[DOC] 海芒果叶的化学成分研究

[DOC] 海芒果叶的化学成分研究 海芒果叶的化学成分研究 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月?1447? 化学成分 海芒果叶的化学成分研究 张小波,林文翰,邓志威,张蔚青,付宏征,李军H (1.北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京100083;2.北京师范大学分析测试中心,北京100875) 摘要:目的研究中国红树植物海芒果的化学成分.运用硅胶,凝胶柱色谱进行分离纯化,根据波谱数据 进行结构鉴定.结果从海芒果的树叶中分离得到7个化合物,分别为:野鸦椿素B(3R,5S,6S,7E,9S一3,5,9-tri— hydroxy一6-methoxy-7一megastigmane,I),布卢门醇A(blumenolA,1), 野鸦椿素A(3R,5S,6R,7E,9S-3,5,6,9一 tetrahydroxy一7一megastigmane,?),1213一羟基一5a一孕烷一16一烯一3,20一二酮(12p-hydroxyl一5a—pregnane一16一ene一3,20一 dione,?),1213一羟基一孕烷一4,16一二烯一3,20一二酮(12p-hydroxyl—pregnane一4,16一diene一3,20一dione,V),313,1213 一二羟 基一孕烷一16一烯一2O一酮(313,12[3-dihydroxy—pregnane一16 一ene一20一one,?),3a,1213一二羟基一孕烷一16一烯一2O一酮 (3a,12:p-di— hydroxy—pregnane一16-ene一20一one,?).结论化合物I为新化合 物,命名为野鸦椿素B(euscaphinB),其他化合物 均为首次从该植物中分离得到. 关键词:红树林;夹竹桃科;海芒果;野鸦椿素B 中图分类号:R284.1文献标识码:A文章编 号:0253—2670(2006)10—1447—04 ChemicalconstituentsfromChinesemangroveplantCerberamanghas ZHANGXiao—bo,LINWen—han,DENGZhi—wei,ZHANGWei—qing, FUHong—zheng,LIJun (1.TheStateKeyLaboratoryofNaturalandBiomimeticDrugs,PekingUniversity,Beijing100053,China; 2.AnalyticalandTestingCenter,BeijingNormalUniversity,Beijing100875,China) Abstract:ObjectiveToinvestigatethechemicalconstituentsofmangroveplantCerberamanghas collectedinHainanProvinceofChina.MethodsColumnchromatographytechniqueswereusedforse— parationandpurificationofthecompoundsandextensivespectralanalysesincluding2DNMRspectrum wereemployedforstructuralelucidation.ResultsSevencompoundswereobt ainedfromleavesofC. manghas,including3R,5S,6S,7E,9S一3,5,9-trihydroxy一6一methoxy一7一megastigmane(I),blumenol A(?),3R,5S,6R,7E,9S一3,5,6,9-tetrahydroxy一7一 megastigmane(?),1213一hydroxyl一5a—pregnane一 16一ene一3,20一dione(?),1213一hydroxyl—pregnane一 4,16-diene一3,20一dione(V),3t3,1213一dihydroxy—preg— nane一16一ene一20一one(VI),3a,12B—dihydroxy—pregnane一 16-ene一20一one(-f1).ConclusionCompoundIis anewcompoundnamedaseuscaphinBandothercompoundsareisolatedfrom C.manghasforthefirst time. Keywords:mangroveplant;Apocynaceae;CerberamanghasL.;euscaphinB (3R,5S,6R,7E,9S一 3,5,9-trihydroxy一6一methoyl一7一megastigmane) 海芒果CerberamanghasL.系夹竹桃科植物, 又名海檬果,常绿小乔木,分布于我国广东,广西,海 南,台湾,生于海滨湿地,是优良的防潮树种,属半红 树植物.海芒果全株含乳状汁液,有毒,果实剧毒,民 间将其乳汁用作泻下剂.国外学者已对此种植物的 化学成分进行了较系统的研究,从中分离出黄酮,木 脂素,环烯醚萜,降单萜,强心苷等类化合物L1, 但分布于我国的海芒果化学成分研究报道较少,为 了系统研究我国红树植物的化学成分,本实验对海 芒果树叶进行了初步化学成分研究,从中分得3个 megastigmane类和4个孕甾酮类化合物,它们分别 被鉴定为野鸦椿素B(3R,5S,6S,7E,9S一3,5,9-tri— hydroxy-6一methoxy一7一megastigmane,I),布卢门 醇A(blumenolA,?),野鸦椿素A(3R,5S,6R, 7E,9S一3,5,6,9-tetrahydroxy一7一megastigmane, ?),1213一羟基一5a一孕烷一16一烯一3,20一二酮(1213一hy一 收稿日期:2006—03,06 *通讯作者李军 Tel:(010)82805105Fax:(01O)82802724E—mail:lijun@bjmu.edu.cn ?1448?中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月 droxyl一5~-pregnane一16一ene一3,2O—dione,?),1Z13-羟 基一孕烷一4,16一二烯一3,20一二酮(1213一hydroxyl—preg— nane一4,16-diene一3,20一dione,V),313,12G一二羟基一 孕烷一16一烯一20一酮(313,1213一dihydroxy—pregnane一16一 ene一20一one,V1),3a,12G一二羟基一孕烷一16一烯一20一酮 (3a,12~-dihydroxy—pregnane一16-ene一20一one,?), 均为首次从该属植物中得到,其中化合物I为新化 合物,命名为野鸦椿素B(euscaphinB). 1实验部分 1.1样品:海芒果(带叶,茎,枝)采自中国海南岛, 由厦门大学林鹏教授鉴定为夹竹桃科植物海芒果 CerberarnanghasL..标本存放于北京大学医学部 天然药物及仿生药物国家重点实验室海洋药物组. 1.2仪器与试剂:比旋光用WZZ一15自动旋光仪 测定;核磁共振用Brucker一500MHz—FT—NMR 型核磁共振仪测定(用TMS或氘代试剂残留峰作 内标);质谱用MDSSCIEXQSTAR型质谱仪测 定;高分辨质谱用GCT—MS型质谱仪测定;红外 光谱用NEXUSFT—IR红外光谱仪测定.色谱用 硅胶(200~300目)及薄层硅胶由青岛海洋化工厂 生产;SephadexLH一20为Merck公司产品.常用显 色剂:10HSO一EtOH溶液.其他试剂均为北京化 工二厂分析纯试剂. 1.3提取与分离:干燥海芒果树叶(1kg)粗粉,用 95乙醇冷浸提取3次,回流提取一次,合并乙醇提 取液,浓缩,得浸膏90g.浸膏用水悬浮分散后,分别 用石油醚,醋酸乙酯,正丁醇萃取,得到石油醚萃取 物50g,醋酸乙酯萃取物15g,正丁醇萃取物10g. 醋酸乙酯萃取物经硅胶柱色谱,氯仿一甲醇梯度 洗脱,得5个部分FrAbE.部分B(2.54g)依次经 SephadexLH一20柱色谱,甲醇洗脱,以及硅胶H柱 色谱,氯仿一甲醇,石油醚一丙酮等系统洗脱,分别得到 化合物?(5rag),V(7rag),V1(10rag),?(7rag). 部分D(3.49g)依次经SephadexLH一20柱色谱,甲 醇洗脱和硅胶H柱色谱,氯仿一甲醇系统洗脱,分别 得到化合物I(5rag),?(5mg),?(6mg). 2结构鉴定 化合物I:白色粉末,易溶于氯仿,甲醇, [0【]+30.0.(c0.90,CHC13);ESI—TOFMSm/z: 281EM+Na],HR—FABMS确定其分子式为 CH6O(测定值259.1902[M+H],计算值 259.1903).红外光谱显示有羟基存在.H—NMR (CDC1.,500MHz)谱显示有5个甲基质子信号 1.37(3H,d,J一6.3Hz,H一10),1.14(3H,s,H一11), 0.96(3H,s,H一12),1.31(3H,s,H一13),3.36(3H,s, H一14);5.82(1H,d,J一17Hz,H一7),6.01(1H,dd. 一 17,6.3Hz,H一8)示有两个反式烯氢质子存在. ?C—NMR(CDC1.,125MHz)谱中可见14个碳信 号,其中2个s声杂化碳信号124.3(C一7),139.1 (C一8),5个甲基碳信号23.9(C一10),25.6(C一11), 27.4(C一12),28.7(C一13),54.9(CH3O一6),4个连氧 s户.杂化碳信号64.7(C一3),78.2(C一5),83.0(C一 6),69.6(C一9).由H一HCOSY谱显示6.01(H一8) 和4.44(H一9)相关,4.44(H一9)又与1.37(H一10)相 关;HMBC谱(图1)显示6.01(H一8)与83.0(C一 6),124.3(H一7),69.6(C一9),23.9(C一10);5.82 (H-7)与78.2(C一5),83.0(C一6),69.6(C一9)存在远 程相关;2个甲基单峰0.96(H一12)和1.14(C一11) 均与41.9(C一1),45.4(C一2),83.0(C一6)存在远程相 关,并且这2个甲基单峰分别与甲基碳信号25.6 (C一11),27.4(C一12)存在远程相关;1.51(H一2)与 41.9(C一1),46.1(C一4),64.7(C一3),83.0(C一6)存在 远程相关;1.51(H一2),1.78(2H,m,H一4)与64.7 (C一3)存在远程相关;1.80(H一4),1.31(H一13)与 78.2(C一5)存在远程相关;1.31(H一13)与46.1(C一 4),78.2(C一5),83.0(C一6)存在远程相关.经与文献 数据_1]对照,化合物I与megastigmane相似,不同 之处在于”C—NMR377.3季碳信号被83.0季碳 信号取代,H—NMR和C—NMR谱中多出一个一 CH3O信号(3.36,3H,s;54.9);在HMBC谱中 3.36甲氧基质子只与83.0(C一6)相关.综合上述 分析推断化合物I结构为3R,5S,6S,7E,9S一3, 5,9-trihydroxy一6一methoxy一7一megastigmane. 图1化合物I的HMBC相关图 Fig?1KeyHMBCcorrelationsofcompoundI 另外,侧链上H一9化学位移为4.44,与文献 比较_1,可确定9位构型是.在NOESY谱上, 3.36(3H,s,H一14)和0.96(3H,s,H一12),1.31(3H, s,H一13),4.10(H一3)和1.14(3H,s,H一11)相关, 可确定3,5,6位的相对构型.5.82(H一7),6.01 (H一8)分别与0.96(3H,s,H一12),1.I4(3H,s,H一 11)相关,如图2所示,这只有在其构型为3R,5S, 6时才能实现(此时H一7,H一8所在平面与11,l2 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月?1449? 位甲基所在平面几乎平行),最后确定化合物I为 3R,5S,6S,7E,9S一3,5,9-trihydroxy一6一methoxy一7一 megastigmane,为一新化合物,命名为野鸦椿素B, 结构式见图3. H 图2化合物I的NOESY的相关图 Fig.2KeyNOESYcorrelationofcompound1 化合物?:白色粉末,易溶于氯仿’[a]+26.o. (co.70,cHC1), ESI—TOFMS/z: 238lM+NH4l..,243 rM+Na],H— NMR及C—NMR见 1,理化性质与波 谱数据与文献对照一 致[1,化合物?鉴定 为布卢门醇A. II12OH l3 图3化合物I的化学结构式 Fig.3Chemicalstructure ofcompound1 0 化合物?:白色粉末,易溶于甲醇,[a]一25.7. (c1.32,CHC13),ESI—TOFMS:262[M+ NH],267EM+Na];H—NMR及C—NMR数据 一 见表1,理化性质与波谱数据与文献对照一致[1,化 合物?鉴定为野鸦椿素A(3R,5S,6R,7E,9S一3, 5,6,9-tetrahydroxy一7一megastigmane). 表1化合物I,?的H—NMR和”C—NMR光谱数据(I,?在CDCI3中,?在DMSO—d6中) Table1H-NMRand”C-NMRDataofcompounds1一?(1and?inCDCI”?inDMSO—d6) 化合物?:白色固体,易溶于氯仿,ESI—TOFMS /:331EM+H],353EM+Na];H—NMR(CD— C13,500MHz):3.69(1H,m,H一12),6.98(1H,brs, H一16),0.90(3H,s,H一18),1.06(3H,s,H一19),2.38 (3H,s,H一21);C—NMR(CDC1,125MHz):38.1 (t,C一1),38.1(t,C一2),211.7(s,C一3),44.5(t,C一 4),46.6(d,C一5),30.9(t,C一6),28.7(t,C一7),32.5 (d,C一8),52.6(d,C一9),35.8(s,C一10),29.4(t,C一 11),73.4(d,C,12),52.1(s,C一13),53.8(d,C一14), 32.2(t,C一15),149.2(d,C一16),155.3(s,C一17), 11.3(q,C一18),11.8(q,C一19),199.1(s,C一20),26.8 (q,C一21).以上理化性质与波谱数据与文献对照一 致口引,化合物?鉴定为12B一羟基一5a一孕烷一16一烯一3, 20一二酮. 化合物V:白色固体,易溶于氯仿,ESI—TOFMS /:329EM+H-I,351EM+Na-]:H—NMR(CD— C13,500MHz):5.77(1H,brs,H一14),3.71(1H, dd,J一10.5,5.0Hz,H一12),7.00(1H,s,H一16), 0.94(3H,s,H一18),1.25(3H,s,H一19),2.41(3H,s, H一21);C—NMR(CDC1,125MHz):35.5(t,C一 1),33.9(t,C一2),198.9(s,C一3),124.3(d,C一4), 169.9(s,C一5),32.6(t,C一6),31.1(t,C一7),32.7(d, C一8),52.5(d,C一9),38.5(s,C一10),28.9(t,C一11), 73.3(d,C一12),51.9(s,C一13),53.3(d,C一14),32.1 (t,C一15),149.4(d,C一16),155.2(s,C一17),11.3(0, C一18),17.1(q,C一19),199.3(s,C一20),26.7(q,C一 21).以上理化性质与波谱数据与文献对照一致[1,化 合物V鉴定为12B一羟基一孕烷一4,16一二烯一3,20一二酮. ?1450?中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月 化合物?:白色固体,易溶于氯仿,ESI—TOFMS m/z:333[M+HI..,355[M+Na];H,NMR(CD— C1,500MHz):3.61(1H,rfl,H一3),3.66(1H,rfl, H一12),6.98(1H,brs,H一16),0.88(3H,s,H一18), 0.86(3H,s,H一19),2.39(3H,s,H一21).”C—NMR (CDC1,125MHz):36.7(t,C一1),31.5(t,C一2), 71.2(t,C一3),38.0(t,C一4),44.9(d,C一5),28.5(t, C一6),31.3(t,C一7),32.6(d,C一8),53.2(d,C一9), 35.6(s,C一10),29.3(t,C一11),73.7(d,C一12),52.1 (s,C一13),54.1(d,C一14),32.2(t,C一15),149.8(d, C一16),155.5(s,C一17),11.7(q,C一18),12.1(q,C一 19),199.0(s,C一20),26.7(q,C一21).根据H—NMR, ?C—NMR和2D—NMR以及参考文献数据[1,推断 化合物?为3B,12p一二羟基一孕烷一16一烯一20一酮. 化合物?:白色固体,易溶于氯仿,ESI—TOFMS m/z:333[M+HI,355[M+Na];H—NMR(CD— C1.,500MHz):4.08(1H,171,H一3),3.67(1H,ITI, H一12),6.99(1H,brs,H一16),0.88(3H,s,H一18), 0.84(3H,s,H一19),2.39(3H,s,H一21).”C—NMR (CDC1,125MHz):35.7(t,C一1),29.1(t,C一2), 66.5(d,C一3),31.9(t,C一4),39.2(d,C,5),28.3(t, C一6),31.3(t,C一7),32.6(d,C一8),53.2(d,C一9), 36.2(s,C一10),29.4(t,C一11),73.7(d,C一12),52.1 (s,C一13),54.1(d,C一14),32.1(t,C一15),149.9(d, C一16),155.5(s,C一17),11.0(q,C一18),11.7(q,C一 19),199.1(s,C一20),26.7(q,C一21).与化合物?对 照,?C—NMR谱C一3信号从71.2位移至66.5, 其他数据基本一致,所以确定化合物?为3a,12B一二 羟基一孕烷一16一烯一20一酮. 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