【doc】新型隐球菌感染小鼠免疫功能的研究

【doc】新型隐球菌感染小鼠免疫功能的研究 新型隐球菌感染小鼠免疫功能的研究 宜昌医学专科学校1990年第18卷第2期 新型隐球菌感染小鼠免疫功能的研究 微生物学教研室李剑万福球叶畦民 摘要本文用溶血索测定.免疫玫瑰花结试验及PHA诱发的体内淋巴细胞转化试验 观察了新型隐球 菌感染小鼠免痘功能的改变,结果显示:与正常对照组相比,感染性小鼠特异性抗 体产生水平显着降低 (P<0.001);PHA诱发的体内淋巴细胞转化率也明显低于正常(p<0.01).试验结 果表明新型臆球菌 对特异性细胞免疫及体澈免疫均有显着地抑制作用. 关嘲新型稳球菌组胞免疫;体液免疫免疫冲毒I 近年来随着真菌发病率的增加,人们对 真菌与机体免疫力两者间相互关系的研究已 愈来愈重视.有关机体免疫功能低下易造成 深部真菌感染的观点已取得了较为一致的看 法,而对真菌本身对免疫系统的作用与致病 和治疗的戈系尚魁一个有待进一步研究的领 域.DiRIIIOI1d[注意到隐球菌感染患者 的细胞免疫功能受到抑制,M111"PhY[5也 观察到新型隐球菌感染能影响小鼠的细胞免 疫功能.目前尚未见新型路球菌感染对特异 性体掖免疫影响的报道,本试验对新型隐球 菌感染小鼠特异性体渡夏细胞免疫功能的影 响进行丁研究. 材料与方法 1.NIH纯种小鼠,22—24g雌雄各 半(湖北省防疫站动物室提供). 2.菌种山1骨穗球菌被肿病人病变处 分离(经形态学,生化反应及毒力试验证 实)用Sabouraud培养基保存,试验用前 2l小时传代一次 3.植物血凝素(PHA)(广东医学工 业研究所) 4.7"21分光光度仪(上海第三分析仪器 厂产品) 5.动物感染模型试验检测前8天从 Sabouraud斜面培养基取下菌种,用生理 盐水洗涤后调整细胞数为l×10/m1,腹腔 接种0.4m1/只,24,48,96小时及第7天 解剖小鼠,分别从血腹腔脾,肾中分离 出新型隐球菌,第7天肾脏含菌量为1.7× lO/g,脾脏为5.3×10./g,表明感染模 型成立. 6.溶血素测定(分光光度计测定法) 腹腔接种新型隐球菌后第4天,小鼠腹腔注 射5绵羊红细胞0.4m1,于免疫后第4 天处死小鼠取其血清进行溶血素测定【". 7.PHA诱导的体内淋巴细胞转化试 验设实验组和对照组,新型隐球菌接种后 第4天开始肌注PHA,6rag/kg,每日1次 共3次,连续三天,于首次注射PHA后96 小时剪尾取血推片瑞姬氏染色,}P数200个淋 巴细胞,求出百分转化率[. 8.免疫玫瑰花结形成细胞(IRFC) 试验小鼠腹腔接种新型隐球菌后4天,腹 腔注射5%绵羊红细胞0.4ml于绵羊红鲴胞 免疫后4天取出脾脏,制备成肆细胞悬液, 调整细胞浓度为l×10/Iill,取0.1ml细胞 115 悬液+O.1IT]11绵羊红细胞+O.tm1小牛 清,离心后置4.C冰箱2小时,甲基胺兰染 也,每个有核细胞结合5个以上的绵羊红细 胞为一个IRFC. 一 ,新型隐球菌感染对溶血素的影响 实验分阿把进行,共计动物26只,结果 显示(表1):感染组小鼠溶血素产生水平 显着低于正常组. 结果 表1新型隐球菌感染对溶血素产生的影响 =,新型臆球苗感染对淋巴转化功能的 彰响 从表2可以看出新型隐球菌对体内淋巴 转化有显着的抑制作用. 三,新型隐球茵感染甘IRFC的影响 与正常对照组的IRFC形成率() 干H比,感染组脾细胞IRFC形成率有下降 趋势,但无统计学的意义.(表2) 表2新型随球菌感染对细胞免疫功能莳影响 讨论 在抗耀部真菌的感染中T细胞,NK细 胞发挥了重要的作用,".体液免疫也具 有一定的保护作用.有实验证据表明新型隐 球菌的奘膜多糖具有抑制吞噬细胞的非特异 性免疫抑制作用.本实验对新型隐球蘸感染 小鼠细胞免疫功能影响的观察鳍果显示, PHA污发的休内淋巴细胞转化率显着低于 正常,而淋巴细胞的转化程度可反应出T淋 巴细胞的免疫应答功能,逮说明隐球菌感染 毙咎抑制细胞免疫功能.其详细机制尚未明 膝,可能与新型隐球菌刺激机体莱些免疫抑 制成分的产生有关MuphY等,曾报道 1 小鼠静脉注射强球菌抗原能够诱导一系捌摊 制细胞_及抑制因子产生.WatSon等:'] 在研究组织胞浆菌感染小鼠时发现,感染后 l一3周内小鼠脾细胞IL一1及IL一2 的水平显着降低.已经知道IL一2在调节 T细胞的增殖及功能中具有重要的作用,新 型隐球菌感染小鼠的淋巴细胞转化率的降低 是否与IL一2的水平碑低有关也是一个值得 探讨的问艇.在潍部真菌的感染中体藏免 疫具有一定的免疫保护作用【'一,本实验结 果还证明了新型稳球菌感染小鼠溶血素的产 生显着降低,反映出特异牲抗体形成细胞的 功能受到了抑制. 由于深部真菌感染发病率的增加一同时 也因为抗真茁药物耐药性菌橼的产生,因此 研究新型隐球菌感染的免疫机制,对于弄清 感染与免疫两者的关系以及探讨有效的免疫 治疗途径无疑是具有积极的意义.有关新型 路球菌免疫抑制作硐的详细机制尚待研究. 参考文献 [1]DLattoFId矗I),e l27:69' (2)Murph)IW,e .JrgfectDisl3- 1.IrAectImmnne1085 (83珠学英.药学197g;18(7y:"} (4)曼慑,葬澄醚.上海免盎学杂志1984?'(1):57 r5)林佩劳,等.中国免疫学杂志1985(8):l蓦2 (B]LimeTS,eta1.InfectImmu?elg80j 2g:683 (7?簪fphyJw?e8a1.Im!um~logY19$2j l拍:1577~' (?]ws.nSR,ta1.jI,mmll~o1】g85J i 鹋5(B):34盯 C0]heLdwM,eta1.immunol1983-'o:950 (1驰0—0g一25收稿) StudyofImmuneFunctiononMiceInfectedwith CryptococcusNeoforman~ Lijian,WanFazhu,Ye,Xingm; DepartreentofMicrobiology AbstractThechaIIgesimmUllefullctioninmiceii1fectedwith crYDtococcusneoforll~anserestudicdbYtheassaysofhe/TlO1YtiC antibodymeasurelllent,imm12.11ero?teformationce1IsandPttA— inducedT1ymphoeyteb1astogellesisiavivq.Theresu1tsshowe.dthat cornparedwithnormalgroup,the1eve1ofheftq.o1YticaIItihody sigaificalltlydecreased,andTlymphocyteblast~/euesisladucedby PHAwasa1somliehtessthanthatofilorlllalgro1婶. ThesefesuttsindicatethBtcryptOCOCCUSneoformansavestgollg immun0Suppressireeffeetsoilhalqflora1andcel1u1日rmediatediillmull一 .responses., KeywordsCryptococCusneoformallsrimmt1I"10SaPPressireeffect; humora1immtillity'ce11ulariii11TI11i"1itY ll7