HPLC法测定止泻灵颗粒中甘油三油酸酯的含量

HPLC法测定止泻灵颗粒中甘油三油酸酯的含量 HPLC法测定止泻灵颗粒中甘油三油酸酯的 含量 摘要,目的 建立HPLC法测定止泻灵颗粒中甘油三油酸酯的含量的方法。方法 采用Agilent Extend C18色谱柱,以乙腈-二氯甲烷,60,40,为流动相,流速为0.8 ml?min-1,采用蒸发光检测器,漂移管温度为70?,氮气流速为1.2 L?min-1。结果 甘油三油酸酯的线性范围为0.281,3.502 μg,r=0.9986,平均回收率为100.81%,RSD为1.3%。结论 所建立的方法简便、定量准确,可用于止泻灵颗粒的质量控制 关键词,薏苡仁,甘油三油酸酯,HPLC 止泻灵颗粒收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂中的第十七册,是由党参、白术,炒,、陈皮、薏苡仁等十味药材组成的复方制剂,具有补脾益气,渗湿止泻的功效,用于脾胃虚弱所致的大便溏泄,饮食减少,食后腹胀,倦怠懒言,以及慢性肠炎见上述证候者等症的治疗,其中薏苡仁的主要有效成份为甘油三油酸酯。在于其他药物进行使用时有可能会出现药物相互作用。目前止泻灵颗粒的质量控制多数采用鉴别、检查等测定方式进行检测,无含量测定的方法, 1 是为了更好地控制止泻灵颗粒的内在质量,确保患者的临床用药安全。本文采用高效液相色谱法测定该制剂中的甘油三油酸酯含量,现报道如下 1 仪器与试药 Waters e2695高效液相色谱仪,美国,,Waters 2424蒸发光散射检测器,美国,,甘油三油酸酯对照品,批品,111692-201509,中国药品生物制品检定所,乙腈、二氯甲烷均为色谱纯,其他试剂均为分析纯,水为纯化水 2 方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱,Agilent Extend C18,,4.6mm×250mm,5μm,,流动相,乙腈-二氯甲烷,60,40,为流动相,检验波长,264 nm,流速,0.8 ml?min-1,柱温,25?,ELSD参数,漂移管温度为70?,氮气流速为1.2 L?min-1。理论板数按甘油三油酸酯峰[2]计算,应不低于3000 2.2对照品溶液的制备 取甘油三油酸酯对照品适量,精密称定14.03mg,加流动相制成每1ml含甘油三油酸酯0.1403mg,作为对照品储备液,0.1403 mg?ml-1, 2.3供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品,混匀,取适量,研细,取约0.6 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入流动相50 ml,密塞,称定重量,浸泡2 h,超声处理,功率300W,频率50 kHz,30 min,放冷,再进行称重, 2 用流动相补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得 2.4阴性样品溶液 按相应的比例及工艺制备缺薏苡仁的样品,按”2.3”项下方法配制阴性溶液,分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性供试品溶液10 μl,按照上述色谱条件进样,色谱图,见图1,明在本实验条件下,处方中其它成分与甘油三油酸酯分离度良好,阴性供试品溶液在与对照品峰相应处未出现色谱峰 2.5线性关系考察 在上述色谱条件下,精密吸取对照品储备液2、4、6、8、10、15、20、25μl,注入液相色谱仪,测定峰的面积,以进样量,μg,的对数,X,为横坐标,以峰面积的对数,Y,为纵坐标,作为曲线标准,并采用最小二乘法来进行计算,最后得出回归方程,Y=1.2719X+3.7359 r=0.9986结果表明甘油三油酸酯在0.281,3.502μg的范围内呈线性关系较良好 2.6精密度试验 精密吸取对照品溶液,0.1403 mg?ml-1, 10μl,连续进样5次,记录峰面积,其峰面积RSD=0.87%,n=5, 2.7稳定性试验 取供试品溶液,批号,20141008,,每隔2 h,进样1次,进样量10 μl,重复进样5次,记录峰面积,结果5次进样甘油三油酸酯峰面积RSD=1.21%,n=5,。表明供试品溶液在8 h稳定 2.8重复性试验 取批号为20141008的样品,按”2.3”项 3 的方法进行制备供试品溶液,共5份,测定溶液的含量,为每袋0.38 mg,RSD=0.97%,n=5, 2.9加样回收率试验 精密称取已知含量的同一批号,批号,141008,含量0.03228 mg?g-1,的样品0.3 g,分别精密加入甘油三油酸酯对照品溶液,0.01631 mg?ml-1,10 ml,按供试品溶液的制备方法制备及上述色谱条件测定,计算溶液的回收率,结果显示,该溶液的回收率平均值为100.81%,RSD=1.3%,n=6, 2.10样品含量测定 精密吸取甘油三油酸酯对照品溶液与供试品溶液,批号,141008、140611、140307,10 μl,按上述色谱条件测定,记录峰面积,以外标法计算样品中甘油三油酸酯含量分别为每袋0.39、0.41、0.44 mg,n=3, 3 讨论 取样品进行了回流、索氏提取、超声处理等提取方法进行检测,结果显示超声处理提取方法既方便又提取效率高 参考文献, [1]王隶书,程东,于秀明.抗病毒滴丸中连翘苷的HPLC测定[J].中国药师,2005,8,3,,216-217. ,辑/金昊天 4