少。 15.3.3.2 病理性减少:?红细胞减少所致的贫血:一是因骨髓造血功能衰竭，如再生障碍贫血、骨髓纤维化等伴发的贫血;二是因造血物质缺乏或利用障碍引起的贫血，如缺铁性贫血、铁粒幼细胞性贫血、叶酸及维生素B12缺乏所致的巨幼细胞性贫血。?因红细胞膜、酶遗传性的缺陷或外来因素造成红细胞破坏过多导致的贫血，如遗传性球型红细胞增多症、地中海性贫血、阵发性睡眠性血红蛋白尿、异常血红蛋白病、免疫性溶血性贫血、心脏体外循环的大手术及一些化学、生物因素等引起的溶血性贫血。?失血:急性失血或消化道溃疡、钩虫病等慢性失血所致贫血。 12红细胞计数医学决定水平:高于6.8×10/L，应采取相应的治疗措施;低于3.5 1212×10/L为诊断贫血的界限，应继续寻找病因;低于1.5×10/L应考虑输血。 15.4 红细胞形态 红细胞形态变化见于: 红细胞大小不一 小红细胞:提示血红蛋白合成障碍，见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血和遗传性球形红细胞增多症。 大红细胞:常见于巨幼红细胞性贫血，也可见于溶血性贫血、恶性贫血等。 巨红细胞:最常见于叶酸及维生素B12缺乏所致的巨幼细胞性贫血。 红细胞大小不均:常见于严重的增生性贫血、巨幼细胞性贫血。 红细胞内血红蛋白含量改变 正常色素性:除见于正常人外，还见于急性失血、再生障碍性贫血和白血病等。 低色素性:常见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、铁粒幼细胞性贫血、某些血红蛋白病。 高色素性:最常见于巨幼细胞性贫血。 多色性:多色性红细胞增多提示骨髓造血功能活跃，尤见于溶血性或急性失血性贫血。 细胞着色不一:多见于铁粒幼红细胞性贫血。 红细胞形状改变 球形细胞:主要见于遗传性和获得性球形红细胞增多症(如自身免疫性贫血或直接理化损伤如烧伤等)。 椭圆形细胞:见于遗传性椭圆形红细胞增多症。 靶形红细胞:常见于各种低色素性贫血，尤见于珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病，也见于阻塞性黄疸、脾切除后状态。 口形细胞:常见于口形红细胞增多症，小儿消化系统疾患引起的贫血，也可见于乙醇中毒，某些溶血性贫血及肝病患者等。 镰形细胞:主要见于镰状细胞性贫血。 棘形细胞:多见于遗传性或获得性β-脂蛋白缺乏症，可高达70%,80%;也可见于脾切除后、酒精中毒性肝脏疾病及尿毒症等。 新月形红细胞:见于某些溶血性贫血，其意义不明。 泪滴形细胞:多见于贫血、骨髓纤维化症时，偶见于正常人。 裂红细胞:见于弥散性血管内凝血、微血管病性溶血性贫血、重型珠蛋白生成障碍性贫血、巨幼细胞性贫血、严重烧伤。正常人血涂片中裂片细胞小于2%。 红细胞形态不整:此种细胞在某些感染或严重贫血时多见，最常见于巨幼细胞性贫血。异形红细胞产生的原因尚未明，有人认为是物理因素所致。 有核红细胞:最常见于严重的溶血性贫血、新生儿溶血性贫血、自身免疫性溶血性贫血、巨幼细胞性贫血;各种急、慢性白血病及红白血病和慢性骨髓增生性疾病如骨髓纤维化。 红细胞内出现异常结构 嗜碱性点彩红细胞:见于中毒患者(如铅、汞等金属中毒)及各种增生活跃性贫血如溶血性贫血、巨幼细胞性贫血等。 豪乔小体:见于脾切除术后、无脾症、脾萎缩、脾功能低下、红白血病和某些贫血患者;在巨幼细胞贫血时，更易见到。 卡波氏环:可见于白血病、巨幼细胞性贫血、增生性贫血、铅中毒或脾切除后。 寄生虫:当疟原虫等感染时，可见红细胞胞质内相应的病原体。 15.5 血红蛋白异常 血红蛋白的增减临床意义大致与红细胞的增减意义相似，但血红蛋白更准确反映贫血的程度。血红蛋白的减少与红细胞的减少程度不一定呈正比例，一是在小红细胞贫血时，由于单个红细胞血红蛋白的含量少于正常，所以血红蛋白减少的程度较红细胞减少的程度更为明显，如缺铁性贫血、消化性溃疡、肠息肉、痔疮、月经过多、钩虫病等慢性反复出血等;二是在大红细胞性贫血减少的程度较 血红蛋白更为严重，如缺乏维生素B12或叶酸引起的营养不良性贫血及肝硬化性贫血等;三是在大出血时，血红蛋白减少的程度基本上与红细胞减少相一致，如消化道、肺部大出血及其他原因引起的大出血，再生障碍性贫血、纯红细胞再生障碍性贫血。 15.6 红细胞比积 红细胞比积是用于计算红细胞3个平均指标的参数的要素之一，有助于贫血诊断和分类;可以评估血浆容量有无增减或稀释浓缩程度，有助于某些疾病治疗中补 液量的控制，以及了解体液平衡情况。 15.6.1 红细胞比积增高 见于各种原因所致的血液浓缩，如大量呕吐、大手术后、腹泻、失血、大面积烧伤以及真性红细胞增多症(可达0.80)和继发性红细胞增多症等。 15.6.2 红细胞比积减低 见于各种贫血。由于贫血种类不同，红细胞比积减少的程度并不与红细胞计数值完全一致。 15.7 红细胞平均指标 临床上将红细胞3个平均测定的指标作为贫血的形态学分类依据(表1)。 表1 贫血的红细胞形态学分类 贫血类型 MCH 常见原因或疾病 MCMCH V C 正细胞贫血 正正常 正常 MM、急性失血性贫血、某些溶 大细胞贫血 增增高 正常 各种造血物质缺乏或利用不常 血性贫血 单纯小细胞减减低 正常 慢性感染、慢性肝肾疾病性贫 高 良的贫血 小细胞低色减减低 减低 缺铁性贫血及铁利用不良贫贫血 低 血 15.8 红细胞体积分布宽度 素贫血 低 血～慢性失血性贫血 红细胞体积分布宽度(red blood cell volume distribution width，RDW)是一个较新的红细胞参数，由血液分析仪根据红细胞体积分布的直方图导出，反映所测标本中红细胞体积大小的异质程度，常用变异系数(CV)表示。 进行贫血形态学新的分类:1983年Bessman提出用MCV和RDW两项参数作为贫血的形态学分类的新指标。根据不同病因引起贫血的红细胞形态特点的不同，可将贫血分成6类(表2)，新的分类法较传统分类法可能更全面，对贫血的病因分析和鉴别诊断具有更大意义。 MCV/RDW 常见原因或疾病 贫血类型 特征 MCV减少～ 小细胞均轻型珠蛋白生成障碍性贫血、某 RDW MCV小细胞不缺铁性贫血、β-珠蛋白生成障一性 些继发性贫血 正正细胞均MCV、 再障、白血病、某些慢性肝病、均一减碍性贫血、HbH病 常 RDW一性 肾性贫血、急性失血、长期性 少～ MCV正细胞不混合型营养缺乏性贫血、部分早 缺铁性贫血(IDA)的筛选诊断和疗效观察:RDW增高对缺铁性贫血诊断的灵敏度达95%，但特异性不强，可作为缺铁性贫血的筛选指标。缺铁性贫血时RDW增高，尤其是MCV尚处于参考值范围时，RDW增高更是诊断缺铁性贫血的指征;当MCV减小时，RDW增高更为显著;给予铁剂治疗有效时，RDW将比给药前更大。这是因为患者补铁后，网织红细胞增多并释放入血，与给药前的小红细胞并存的缘故，故RDW先增大，随着正常红细胞的增多和小红细胞的减小，RDW逐渐降至参考范围。 鉴别缺铁性贫血和β-珠蛋白生成障碍性贫血:Bessman曾分析了两类贫血患者RDW变化，缺铁性贫血患者100%RDW增高，而88%轻型β-珠蛋白生成障碍性贫血患者的RDW正常，提示RDW可作为两类贫血的鉴别诊断指标。 15.9 血小板 15.9.1 生理性变化 正常人血小板数随时间和生理状态变化:如一天之内可增减6,10%，午后略高于早晨;春季较冬季低;平原居民较高原居民低;月经前减低，月经后增高;妊娠中晚期增高，分娩后即减低;运动、饱餐后增高，休息后恢复。 15.9.2 血小板数增高:?一过性增高，见于急性大出血及溶血之后。?持续性增高，见于真性红细胞增多症、出血性血小板增多症。?慢性粒细胞性白血病、多发性骨髓瘤及许多恶性肿瘤的早期常可见血小板增多。 15.9.3 血小板数减少:?血小板产生减少，见于造血功能受到损害，如再生障碍性贫血、急性白血病、急性放射病。?血小板破坏亢进，见于原发性血小板减 少性紫癜、脾功能亢进和进行体外循环时。?血小板消耗过多，如弥散性血管内凝血、血栓性血小板减少性紫癜等。 16 安全性预警措施 血液标本的运输必须保证运送过程中的生物安全，防止溢出。血液标本溢出后，应该立即对污染的环境和设备进行消毒处理。对标明有传染性疾病的血液标本应特别防护，以不污染环境或保护工作安全为前提。 在进行血液分析的一切操作活动中，应按《实验室安全管理》程序执行。在进行操作前，首先应采取必要的保护性措施如穿戴保护性外套、手套等。 与血液标本接触的一切器皿、仪器组装/拆卸组合零件都应视为污染源，因此操作人员不小心接触了这种污染源时，应立即用清水冲洗被污染区域并进行消毒处理。 如果操作人员的皮肤或衣物上沾到了血液及废液，应立刻用清水冲洗并进行消毒处理。如果眼睛被溅入血液及废液，用大量的清水冲洗并采取必要的医疗措施。 如血液标本采用开盖程序测试，开盖时应防止气雾胶污染环境。 所有检查过的血液样本及有关的废弃物，都会给您带来潜在的危险或生物污染。所有废弃样本及废弃物的处理方法同血液标本的处理程序。 17 变异潜在来源 严重的黄疸或脂血标本可使血红蛋白结果假性增高; 标本溶血可使红细胞结果假性减低、血小板计数结果假性增高; 红细胞冷凝集可使红细胞和血小板计数结果假性减低，白细胞假性增高(电阻抗法)或假性减低(激光法法)和MCV假性增高; 冷凝球蛋白或冷纤维蛋白增高使白细胞和血小板计数结果假性增高 有血小板凝集者可使血小板计数结果假性减低; 试剂的温度; 检测器微孔不完全堵塞; 标本采集后放置的环境温度过高、时间过长; 试剂变质或过了有效期而未发现等。 18 白细胞五分类血细胞分析仪的白细胞分类筛选原则 18.1 血液病病人，无论血细胞计数结果和细胞分布图是否正常，一律做血涂片镜检。 18.2 无论初诊或复诊病人，只要白细胞、红细胞/血红蛋白和血小板计数结果正常，白细胞散射图、红细胞和血小板直方图均正常且无报警者，可不做血涂片镜检。 18.3 初诊病人，其白细胞、红细胞/血红蛋白、血小板计数结果，白细胞散射图、红细胞和血小板直方图中有一项异常或报警时，均需做血涂片镜检。 18.4 复诊病人，其血细胞计数结果与前一次结果无明显变化，但白细胞散射图异常且有报警时，需做血涂片镜检。 18.5 复诊病人，其血细胞计数结果与前一次检测结果相比有变化，但与临床诊断或治疗相符;而且白细胞散射图正常无报警时，可不做血涂片镜检。 19 异常结果处理 血细胞分析仪测试的血常规结果异常需与临床诊断相符，不符合的结果应复查。 20 报告时间与标本保存 20.1 病房患者的血常规检验结果报告单应于当日下午4点前由卫生员发回病房科室。 20.2 检验后的血常规标本应放置室温保存至次日上午8点丢弃。 21 实验方法的溯源 见XT-2100、MEK-6108K、XT-1800i和5-diff血细胞分析仪使用说明书。 22 参考文献 ?XT-2100、XT-1800i、MEK-6108K和5-diff血细胞分析仪使用说明书。 ?“2013例北京市正常成年人静脉血血细胞正常参考范围调查”《中华医学检验杂志》 1996年第3期。 ?叶应妩，王毓三主编. 全国临床检验操作规程. 中华人民共和国卫生部医政司. 南京. 第二版. 1997。