生物化学与分子生物学论文：拟南芥 MPS1 减数分裂 纺锤体 DSB

生物化学与分子生物学论文：拟南芥 MPS1 减数分裂 纺锤体 DSB 生物化学与分子生物学论文:MPS1在拟南芥减数分裂过程中的初步功能分析 【中文摘要】在高等植物拟南芥减数分裂过程中,MULTIPOLAR SPINDLE 1(MPS1)不仅参与纺锤体的极性建成,而且在减数分裂前期I同源染色体DNA双链断裂(Double-strand Break,DSB)形成过程中发挥重要作用。该基因的敲除导致了纺锤体异常和同源染色体不能发生联会和交换,从而使得mps1突变体雌雄育性剧烈下降。本文在前期的研究基础上,对MPS1在拟南芥减数分裂过程中的功能展开了更进一步的研究。通过构建MPS1同GUS融合蛋白表达载体,转化并互补mps1突变体,使融合蛋白在植物体内稳定表达。转基因植株育性恢复正常。对转基因植株的组织化学染色表明MPS1在拟南芥各组织中均有不同程度蛋白水平表达。我们又利用酵母双杂交技术研究了MPS1同目前已知的四个与DSB形成有关的蛋白之间的相互作用,结果显示MPS1可能不参与DNA双链断裂过程中蛋白复合体的形成。随后我们通过酵母双杂交筛库发现MPS1能够与一个运动蛋白轻链相关蛋白的C端发生相互作用。同时我们在拟南芥中对该蛋白进行了序列分析和同源比对。接下来又对其功能进行了初步的分析和探索。本文的这些工作结果为日后了解MPS1如何参与同源染色体联会和DSB形成以及... 【英文摘要】In Arabidopsis thaliana, MULTIPOLAR SPINDLE 1(MPS1) not only gets involved in the construction of spindle polarity during meiotic prophase I, but also plays an important role in homologous chromosome synapsis and the formation of DNA double-strand breaks during meiotic prophase I. The knockout mutant of MPS1 resulted in abnormal spindle organization, defective homologous chromosome synapsis and a total absence of chiasmata, which led to both male and female sterility. In this study, our investigation of MPS... 【关键词】拟南芥 MPS1 减数分裂 纺锤体 DSB 【英文关键词】Arabidopsis thaliana MPS1 meiosis spindle DSB 【目录】MPS1在拟南芥减数分裂过程中的初步功能分析 中文 摘要 5-6 Abstract 6 1. 前言 8-30 1.1 减数分 裂的分子机制 8-11 1.2 与减数分裂有关基因的研究进展 11-15 1.3 高等植物纺锤体的形成机制 15-21 1.4 马 达蛋白的功能及分子机制 21-26 1.5 本研究的背景、目的和内 容 26-30 2. 材料与方法 30-43 2.1 实验材料 30-32 2.2 实验方法 32-43 3. 结果 43-53 3.1 MPS1 与GUS 融合蛋白转基因植株的获得 43-46 3.2 MPS1 在 拟南芥中的组织蛋白表达分析 46-48 3.3 MPS1 在DNA DSB 形 成过程中的功能 48-50 3.4 MPS1 与运动蛋白轻链相关蛋白相 互作用的验证 50 3.5 拟南芥KRP 及其同源蛋白功能分析 50-53 4. 讨论 53-56 参考文献 56-66 致谢 66