黄荆叶提取液抑菌作用的研究

《中国食品添加剂》 China Food Additives 20o2 No．3 黄荆叶提取液抑菌作用的研究 吕源玲 王洪新 (江南大学食品学院，无锡 214036) 摘要：用黄荆叶的乙醇提取物对6种细菌、2种酵母菌、3种霉菌三大类微生物进行抑菌实验，得出其最低抑 菌浓度(MIC)。由结果推断出黄荆叶提取物不失为一种良好的天然抗菌剂，可添加于食品和药物中。 关键词：黄荆，抑菌作用 Research on Bacte riOstasis of the Extract of Vitex Negundo L．Leaves Lu Yuanling．W ang nongxln (Food College，Jiangnan University，Wuxi 214036) Abs *t：The MIC of the ethanol extract。f the leaves of Vit~r L．was obtained by operating on thlree types of mi— croorganismswhichincluding 6 kindsof gem ．2 kindsof yeasts and 3 kinds ofmolds Accordingtothe results，itwas deduced that the extract oftheleaves 0f Vit~a-negut~loL．can be used asnaturalbacteriostatic age[tts andbe added in tofoodandmed ieine Key w0 b：Vitex negundo L ．Bacteriostas[s 0 引言 黄荆别名黄荆条、黄荆子、布荆、荆条、五指风、 五指柑，为马鞭草科牡荆属植物黄荆(ViteJ：n — gundoL．)。它是落叶灌木或小乔木，广泛分布于 我国长江流域及南部各省区 山东亦有分布 黄荆子、叶、枝及根人药。黄荆具有止咳、祛痰及缓 解支气管痉挛的作用，主治感冒、咳嗽，哮喘，风痹、 疟疾、胃痛、疝气、痔漏。黄荆叶清热解表、利湿解 毒，主治感冒、中暑、吐泻、痢疾、黄疸、风湿、跌打肿 痛、疮痛疥癣，并能防止甲醛性关节炎肿胀的发 展_2J。黄荆子、黄荆根煎剂对金黄色葡萄球菌和 卡他球菌均有抑制作用_1-。 黄荆籽的提取物抗氧化成分及其抗氧化作用 已研究得比较深入 ，但其叶提取物的抑菌研 究未见报道 本文初步研究了黄荆提取液对与人 24 们日常生活有密切关系的三大微生物是否有抑制 作用，确定出黄荆对它们的最低抑菌浓度(MIc)， 为开拓黄荆的应用找到理论依据。 1 实验材料 1．1 主要仪器与设备 101—0型电热鼓风干燥箱，上海沪南科学仪 器联营厂； PW一30精密培养箱，中国制造； 722型可见分光光度计，上海分析仪器总厂； JPT一型架盘天平，上海衡器厂。 1．2 主要药品 95％乙醇(上海振兴化工一厂出品) 营养琼脂(江苏省宜兴市万石培养基厂出品) 1．3 菌种 细菌：金黄色葡萄球菌(Staphyl~occus m‘s)、 维普资讯 http://www.cqvip.com 《中国食品添加剂》 China Food Additives 2002 No．3 白色葡萄球菌(Staphylococcus cremoris)、四联球菌 (Tetracoccus)、枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtitis)、 大肠杆菌(Escherichia cdi)、沙门氏菌(Salmonella typhi) 霉菌：根霉(Rhizolms)、毛霉(Mucor)、青霉 (Penicittium) 酵母菌：热带假丝酵母 (Candidautifites)、酿 酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) 以上菌种由无锡轻工大学食品学院和生物工 程学院提供。 1．4 培养基 营养琼脂培养基：供培养各种细菌 蔗糖马铃薯培养基：供培养各种霉菌、酵母菌 2 实验方法 2．1 黄荆叶提取液的制备 称取阴干黄荆枝叶 80g，揉碎，加人 50％乙醇 8Oral，在 9o'c水浴锅里回流浸提 2hT，再浸泡 3hT， 用布氏漏斗抽滤 ，充分洗涤后得滤液 80Oral。将滤 液真空浓缩(65℃，0．08MPa)得 218ml浓缩液。 用移液管吸取lOml浓缩液于恒重培养皿，在干 燥箱内100 C烘6hr，称量，算出其净重为1．Olg，固形 物含量为0．1Olg／ml。 2．2 供试菌株的制备 将所有供测试的菌种移接人相对应的试管斜 面培养基上，每种接多支重复。细菌置于37"恒温 培养箱内培养 24hr，霉菌、酵母菌于 28。c培养 48hr。每种菌取 2支供测试用，其余置 0～4 C冷 藏备用。 2．3 培养基的配制及制备平板 取浓缩液与培养基于250ml三角瓶配成不同 浓度黄荆液培养基(见表一、表二)，经 121 C高压 蒸汽灭菌30min后，冷却至5O～60 C，无菌操作用 移液管快速吸取15ml于各培养皿 制备够充足数 量备用 表一 不同浓度黄荆液培养基的配制(供培养细菌 维普资讯 http://www.cqvip.com 《中国食品添加剂》 China Food Additives 2o02 N0．3 500rat，PH自然。 2．4 菌悬液的制备 用接种环挑取一环菌体或孢子放入装有玻璃珠的50ml生理盐水里，充分振摇 10rain，制成菌体悬液 或孢子悬液备用 2．5 抑菌实验 用lml移液管吸取各菌悬液0．2ml于不同浓度的培养基中，用无菌三角涂布棒涂布均匀，待于后倒置 于恒温培养箱中培养(细菌，37。C，24hr；霉菌、酵母菌28 C，48hr)，然后观察培养结果。 3 培养结果与讨论 根据黄荆叶提取物的培养基浓度从高到低，不断摸索，得出黄荆最低抑菌浓度测定结果(见表三)。 表三 确定黄荆叶提取物最低抑制浓度测定结果 0 0 04 0．06 0 08 0 10 0 l4 0 18 0 20 0 22 0 24 0 29 0 30 苗 种 ＼＼ 白色葡萄球菌 + + ++ 一 一 一 一 一 枯草芽孢杆菌 + + + ++ 一+ 十十 ++ ++ 一 一 一 四联球菌 +++ +++ +++ ++ +++ +++ +++ ++ + 一 一 一 金黄色葡萄球菌 +++ +++ +++ ++十 +++ ++十 +++ ++ 十 一 一 沙门氏苗 十++ +++ +++ 一+ +++ ++ ++ + + + 一 大肠杆菌 t++ +++ ++ +++ +++ +++ +++ ++ + + + 一 热带假丝酵母 +++ ++十 十++ +十+ +++ +++ 十++ +++ +++ ++十 十十+ +++ 酿酒酵母 +++ +++ 十十+ +十+ +++ +十十 +++ +++ +++ ++十 十十+ +++ 青霉 一++ 十+十 ++ +++ +++ +十十 +++ +++ +十+ +++ +十+ +++ 根霉 +++ +++ ++ +++ +++ +++ 十++ ++十 +++ +++ 十++ +十+ 毛霉 +++ +++ +++ +十+ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ 一 表示培养基上无苗；“+”培养基上有菌 实验结果表明，在这三大类微生物中，黄荆叶 提取物的浓缩液对细菌的抑制效果很明显，而对霉 菌、酵母菌无抑制效果。被抑制的细菌中既有革兰 氏阳性菌也有革兰氏阴性菌；既有球菌也有杆菌， 说明黄荆叶提取物对细菌有广泛抑制作用。对 6 种细菌的最低抑制浓度为：白色葡萄球菌0．06％， 枯草芽孢杆菌0．20％，金黄色葡萄球菌0．24％，四 联球菌 0．24％，沙 门氏菌 0．29％，大肠杆 菌 0． 3O％。如食品中含有金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、 大肠杆菌会引起食物中毒。其主要症状为呕吐、腹 泻、腹痛，中毒严重，可引起死亡_5一。 综上所述，黄荆叶提取液不失为一种理想的抗 菌抑菌添加剂。本室将进一步研究其抑菌有效成 分及其药理毒理作用。 参考文献 1．《全国中草药汇编》编写组编 全国中草药汇编(上)人民卫 生出版社，l975，767～768 2．陈振峰．李月华，陈新露 黄荆挥发油化学成分的研究．西北 植物学报，1999，19(2)：354-356 3．郑公铭．罗宗锗，陈遮美 黄荆籽抗氧化成分研究 广东工业 大学学报，1999，16(2)：41～46 4．郑公钻，罗宗钻 黄荆籽抗氧化作用研究 食品科学，1999． 20(3)21～23 5．项琦主编 粮油食品散生物学检验 北京 ：中国轻工业出版 社 1992，儿5～118 维普资讯 http://www.cqvip.com