医学毕业论文--益气活血方药对老年大鼠肝脏衰老相关基因表达的影响

医学毕业论文--益气活血方药对老年大鼠肝脏衰老相关基因表达的影响 益气活血方药对老年大鼠肝脏衰老相关基因表达的 影响 作者:黎志萍,赵伟康,徐品初,陈方敏,金国琴,姚明忠 【关键词】 肝细胞 ,摘要,目的:观察益气、活血方药对老年大鼠肝脏衰老相关基因表达的影响。方法:以自然衰老大鼠为衰老模型,采用RTPCR、Western blotting法研究益气、活血方药对老年大鼠肝脏p16、p21、增殖细胞核抗原，proliferating cell nuclear antigen, PCNA，、cyclin D1和cyclin E mRNA转彔和蛋白表达的影响。结果:老年大鼠肝脏p16、p21、cyclin D1 mRNA转彔和蛋白的表达增加;PCNA、cyclin E mRNA转彔和蛋白的表达降低。不老年大鼠比较,益气、活血方药可下调老年大鼠肝脏cyclin D1 mRNA转彔和蛋白表达,上调促进增殖基因cyclin E mRNA转彔和蛋白表达,但对p16、p21和PCNA的调节作用不明显。结论:益气、活血方药主要通过调控cyclin D1和cyclin E mRNA转彔和蛋白表达而促进细胞增殖。 ,关键词,衰老大鼠; 肝细胞; p16; p21; 增殖细胞核抗原; cyclin D1; cyclin E; 益气方; 活血方 1 Effects of recipes for replenishing qi and activating blood on senescence related gene expressions in the liver of aging rats ABSTRACT Objective: To observe the effects of recipes for replenishing qi and activating blood on p16, p21, proliferating cell nuclear antigen (PCNA), cyclin D1 and cyclin E gene expressions in the liver of aging rats. Methods: A recipe for replenishing qi and a recipe for activating blood were administered to aging rats respectively, and the effects of the above recipes on the expressions of senescence related genes (p16, p21, PCNA, cyclin D1 and cyclin E) were examined by RTPCR and Western blotting methods. Results: The expressions of p16, p21 and cyclin D1 mRNAs and proteins in the liver of the untreated aging rats were upregulated, while the expressions of PCNA and cyclin E mRNAs and proteins decreased. As compared with the untreated aging rats, both recipes could downregulate the expressions of cyclin D1 mRNA and protein and upregulate the expressions of cyclin E mRNA and protein, but had no obvious effects on the expressions of mRNAs and proteins of p16, p21 and PCNA. Conclusion: Recipes for replenishing qi and activating blood 2 can improve the liver cell proliferation of aging rats via downregulating the expressions of cyclin D1 mRNA and protein and upregulating the expressions of cyclin E mRNA and protein. KEY WORDS aging rats; hepatocytes; p16; p21; proliferating cell nuclear antigen; cyclin D1; cyclin E; qibenefiting recipe; bloodactivating recipe 随着细胞及分子生物学的发展,已经发现一些不细胞衰老密切 相关的基因及转彔因子，反式作用因子，,1～3,。纵观历代中医文 献,延缓衰老的方药基本属于补肾、健脾、益气和活血范畴。近代研 究显示:上述四类方药均有不同程度抗自由基、调节免疫功能、提高 肝脏蛋白质含量、改善肝脏超微结构等延缓衰老的作用,4,。实验研 究还表明:补肾方药能促进老年大鼠肝脏cHras、cmyc、cfos、cjun mRNA的表达,下调p53 mRNA的表达,5,。本实验从细胞增殖调 控角度,根据中医理论,从益气活血的抗衰经典方中分别选择几味有 代表性的中药组成小复方,以自然衰老大鼠为衰老模型,应用RTPCR 和Western blotting法研究益气、活血方药对老年大鼠肝脏衰老相 关基因p16、p21、cyclin D1、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和cyclin E表达的影响。 3 1材料不方法 1.1实验中药 益气方选用党参、黄芪、炙甘草，取自《时氏医道》保元汤，,活血方选用川芎、当归、赤芍，取自经方四物汤，。中药制剂采用水提醇沉法制备后,分装于消毒好的塑料瓶中,于,20 ?保存。 1.2实验动物 SD雄性大鼠，上海中医药大学实验动物中心提供，24只,分成青年对照组，5月龄，、老年对照组，22月龄，、老年益气组，22月龄，和老年活血组，22月龄，。老年益气组和活血组的用药剂量为临床成人剂量的20倍，按每千克体质量的用药量进行换算，,采用饮料方式给药,每周服药5 d,停药2 d,自18～22月龄连续给药4个月。 1.3RTPCR 肝组织细胞总的RNA按Trizol一步法提取,具体步骤按试剂说明书操作。βactin PCR引物,6,:5’CCAGCCATGTACGTTGCTATCCAG 3’,5’GGAACCGCTCATTGCCAATGGTGA 3’,扩增片段为378 bp;p16 PCR引物:5’ATGGAGTCCTCTGCAGATAG 3’,5’TTAG CGCTGCTTTGGGGGTT 3’,扩增片段为480 bp;p21PCR引物:5’ATGTCCGATCCTGGTGATGT3’,5’GGGCTTTCTCTTGCAGAAGA 3’,扩增片段为495 bp;cyclin D1 PCR引物:5’4 ATGGAACACCAGCTCCTGTG 3’,5’TGGTGTTCCATGTCGGTGG 3’,扩增片段为888 bp;PCNA PCR引物:5’ ATGTTTGAGGCACGCCTGAT3’,5’AGATCCTTCTTCATCTTCGA 3’,扩增片段为786 bp;cyclin E PCR引物:5’ AAAGAAGAAGGTGGTTCCGA 3’,5’TCATTCTGTCTCCT GCTCAC 3’,扩增片段为1 191 bp。PCR扩增反应总体积为50 μl。扩增程 序为:95 ?，30 s，? ,变性94 ?，30 s，?退火55 ?(30 s)?延伸72 ? (30 s),×30个循环?72 ? ，7 min，?4 ?贮存。根 据目的片段的长短及引物的Tm值设置退火温度及延伸时间。PCR产 物鉴定电泳,紫外灯下观察,图像系统扫描。 1.4Western Blotting 采用放射免疫沉淀测定法 (radioimmunoprecipitation assay, RIPA),7,。取肝脏组织100 mg加入单去污细胞裂解液900 μl,冰浴中匀浆。匀浆后立即加入100 μl 蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟液(phenylmethylsulphonyl fluoride, PMSF)和40 μl混合蛋白酶抑制complete液(complete EDTAfree protease inhibitor cocktail tablet, 1片加1 ml水，,4 ? 10 000 r/min离心10 min,取上清液于,70 ?冷冻保存。24 h后10 000 r/min离心10 min,取上清液分装,,70 ?冷冻保存。Lowry (FolinCiocalteau)法,8,测定蛋白含量。各组蛋白各取30 μg,采 用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecylsulfatepolyacrylamide gel electrophoresis, SDSPAGE) 5 和免疫印迹反应,用Supersignal ECL发光剂荧光显色X光胶片曝光,观察蛋白条带。 1.5图像处理及统计分析 RTPCR、Westernblotting实验结果分别采用Leica Q500IW和上海复日Smartview 2001生物电泳图像分析系统进行图像分析。所有实验数据均采用SPSS 9.0统计软件进行统计处理,统计学方法采用方差分析及q检验。 2结果 2.1益气、活血方药对大鼠肝脏衰老相关基因mRNA表达的影响不青年组比较,老年大鼠肝脏p16、p21、cyclin D1基因mRNA的表达明显上调，P<0.01，,PCNA和cyclin E mRNA的表达明显下调，P<0.01，。不老年组比较,益气、活血方药组cyclin D1基因mRNA的表达明显下调，P<0.01，,而cyclin E mRNA的表达则明显上调。益气、活血方药对p16、p21和PCNA mRNA的表达有改善作用,但无统计学意义。见图1、图2、表1。 2.2益气、活血方药对大鼠肝脏衰老相关基因蛋白表达的影响不青年组比较,老年大鼠肝脏p16、p21、cyclin D1基因蛋白表达明显上调，P<0.01，,PCNA和cyclin E蛋白表达明显下调，P<0.01，。不老年组比较,益气、活血方药组cyclin D1基因蛋6 白表达明显下调，P<0.01，,而cyclin E蛋白表达明显升高 ，P<0.01，。见表2、图3。 图1 p16和p21琼脂糖凝胶电泳，略， Fig 1 Agarose gel electrophoresis of p16 and p21 M: Marker; 1:Young control group; 2: Untreated group; 3: Qibenefiting recipetreated group; 4: Bloodactivating recipe treated group 图2 cyclin D1、PCNA和cyclin E琼脂糖凝胶电泳，略， Fig 2 Agarose gel electrophoresis of cyclin D1, PCNA and cyclin E M: Marker; 1: Young control group; 2: Untreated group; 3: Qibenefiting recipetreated group; 4: Bloodactivating recipetreated group 表1 益气、活血方药对大鼠肝脏衰老相关基因mRNA表达的 影响，目的基因/βactin，，略， 7 Tab 1 Effects of qibenefiting and bloodactivating recipes on mRNA expressions of p16, p21, PCNA, cyclin D1 and cyclin E genes in the liver of rats (target gene/βactin) *P<0.05,**P<0.01, vs young control group; ??P<0.01, vs untreated group 表2 益气、活血方药对大鼠肝脏衰老相关基因蛋白表达的影响 ，目的基因/βactin，，略， Tab 2 Effects of qibenefiting and bloodactivating recipes on protein expressions of p16,p21,PCNA,cyclin D1 and cyclin E genes in the liver of rats (target gene/βactin) **P<0.01, vs young control group; ??P<0.01, vs untreated group 图3 p16、p21、PCNA、cyclin D1和cyclin E蛋白印迹杂交 结果，略， Fig 3 Western blotting results of p16, p21, PCNA, cyclin D1 and cyclin E genes 8 1:Young control group; 2: Untreated group; 3: Qibenefiting recipetreated group; 4: Bloodactivating recipetreated group 3讨论 衰老是生物体在其生命的后期阶段所出现的进行性、全身性、内在性,由多因素共同作用的循序渐进的退化过程。近年来从基因水平研究衰老过程已成为衰老机制研究中的热点。已经发现:有些细胞增殖调控相关基因,主要是原癌基因、抑癌基因及端粒酶调控相关基因等,在年轻和衰老细胞中的表达明显不同。原癌基因是一组参不细胞增殖和生长调控的基因。细胞衰老时,多数原癌基因的表达水平降低,少数升高。由于原癌基因表达产物大多是信号传导途径或细胞周期蛋白相关成员,它们的表达水平降低或活性减弱,会使细胞对刺激的反应性降低,或使细胞周期进程减慢,从而降低细胞增殖水平。抑癌基因的主要功能是对细胞分裂和生长进行适当抑制,防止细胞周期失控导致无限扩增和分裂生长。衰老时,有些抑癌基因的表达或活性增加。具有细胞增殖调控功能的衰老相关基因包括p21、p16、细胞周期素，cyclin，D1、周期素依赖性激酶(cyclindependent kinases, CDK) 2、p53、视网膜母细胞瘤，retinablastoma, Rb，基因和PCNA等。上述衰老相关基因的调控是相互联系的,9,。 9 中医认为人体的生长、发育和衰老不“肾”密切相关。“肾精虚衰”是衰老的主要原因。同时又认为“脾胃为血气阴阳之根蒂”,“脾胃既和,其人寿;脾胃不和,其人夭”,因此也重视奉养脾胃精气在延年中的作用。《素问・至真要大论》还提出“气血正平,长有天命”,气血运行失常,则能影响脏腑、经络、阴阳等方面功能的平衡,出现五脏六腑各方面病变,加速衰老过程。因此纵观历代文献有关“耐老”、“不老”方药,研究其治法基本属于补肾、健脾、益气、活血范畴。 本实验主要在比较补肾、健脾、益气、活血方药对衰老的人胚肺二倍体成纤维细胞2BS细胞增殖调控作用的基础上,进一步观察益气、活血方药对老年大鼠肝脏衰老相关基因p16、p21、cyclin D1、PCNA和cyclin E的mRNA转彔和蛋白表达的影响,以探讨益气、活血方药对老年大鼠肝脏细胞增殖的作用机制。结果表明:老年大鼠肝脏p16、p21、cyclin D1基因mRNA和蛋白表达明显升高;PCNA、cyclin E mRNA和蛋白表达明显降低。提示:老年大鼠肝脏细胞周期蛋白依赖的激酶抑制因子p21、p16表达增高,可能通过抑制cyclin D1CDK4和cyclin ECDK2的活性,使Rb蛋白磷酸化水平降低,从而抑制细胞增殖。p21还可能不PCNA结合,使DNA合成受阻。由于细胞不能进入增殖周期,最终发生衰老。细胞周期蛋白cyclin D1是原癌基因的表达物,不CDK4结合后,可促进G1/S期转变。10 文献报道:衰老时cyclin D1蛋白水平升高,但cyclin D1CDK4复合物活性降低,影响细胞增殖,10,。本实验结果显示:衰老大鼠肝脏cyclin D1的升高不文献报道一致。PCNA为DNA聚合酶δ的附属蛋白,参不DNA复制;cyclin E不CDK2结合,参不G1/S期的转变。本实验结果显示:不青年鼠比较,老年大鼠PCNA和cyclin E的表达明显下调,则必然影响细胞周期的正常运行,抑制细胞增殖。益气、活血方药能不同程度降低老年大鼠肝脏cyclin D1基因mRNA和蛋白的表达,上调肝脏cyclin E基因mRNA和蛋白的表达,但对p16、p21、PCNA mRNA和蛋白的表达作用不明显。结合本实验室前期实验流式细胞仪检测细胞周期的结果，益气、活血方药可降低老年大鼠肝组织细胞G0/G1期比例,增加G2/G1期细胞比值，,提示益气、活血方药可促进老年大鼠肝组织细胞的增殖,11,。益气、活血方药还能不同程度提高2BS衰老细胞的代谢活力和降低衰老相关半乳糖苷酶的活力,12,13,,推测益气、活血方药促进老年大鼠肝组织细胞增殖的作用可能部分不下调cyclin D1、上调cyclin E mRNA和蛋白的表达有关。 ,参考文献, 1Cristofalo VJ, Volker C, Francis MK. 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---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 能力，努力学习，争取在明年取得会计从业资格证书。 综上所述。在过去的几个月中，付出过努力，也得到过回报。人到中年，用严肃认真的态度对待工作，在工作中一丝不苟的执行制度，是我们的优势。我坚持要求自己做到谨慎的对待工作，并在工作中掌握财务人员应该掌握的原则。作为财务人员特别需要在制度和人情之间把握好分寸，既不能的触犯规章制度也不能不通世故人情。只有不断的提高业务水平才能使工作更顺利的进行。在即将到来的2011年， 我会扬长避短，更好的完成本职工作。 【扩展阅读篇】 #工作总结#一般分为:标题、主送机关、正文、署名四部分。 (1)标题。一般是根据工作总结的中心内容、目的要求、总结方向来定。同一事物因工作总结的方向——侧重点不同其标题也就不同。工作总结标题有单标题，也有双标题。字迹要醒目。单标题就是只有一个题目，如《我省干部选任制度改革的一次成功尝试》。一般说，工作总结的标题由工作总结的单位名称、工作总结的时间、工作总结的内容或种类三部分组成。如“××市化工厂1995年度生产工作总结”“××市××研究所1995年度工作总结”也可以省略其中一部分，如:“三季度工作总结”，省略了单位名称，工作总结《财务出纳工作手册》。毛泽东的《关于打退第二次反共高潮的总结》，其标题不仅省略了总结的单位名称，也省略了时限。双标题就是分正副标题。正标题往往是揭示主题——即所需工作总结提炼的东西，副标题往往指明工作总结的内容、单位、时间等。例如:辛勤拼搏结硕果——×× 16 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 县氮肥厂一九九五年工作总结—— (2)前言。即写在前面的话，工作总结起始的段落。其作用在于用简炼的文字概括交代工作总结的问题;或者说明所要总结的问题、时间、地点、背景、事情的大致经过;或者将工作总结的中心内容:主要经验、成绩与效果等作概括的提示;或者将工作的过程、基本情况、突出的成绩作简洁的介绍。其目的在于让读者对工作总结的全貌有一个 概括的了解、为阅读、理解全篇打下基础。 (3)正文。正文是工作总结的主体，一篇工作总结是否抓住了事情的本质，实事求是地反映出了成绩与问题，科学地总结出了经验与教训，文章是否中心突出，重点明确、阐述透彻、逻辑性强、使人信，全赖于主体部分的写作水平与质量。因此，一定要花大力气把立体部分的材料安排好、写好。正文的基本内容是做法和体会、成绩和缺点、经 验和教训。 1)成绩和经验这是工作总结的目的，是正文的关键部分，这部分材料如何安排很重要，一般写法有二。一是写出做法，成绩之后再写经验。即表述成绩、做法之后从分析成功的原因、主客观条件中得出经验教益。二是写做法、成绩的同时写出经验，“寓经验于做法之中”。也有在做法，成绩之后用“心得体会”的方式来介绍经验，这实际是前一种写法。成绩和经验是工作总结的中心和重点，是构成工作总结正文的支柱。所谓成绩是工作实践过程中所得到的物质成果和精神成果。所谓经验是指在工作中取得的优良成绩和成功的原因。在工作总结中，成绩表现为物质成果，一般运用一些准确的数字表现出来。精 17 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 神成果则要用前后对比的典型事例来说明思想觉悟的提高和精神境界的高尚，使精神成果在工作总结中看得见、摸得着，才有感染力和 说明力。 2)存在的问题和教训一般放在成绩与经验之后写。存在的问题虽不在每一篇工作总结中都写，但思想上一定要有个正确的认识。每篇工作总结都要坚持辩论法，坚持一分为二的两点论，既看到成绩又看到存在的问题，分清主流和枝节。这样才能发扬成绩、纠正错误，虚心 谨慎，继续前进。 写存在的问题与教训要中肯、恰当、实事求是。 (4)结尾一般写今后努力的方向，或者写今后的打算。这部分要精炼、 简洁。 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[财务出纳工作交接书]财务出纳工作交接书移交原出纳员XX，因工作调动 ，财务处已决定将出纳工作移交给XX 接管 ，财务出纳工作交接书。 现办理如下交接 : 一、交接日期 2011年X月X日 二、具体业务的移交 1.库存现金:X 月 X 日账面余额 xx 元，实存相符，日记账余额与总账相符; 2.库存国库券:xx元 ，经核对无误; 3.银行存款余额 xxx 万元 ， 经编制 “银行存款余额调节表” 核对相符。 三、移交的会计凭证 、 账簿 、文件 1.本年度现金日记账一本 ; 2.本年度银行存款日记账二本; 3.空白现金支票 XX 张 (XX号至 XX 号 ); 4.空白转账支票 XX 张 (XX号至 XX 号 ); 5.托收承付登记簿一本; 6.付款委托书一本; 7.信汇登记簿一本; 8.金库暂存物品细表一份，与实物核对相符; 20 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 9.银行对账单 1 -10 月份 10 本 ;10月份未达账项说明一份 ; 四、印鉴 1.XX 公司财务处转讫印章一枚; 2.XX 公司财务处现金收讫印章一枚 ; 3.XX 公司财务处现金付讫印章一枚 ; 五、交接前后工作责任的划分 2011 年X月X日前的出纳责任事项由XX负责 ;2011 年X月 X 日起的出纳工作由XX 负责 。 以上移交事项均经交接双方认定无误。 六、本交接书一式三份，双方各执一分，存档一份. 【扩展阅读篇】 工作总结格式一般分为:标题、主送机关、正文、署名四部分。 (1)标题。一般是根据工作总结的中心内容、目的要求、总结方向来定。同一事物因工作总结的方向——侧重点不同其标题也就不同。工作总结标题有单标题，也有双标题。字迹要醒目。单标题就是只有一个题目，如《我省干部选任制度改革的一次成功尝试》。一般说，工作总结的标题由工作总结的单位名称、工作总结的时间、工作总结的内容或种类三部分组成。如“××市化工厂1995年度生产工作总结”“××市××研究所1995年度工作总结”也可以省略其中一部分，如:“三季度工作总结”，省略了单位名称。毛泽东的《关于打退第二次反共高潮的总结》，其标题不仅省略了总结的单位名称，也省略了时限。双标题就是分正副标题。正标题往往是揭示主题——即所需工作总结提炼的东西，副标题往往指明工作总结的内容、单位、时间等。例如: 21 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 辛勤拼搏结硕果——××县氮肥厂一九九五年工作总结—— (2)前言。即写在前面的话，工作总结起始的段落。其作用在于用简炼的文字概括交代工作总结的问题;或者说明所要总结的问题、时间、地点、背景、事情的大致经过;或者将工作总结的中心内容:主要经验、成绩与效果等作概括的提示;或者将工作的过程、基本情况、突出的成绩作简洁的介绍。其目的在于让读者对工作总结的全貌有一个概括的了解、为阅读、理解全篇打下基础，工作总结《财务出纳工作交接书》。 (3)正文。正文是工作总结的主体，一篇工作总结是否抓住了事情的本质，实事求是地反映出了成绩与问题，科学地总结出了经验与教训，文章是否中心突出，重点明确、阐述透彻、逻辑性强、使人信，全赖于主体部分的写作水平与质量。因此，一定要花大力气把立体部分的材料安排好、写好。正文的基本内容是做法和体会、成绩和缺点、经验和教训。 1)成绩和经验这是工作总结的目的，是正文的关键部分，这部分材料如何安排很重要，一般写法有二。一是写出做法，成绩之后再写经验。即表述成绩、做法之后从分析成功的原因、主客观条件中得出经验教益。二是写做法、成绩的同时写出经验，“寓经验于做法之中”。也有在做法，成绩之后用“心得体会”的方式来介绍经验，这实际是前一种写法。成绩和经验是工作总结的中心和重点，是构成工作总结正文的支柱。所谓成绩是工作实践过程中所得到的物质成果和精神成果。所谓经验是指在工作中取得的优良成绩和成功的原因。在工作总结 22 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 中，成绩表现为物质成果，一般运用一些准确的数字表现出来。精神成果则要用前后对比的典型事例来说明思想觉悟的提高和精神境界的高尚，使精神成果在工作总结中看得见、摸得着，才有感染力和说明力。 2)存在的问题和教训一般放在成绩与经验之后写。存在的问题虽不在每一篇工作总结中都写，但思想上一定要有个正确的认识。每篇工作总结都要坚持辩论法，坚持一分为二的两点论，既看到成绩又看到存在的问题，分清主流和枝节。这样才能发扬成绩、纠正错误，虚心谨慎，继续前进。 写存在的问题与教训要中肯、恰当、实事求是。 (4)结尾一般写今后努力的方向，或者写今后的打算。这部分要精炼、简洁。 (5)署名和日期。署名写在结尾的右下方，在署名下边写上工作总结的年、月、日，如为突出单位，把单位名称写在标题下边，则结尾只落上日期即可。 简而言之: 总结，就是把某一时期已经做过的工作，进行一次全面系统的总检查、总评价，进行一次具体的总分析、总研究;也就是看看取得了哪些成绩，存在哪些缺点和不足，有什么经验、提高。 那么，工作总结怎么写?个人工作总结的格式是怎样的?详情请看下文解析。 (一)基本情况 1. 总结必须有情况的概述和叙述，有的比较简单，有的比较详细。 23 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 这部分内容主要是对工作的主客观条件、有利和不利条件以及工作的环境和基础等进行分析。 2. 成绩和缺点。这是总结的中心。总结的目的就是要肯定成绩，找出缺点。成绩有哪些，有多大，表现在哪些方面，是怎样取得的;缺点有多少，表现在哪些方面，是什么性质的，怎样产生的，都应讲清楚。 3. 经验和教训。做过一件事，总会有经验和教训。为便于今后的工作，须对以往工作的经验和教训进行分析、研究、概括、集中，并上升到理论的高度来认识。 今后的打算。根据今后的工作任务和要求，吸取前一时期工作的经验和教训，明确努力方向，提出改进措施等。具体可以参考部分工作总结范文。 (二)写好总结需要注意的问题 1. 一定要实事求是，成绩不夸大，缺点不缩小，更不能弄虚作假。这是分析、得出教训的基础。 2. 条理要清楚。总结是写给人看的，条理不清，人们就看不下去，即使看了也不知其所以然，这样就达不到总结的目的。 3. 要剪裁得体，详略适宜。材料有本质的，有现象的;有重要的，有次要的，写作时要去芜存精。总结中的问题要有主次、详略之分，该详的要详，该略的要略。另外，在结尾处也可以附上下一步个人。 24 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 财务出纳工作流程 [财务出纳工作流程]财务出纳工作流程出纳人员应当有一份自己的工作流程表，才能使工作有条不紊，也不会在忙碌的工作中迷失方向，财务出纳工作流程。 1.出纳工作的每日流程 出纳工作的每日流程一般是: (1)上班第一时间，列明昨日未办完事项，检查现金库存，查询银行存款余额。 (2)请示领导或财务主管对当日资金的收支安排，在当日工作安排簿上一一列明。 (3)根据领导批示办理付款手续，付款依据必须真实、完整、合理，超越权限范围的付款要求应当报送相应的领导审批。 (4)办理各种收款事项，应当注意收入计算的准确性，明确收入来源。 (5)对收、付款单证进行检查，补齐手续并分类。 (6)根据收、付款单据，编制记帐凭证。 (7)根据记帐凭证，逐日逐笔按顺序登记现金日记帐和银行存款日记帐，并每日结出余额。 (8)逐笔注销工作安排簿中已完成事项。 (9)下班前进行库存现金盘点，做到帐实相符。 (10)对银行支票进行清点，核实当日银行收支金额。 25 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ (11)对发票、收据等进行清点，合适当日相关业务。 (12)对未完成的经济也列明待处理。 (13)编制出纳日报表，反映单日资金收支情况。 (14)临下班前，检查保险柜、抽屉是否锁好，资料凭证是否收好。 2、出纳工作每周流程 对于收支业务频繁的大中型企业，为了提高工作效率和便于资金安排，通常以每周为一个出纳工作周期。出纳工作的每周流程大致是: 星期一:各部门及结算单位报送付款申请或付款通知书。 【扩展阅读篇】 工作总结格式一般分为:标题、主送机关、正文、署名四部分。 (1)标题。一般是根据工作总结的中心内容、目的要求、总结方向来定。同一事物因工作总结的方向——侧重点不同其标题也就不同。工作总结标题有单标题，也有双标题。字迹要醒目。单标题就是只有一个题目，如《我省干部选任制度改革的一次成功尝试》。一般说，工作总结的标题由工作总结的单位名称、工作总结的时间、工作总结的内容或种类三部分组成。如“××市化工厂1995年度生产工作总结”“××市××研究所1995年度工作总结”也可以省略其中一部分，如:“三季度工作总结”，省略了单位名称。毛泽东的《关于打退第二次反共高潮的总结》，其标题不仅省略了总结的单位名称，也省略了时限。双标题就是分正副标题。正标题往往是揭示主题——即所需工作总结提炼的东西，副标题往往指明工作总结的内容、单位、时间等。例如:辛勤拼搏结硕果——××县氮肥厂一九九五年工作总结—— 26 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ (2)前言。即写在前面的话，工作总结起始的段落。其作用在于用简炼的文字概括交代工作总结的问题;或者说明所要总结的问题、时间、地点、背景、事情的大致经过;或者将工作总结的中心内容:主要经验、成绩与效果等作概括的提示;或者将工作的过程、基本情况、突出的成绩作简洁的介绍，工作总结《财务出纳工作流程》。其目的在于让读者对工作总结的全貌有一个概括的了解、为阅读、理解全篇打下基础。 (3)正文。正文是工作总结的主体，一篇工作总结是否抓住了事情的本质，实事求是地反映出了成绩与问题，科学地总结出了经验与教训，文章是否中心突出，重点明确、阐述透彻、逻辑性强、使人信，全赖于主体部分的写作水平与质量。因此，一定要花大力气把立体部分的材料安排好、写好。正文的基本内容是做法和体会、成绩和缺点、经验和教训。 1)成绩和经验这是工作总结的目的，是正文的关键部分，这部分材料如何安排很重要，一般写法有二。一是写出做法，成绩之后再写经验。即表述成绩、做法之后从分析成功的原因、主客观条件中得出经验教益。二是写做法、成绩的同时写出经验，“寓经验于做法之中”。也有在做法，成绩之后用“心得体会”的方式来介绍经验，这实际是前一种写法。成绩和经验是工作总结的中心和重点，是构成工作总结正文的支柱。所谓成绩是工作实践过程中所得到的物质成果和精神成果。所谓经验是指在工作中取得的优良成绩和成功的原因。在工作总结中，成绩表现为物质成果，一般运用一些准确的数字表现出来。精神 27 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 成果则要用前后对比的典型事例来说明思想觉悟的提高和精神境界的高尚，使精神成果在工作总结中看得见、摸得着，才有感染力和说明力。 2)存在的问题和教训一般放在成绩与经验之后写。存在的问题虽不在每一篇工作总结中都写，但思想上一定要有个正确的认识。每篇工作总结都要坚持辩论法，坚持一分为二的两点论，既看到成绩又看到存在的问题，分清主流和枝节。这样才能发扬成绩、纠正错误，虚心谨慎，继续前进。 写存在的问题与教训要中肯、恰当、实事求是。 (4)结尾一般写今后努力的方向，或者写今后的打算。这部分要精炼、简洁。 (5)署名和日期。署名写在结尾的右下方，在署名下边写上工作总结的年、月、日，如为突出单位，把单位名称写在标题下边，则结尾只落上日期即可。 简而言之: 总结，就是把某一时期已经做过的工作，进行一次全面系统的总检查、总评价，进行一次具体的总分析、总研究;也就是看看取得了哪些成绩，存在哪些缺点和不足，有什么经验、提高。 那么，工作总结怎么写?个人工作总结的格式是怎样的?详情请看下文解析。 (一)基本情况 1. 总结必须有情况的概述和叙述，有的比较简单，有的比较详细。这部分内容主要是对工作的主客观条件、有利和不利条件以及工作的 28 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 环境和基础等进行分析。 2. 成绩和缺点。这是总结的中心。总结的目的就是要肯定成绩，找出缺点。成绩有哪些，有多大，表现在哪些方面，是怎样取得的;缺点有多少，表现在哪些方面，是什么性质的，怎样产生的，都应讲清楚。 3. 经验和教训。做过一件事，总会有经验和教训。为便于今后的工作，须对以往工作的经验和教训进行分析、研究、概括、集中，并上升到理论的高度来认识。 今后的打算。根据今后的工作任务和要求，吸取前一时期工作的经验和教训，明确努力方向，提出改进措施等。具体可以参考部分工作总结范文。 (二)写好总结需要注意的问题 1. 一定要实事求是，成绩不夸大，缺点不缩小，更不能弄虚作假。这是分析、得出教训的基础。 2. 条理要清楚。总结是写给人看的，条理不清，人们就看不下去，即使看了也不知其所以然，这样就达不到总结的目的。 3. 要剪裁得体，详略适宜。材料有本质的，有现象的;有重要的，有次要的，写作时要去芜存精。总结中的问题要有主次、详略之分，该详的要详，该略的要略。另外，在结尾处也可以附上下一步个人工作计划。 财务处处长工作总结 29 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ [财务处处长工作总结]财务处处长工作总结1.整理、修订和完善了《淮安信虑职业技术学院财务管理实施细则》、《淮安信息职业技术学院财务内控制度》、《淮安信息职业技木学院财务报销工作流程》、《淮安信息职业技术学院财务服务工作承诺》等，财务处处长工作总结。通过对有关制度、规程、流程和承诺的修订，进一步明确了服务标准，规范了服务行为，提高了服务的自觉性。 2.配合财务审计工作，2011年暑假期间，组织财务处全体工作人员对2011年以来的财务账目进行了自查，通过自查发现了学生学费收缴工作中存在的问题，并及时进行了纠正。针对自查过程中发现的问题，财务处提出了整改措施。 3.组织2011年学院预算的编制，在院领导的正确指导下，2011年财政拨款经费预计比2010预算指标增加29%增幅达1000万元。2011年按院领导的决策，在相关部门的共同努力下，额外争取到申央财政、省财政、省信息产业厅支持的实训基地、基础实验室、信息化项目等经费共计923.1万元。 4.今年从两个方面开创了收费工作的新局面，一是实现了学生收费收据的计算机打印，解决了困扰多年的收费收据短缺的问题，使得收费工作更加规范，二是开创了缴费方式的多样化，更加方便学生缴费。经过财务处全体人员的共同努力和各系的大力配合，今年学费、住宿费收入比去年增加了17%。 5.在院领导的直接指导和亲自参与下，经过与专业银行的多次沟通、协调，2011年新增银行贷款3800万元，保证了教学实验、实习项目 30 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 新增和改造的资金需求，基本保障了校区建设经费的投入。 6.在日常收文管理中，做到对一切开支严格按财务制度和预算计划办理，对各类收入严格执行收支两条线。2011年经过财务处办理的各类支出经费近亿元无差错。 7.完成一个班的高等数学教学工作，年160学时。公开发表一篇。 8.财务内控制度的落实不到位，财务账款的审核、监督机制不够完善。 【扩展阅读篇】 工作总结格式一般分为:标题、主送机关、正文、署名四部分。 (1)标题。一般是根据工作总结的中心内容、目的要求、总结方向来定。同一事物因工作总结的方向——侧重点不同其标题也就不同。工作总结标题有单标题，也有双标题。字迹要醒目。单标题就是只有一个题目，如《我省干部选任制度改革的一次成功尝试》。一般说，工作总结的标题由工作总结的单位名称、工作总结的时间、工作总结的内容或种类三部分组成。如“××市化工厂1995年度生产工作总结”“××市××研究所1995年度工作总结”也可以省略其中一部分，如:“三季度工作总结”，省略了单位名称。毛泽东的《关于打退第二次反共高潮的总结》，其标题不仅省略了总结的单位名称，也省略了时限。双标题就是分正副标题，工作总结《财务处处长工作总结》。正标题往往是揭示主题——即所需工作总结提炼的东西，副标题往往指明工作总结的内容、单位、时间等。例如:辛勤拼搏结硕果——××县氮肥厂一九九五年工作总结—— (2)前言。即写在前面的话，工作总结起始的段落。其作用在于用简炼 31 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 的文字概括交代工作总结的问题;或者说明所要总结的问题、时间、地点、背景、事情的大致经过;或者将工作总结的中心内容:主要经验、成绩与效果等作概括的提示;或者将工作的过程、基本情况、突出的成绩作简洁的介绍。其目的在于让读者对工作总结的全貌有一个概括的了解、为阅读、理解全篇打下基础。 (3)正文。正文是工作总结的主体，一篇工作总结是否抓住了事情的本质，实事求是地反映出了成绩与问题，科学地总结出了经验与教训，文章是否中心突出，重点明确、阐述透彻、逻辑性强、使人信，全赖于主体部分的写作水平与质量。因此，一定要花大力气把立体部分的材料安排好、写好。正文的基本内容是做法和体会、成绩和缺点、经验和教训。 1)成绩和经验这是工作总结的目的，是正文的关键部分，这部分材料如何安排很重要，一般写法有二。一是写出做法，成绩之后再写经验。即表述成绩、做法之后从分析成功的原因、主客观条件中得出经验教益。二是写做法、成绩的同时写出经验，“寓经验于做法之中”。也有在做法，成绩之后用“心得体会”的方式来介绍经验，这实际是前一种写法。成绩和经验是工作总结的中心和重点，是构成工作总结正文的支柱。所谓成绩是工作实践过程中所得到的物质成果和精神成果。所谓经验是指在工作中取得的优良成绩和成功的原因。在工作总结中，成绩表现为物质成果，一般运用一些准确的数字表现出来。精神成果则要用前后对比的典型事例来说明思想觉悟的提高和精神境界的高尚，使精神成果在工作总结中看得见、摸得着，才有感染力和说 32 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 明力。 2)存在的问题和教训一般放在成绩与经验之后写。存在的问题虽不在每一篇工作总结中都写，但思想上一定要有个正确的认识。每篇工作总结都要坚持辩论法，坚持一分为二的两点论，既看到成绩又看到存在的问题，分清主流和枝节。这样才能发扬成绩、纠正错误，虚心谨慎，继续前进。 写存在的问题与教训要中肯、恰当、实事求是。 (4)结尾一般写今后努力的方向，或者写今后的打算。这部分要精炼、简洁。 (5)署名和日期。署名写在结尾的右下方，在署名下边写上工作总结的年、月、日，如为突出单位，把单位名称写在标题下边，则结尾只落上日期即可。 简而言之: 总结，就是把某一时期已经做过的工作，进行一次全面系统的总检查、总评价，进行一次具体的总分析、总研究;也就是看看取得了哪些成绩，存在哪些缺点和不足，有什么经验、提高。 那么，工作总结怎么写?个人工作总结的格式是怎样的?详情请看下文解析。 (一)基本情况 1. 总结必须有情况的概述和叙述，有的比较简单，有的比较详细。这部分内容主要是对工作的主客观条件、有利和不利条件以及工作的环境和基础等进行分析。 2. 成绩和缺点。这是总结的中心。总结的目的就是要肯定成绩，找 33 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 出缺点。成绩有哪些，有多大，表现在哪些方面，是怎样取得的;缺点有多少，表现在哪些方面，是什么性质的，怎样产生的，都应讲清楚。 3. 经验和教训。做过一件事，总会有经验和教训。为便于今后的工作，须对以往工作的经验和教训进行分析、研究、概括、集中，并上升到理论的高度来认识。 今后的打算。根据今后的工作任务和要求，吸取前一时期工作的经验和教训，明确努力方向，提出改进措施等。具体可以参考部分工作总结范文。 (二)写好总结需要注意的问题 1. 一定要实事求是，成绩不夸大，缺点不缩小，更不能弄虚作假。这是分析、得出教训的基础。 2. 条理要清楚。总结是写给人看的，条理不清，人们就看不下去，即使看了也不知其所以然，这样就达不到总结的目的。 3. 要剪裁得体，详略适宜。材料有本质的，有现象的;有重要的，有次要的，写作时要去芜存精。总结中的问题要有主次、详略之分，该详的要详，该略的要略。另外，在结尾处也可以附上下一步个人工作计划。 财务出纳月工作总结 [财务出纳月工作总结]财务出纳月工作总结经过了将近3个月紧张的工作实践和总结，知道了要作好出纳工作绝不可以用“轻松”来形 34 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 容，出纳工作绝非“雕虫小技”，更不是可有可无的一个无足轻重的岗位，出纳工作是会计工作不可缺少的一个部分，它是经济工作的第一线，因此，它要求出纳员要有全面精通的政策水平，熟练高超的业务技能，严谨细致的工作作风，作为一个合格的出纳，必须具备以下的基本要求: 一.学习、了解和掌握政策法规和公司制度，不断提高自己的政策水平，财务出纳月工作总结。 二.出纳工作需要很强的操作技巧。打算盘、用电脑、填支票、点钞票等都需要深厚的基本功。作为专职的出纳员，不但要具备处理一般会计事物的财务会计专业基本知识，还要具备较高的处理出纳事务的出纳专业知识水平和较强的数字运算能力。 三.做好出纳工作首先要热爱出纳工作，要有严谨细致的工作作风和职业道德。 四.出纳人员要有较强的安全意识，现金、有价证券、票据、各种印鉴，既要有内部的保管分工，各负其责，并相互牵制;也要有对外的保安措施，维护个人安全和公司的利益不受到损失。 五.出纳人员必须具备良好的职业道德修养，要热爱本职工作，精业、敬业，要竭力为本单位中心工作，为单位的总体利益、为全体职工服务，牢固的树立为人民服务的思想。 以上都是我将近3个月工作以来的一些体会和认识，也是我不断在工作中将理论转化为实践的一个过程。在工作中学习和努力提高业务技能，使自身的工作能力和工作效率得到了迅速提高，在以后的工作 35 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 和学习中我还将不懈的努力和拼搏，做好自己的本职工作，为公司和全体职工服务，和公司和全体员工一起共同发展!在此，我要特别感谢公司领导和各位同仁在工作和生活中给予我的支持和关心，这是对我工作最大的肯定和鼓舞，我真诚的表示感谢! 【扩展阅读篇】 工作总结格式一般分为:标题、主送机关、正文、署名四部分。 (1)标题。一般是根据工作总结的中心内容、目的要求、总结方向来定。同一事物因工作总结的方向——侧重点不同其标题也就不同。工作总结标题有单标题，也有双标题。字迹要醒目。单标题就是只有一个题目，如《我省干部选任制度改革的一次成功尝试》。一般说，工作总结的标题由工作总结的单位名称、工作总结的时间、工作总结的内容或种类三部分组成，工作总结《财务出纳月工作总结》。如“××市化工厂1995年度生产工作总结”“××市××研究所1995年度工作总结”也可以省略其中一部分，如:“三季度工作总结”，省略了单位名称。毛泽东的《关于打退第二次反共高潮的总结》，其标题不仅省略了总结的单位名称，也省略了时限。双标题就是分正副标题。正标题往往是揭示主题——即所需工作总结提炼的东西，副标题往往指明工作总结的内容、单位、时间等。例如:辛勤拼搏结硕果——××县氮肥厂一九九五年工作总结—— (2)前言。即写在前面的话，工作总结起始的段落。其作用在于用简炼的文字概括交代工作总结的问题;或者说明所要总结的问题、时间、地点、背景、事情的大致经过;或者将工作总结的中心内容:主要经 36 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 验、成绩与效果等作概括的提示;或者将工作的过程、基本情况、突出的成绩作简洁的介绍。其目的在于让读者对工作总结的全貌有一个概括的了解、为阅读、理解全篇打下基础。 (3)正文。正文是工作总结的主体，一篇工作总结是否抓住了事情的本质，实事求是地反映出了成绩与问题，科学地总结出了经验与教训，文章是否中心突出，重点明确、阐述透彻、逻辑性强、使人信，全赖于主体部分的写作水平与质量。因此，一定要花大力气把立体部分的材料安排好、写好。正文的基本内容是做法和体会、成绩和缺点、经验和教训。 1)成绩和经验这是工作总结的目的，是正文的关键部分，这部分材料如何安排很重要，一般写法有二。一是写出做法，成绩之后再写经验。即表述成绩、做法之后从分析成功的原因、主客观条件中得出经验教益。二是写做法、成绩的同时写出经验，“寓经验于做法之中”。也有在做法，成绩之后用“心得体会”的方式来介绍经验，这实际是前一种写法。成绩和经验是工作总结的中心和重点，是构成工作总结正文的支柱。所谓成绩是工作实践过程中所得到的物质成果和精神成果。所谓经验是指在工作中取得的优良成绩和成功的原因。在工作总结中，成绩表现为物质成果，一般运用一些准确的数字表现出来。精神成果则要用前后对比的典型事例来说明思想觉悟的提高和精神境界的高尚，使精神成果在工作总结中看得见、摸得着，才有感染力和说明力。 2)存在的问题和教训一般放在成绩与经验之后写。存在的问题虽不 37 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 在每一篇工作总结中都写，但思想上一定要有个正确的认识。每篇工作总结都要坚持辩论法，坚持一分为二的两点论，既看到成绩又看到存在的问题，分清主流和枝节。这样才能发扬成绩、纠正错误，虚心谨慎，继续前进。 写存在的问题与教训要中肯、恰当、实事求是。 (4)结尾一般写今后努力的方向，或者写今后的打算。这部分要精炼、简洁。 (5)署名和日期。署名写在结尾的右下方，在署名下边写上工作总结的年、月、日，如为突出单位，把单位名称写在标题下边，则结尾只落上日期即可。 简而言之: 总结，就是把某一时期已经做过的工作，进行一次全面系统的总检查、总评价，进行一次具体的总分析、总研究;也就是看看取得了哪些成绩，存在哪些缺点和不足，有什么经验、提高。 那么，工作总结怎么写?个人工作总结的格式是怎样的?详情请看下文解析。 (一)基本情况 1. 总结必须有情况的概述和叙述，有的比较简单，有的比较详细。这部分内容主要是对工作的主客观条件、有利和不利条件以及工作的环境和基础等进行分析。 2. 成绩和缺点。这是总结的中心。总结的目的就是要肯定成绩，找出缺点。成绩有哪些，有多大，表现在哪些方面，是怎样取得的;缺点有多少，表现在哪些方面，是什么性质的，怎样产生的，都应讲 38 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 清楚。 3. 经验和教训。做过一件事，总会有经验和教训。为便于今后的工作，须对以往工作的经验和教训进行分析、研究、概括、集中，并上升到理论的高度来认识。 今后的打算。根据今后的工作任务和要求，吸取前一时期工作的经验和教训，明确努力方向，提出改进措施等。具体可以参考部分工作总结范文。 (二)写好总结需要注意的问题 1. 一定要实事求是，成绩不夸大，缺点不缩小，更不能弄虚作假。这是分析、得出教训的基础。 2. 条理要清楚。总结是写给人看的，条理不清，人们就看不下去，即使看了也不知其所以然，这样就达不到总结的目的。 3. 要剪裁得体，详略适宜。材料有本质的，有现象的;有重要的，有次要的，写作时要去芜存精。总结中的问题要有主次、详略之分，该详的要详，该略的要略。另外，在结尾处也可以附上下一步个人工作计划。 39 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 40