【doc】 液基细胞学检查联合HPV

【doc】 液基细胞学检查联合HPV 液基细胞学检查联合HPV 广西医科 IIc 学 VET 报 Y 2005Oct;22(5)JOURNAIOFGUANGXEDAUNIVERSITYIMICI? 711? 液基细胞学检查联合HPVDNA检测筛查宫颈癌的应用研究 韦红卫黄卫彤罗小琼吴惠珍 (广西右江民族医学院附属医院百色533000) 摘要目的:探讨液基细胞学检查(TCT)联合HPVDNAPCR检测在宫颈癌筛查中的应用价值.方法:552例病人同时行 TCT,PCR荧光法检测HPVDNA和宫颈活检组织学检查,以病理组织学诊断为金,比较TCT对宫颈异常细胞的检出率; 比较TCT和PCR荧光法两种方法X,~HPV感染的检出率.结果:TCT诊断宫颈异常细胞阳性率为21.74,与组织学诊断阳性 率(24.82)比差异无统计学意义(P>O.05);以组织学诊断为标准,TCT总的诊断符合率为87.6.PCR荧光法检测HPV DNA总检出率为21.O2,组织学阳性病例检出率7O.8O,组织学阴性病例检出率4.58,均显着高于TCT的13.77, 55.48和0,差异有统计学意义(均P<O.001).HPV的感染率在组织学阳性者高于组织学阴性者,差异有统计学意义(P< 0.001).结论:TCT联合HPVDNAPCR检测,能最大程度地发现宫颈异常细胞并及时发现宫颈癌的诱因. 关键词宫颈肿瘤;筛查;液基细胞学检查;HPVDNA 中国图书资料分类法分类号R737.6 宫颈癌发病率居全球女性恶性肿瘤的第二位,每年约有 5O万新发病例,其中8O在发展中国家,我国每年约有新发 病例13.15万,占世界新发病例的28.8,而且近年来宫颈癌 的发病年龄趋于年轻化,从原来的4O,50岁提前到35岁左 右],这使宫颈癌的预防和筛查形势十分严峻,人们也对传 统的筛查方法提出了质疑,近年来相继推出了一些新的筛查 方法,其中最受到关注和推崇的是液基细胞学检查 (ThinprepCytologicTest,TCT).本文就TCT联合HPV DNA检测在宫颈癌筛查中的应用价值作一研究,报道如下. 1资料与方法 1.1研究对象:选择2003年1,8月在妇科门诊就诊的慢性 宫颈炎或阴道异常出血,流液的患者552例为研究对象,所有 研究对象均为已婚妇女,无子宫颈锥形切除或子宫切除病 史,无盆腔放射治疗史,年龄23,65岁,平均35.6岁. 1.2研究方法:每例病人同时行宫颈TCT检查,HPVDNA 检测(PCR荧光法)及宫颈活检组织学检查.以组织学诊断为 金标准,比较TCT对宫颈异常细胞的检出率;比较TCT和 PCR荧光法两种方法对HPV感染的检出率. 1.3标本采集及处理 1.3.1TCT检查:用特制的宫颈塑料软毛刷伸入宫颈管 内,旋转刷取宫颈管及宫颈外口的脱落细胞,将毛刷洗入盛 有Thinprep细胞保存液的小瓶中,然后将保存液标本经 Thinprep2000系统处理,将标本中的上皮细胞与黏液,血液 及炎细胞分离,经高精密度滤器过滤后转载到玻片上,制成 直径2cm的薄层细胞涂片,95酒精固定,巴氏染色,镜检. 1.3.2HPVDNA检测:将剩余的Thinprep保存液中的标 本离心,取沉淀物,用PCR荧光法检测HPVDNA,试剂为华 收稿日期:2005—04—01 泰生物实业有限公司生产的HPVDNAPCR诊断试剂 盒,仪器为FX一900荧光定量检测仪. 1.3.3组织学检查:用阴道镜观察宫颈情况,于镜下病变区 用活检钳钳取少量宫颈组织送组织学检查. 1.4诊断标准 1.4.1TCT诊断:采用TBS(theBethesdasystem)分级系 统],包括两方面诊断:一是对异常细胞的诊断,即根据细胞 异型性的严重程度依次诊断为正常范围(WNL),意义不明 的不典型鳞状细胞(ASCUS),低度鳞状上皮内病变(LSII), 高度鳞状上皮内病变(HSIL)和鳞状细胞癌(SCC),阳性诊断 包括LSIL,HSIL和SCC;二是对HPV感染的诊断,诊断依据 是出现核周空穴细胞,角化不良细胞和湿疣外底层细胞. 1.4.2组织学诊断:根据细胞异型性的程度和范围依次分 为良性细胞改变(BCC),宫颈上皮内瘤变(CIN,CINz,CIN.) 和鳞状细胞癌(SCC).组织学阳性诊断包括CIN,CINz,CIN. 和SCC. 1.5统计学处理:计数资料显着性检验采用X检验. 2结果 2.1TCT对异常细胞的诊断情况:TCT诊断阳性12O例, 阳性率21.74,组织学诊断阳性率24.82(137/552),两者 比较差异无统计学意义(x一1.63,P>O.05).以组织学诊 断为标准,TCT对各级异常细胞的诊断符合率分别为:SCC 100(5/5),HSII93.33(70/75)和LSIL78.95 (45/57),总的诊断符合率为87.6(120/137),见表1. 2.2两种方法检测HPV的比较:TCT和PCR两种方法检 测HPV的结果见表2.PCR荧光法检测HPVDNA总检出率 和组织学阳性病例检出率均显着高于TCT,差异有统计学意 义(Pd0.01).其中TCT检出HPV感染的76例均为组织学 阳性病例,而PCR荧光法在组织学阴性的415例中检出19例 ?712?广西医科大学2005Oct;22(5) 有HPV感染(4.58),组织学阳性者HPV的感染率 (70.80)高于组织学阴性者,差异有统计学意义(X一 272.15,P<0.001). 表1液基细胞学诊断与组织学诊断阳性病例对比 表2两种方法HPV检出率的比较[()] 注:与TCT法比较,X=10.09,Pd0.01;’X一6.92, P<0.01 3讨论 3.1TCT对宫颈癌筛查的价值:TCT是1996年由美国食 品与药物管理局(FDA)批准并开始应用,1998年引人我国, 应用其筛查宫颈癌的优越性已得到很多研究的证实,与传统 方法巴氏细胞学比较.TCT能显着提高涂片满意率和宫颈 异常细胞的检出率_3].本组资料显示TCT总的阳性检出率为 21.74,与组织学诊断差异无统计学意义(P>0.05);TCT 总的诊断符合率为87.6,对宫颈各级病变的诊断符合率 SCC为100,HSII为93.33和LSIL为78.95,提示TCT 虽然不能代替组织学确诊,但作为筛查手段其能最大程度发 现异常细胞并进行病变分类,诊断的敏感性高,更适用于宫 颈癌的筛查和宫颈病变治疗后的随访. 3.2HPV检测对预防宫颈癌的价值:目前已公认HPV感染 是宫颈癌发病最主要的危险因素,全世界95的宫颈癌标本 中都能发现HPVE.Park等?5用HPV基因芯片检测正常宫 颈组织,LSIL,HSII和宫颈浸润癌组织中的HPV,结果4种 病变中HPV感染率分别为】7.6,73.5,92.2,95.2. Lee等进一步研究了多重HPV感染与宫颈癌的关系,结果 发现单一HPV感染使宫颈癌的患病风险增加l9.9倍,而多 重HPV感染使该风险增加到31.8倍.甚至有研究证明可通 过检测HPV判断转移癌是来自宫颈癌还是来自其它部位的 肿瘤?7].本组资料用PCR荧光法仅检测一个亚型(HPV16), 结果组织学阳性者的感染率是7O.8O,如果检测多种亚型, 则HPV感染率将更高;而组织学阴性者HPV的感染率仅为 4.58,差异有统计学意义. 3.3TCT联合HPVDNA检测在宫颈癌筛查中的价值: HPV的诊断方法可通过细胞学检查或病毒学检测.本组资 料显示TCT诊断HPV感染的76例全部为组织学阳性者,而 组织学阴性者用PCR荧光法可检测出4.58有HPV感染, 说明了TCTXCHPV感染的诊断率不高,不能做到早期诊断. 而PCR荧光法诊断的敏感性高,特异性强,并且采用TCT标 本进行检测,避免了患者须取多份标本的麻烦和标本间的误 差,适用于HPV感染任何时期的诊断,因此我们建议在宫颈 癌筛查时应联合TCT和HPVDNAPCR检测,即除了TCT 外应将HPV检测作为宫颈癌筛查的常规必查内容,这样能 最大程度地发现宫颈异常细胞的同时及时发现宫颈癌的诱 因,即使细胞学检查阴性但只要HPV阳性,也应积极治疗并 严密随访,尽可能消除诱因,从而降低宫颈癌的发病率,达到 更有效防治宫颈癌的目的,值得在临床广泛推广应用. 参考文献 l卞继峰,于修平.人乳头瘤病毒致癌机制的研究进展.中 国病毒学杂志,2004,l9(5):531-534. 2刘树范.宫颈细胞病理告方式(2001年TBS术语学) 及诊断标准.癌症进展杂志,2004,2(1):64—69. 3刘军,罗淑贞,卢义生,等.液基细胞学应用于宫颈癌筛 查的研究.中国实用妇科与产科杂志,2004,20(9):553— 554. 4王远菊,张洪文.TGF—p与HPV及宫颈癌的关系.中国误 诊学杂志,2005,5(1):33—35. 5ParkTC,KimCJ,KohYM,eta1.Human papillomavirusgenotypingbytheDNAchipinthe cervicalneoplasia.DNACellBiol,2004,23(2):119—125. 6LeeSA,KangD,SeoSS,eta1.MultipleHPVinfectionin cervicalcancerscreenedbyHPVDNAchip.Cancer Lett,2003,198(2):187—192. 7PlazaJA,RamirezNC,NUOVOGJ.UtilityofHPV analysisforevaluationofpossiblemetastaticdiseasein womenwithcervicalcancer.IntJGynecolPathol,2004, 23(1):7-12.