脂肪酸聚甘油酯的分析

108 2002．1 'j 23． 0．， 置嗣■学 ※检验 固体脂分离，分S~JiJs,U定其熔点，结果列于表 1。 从表 l中可以看出，分层后．上层与下层的油脂熔 点有着较大差别．对 33'E棕榈油来说．差别更大，可相 差 8'E左右；棕榈硬脂在室温下全部凝固，但是内部油 脂的组成也并不均匀，造成同一器内不同部位的油脂熔 点也各不相同。毛细管法测定熔点仅需要微量油脂，这 就要求实验试样要有足够的代表性．否则，结果会因为 取样部位的不同而不同，所测得的熔点缺乏准确性。 2．2 去除油中的杂质 熔化后的棕榈油必须经干燥 滤纸以去除油中的微量水分和杂质，因为油中微量杂 质的存在会使熔点降低，过滤时应注意保温，以免油 脂凝固，使得熔点较高的样品被留在滤纸上面，这样 得到的滤后样品熔点偏低。 2．3 赶气泡 将滤后样品置于烘箱内 10rain，赶走 油中气泡，如果空气进人毛细管中，会影响到结果的 准确性 3 毛细管的制备 3．1 将蘸入油脂的毛细管迅速置于冰上冷却，以免 毛细管内漏进空气 ．放在冰上冷却时，勿将蘸有油脂 的一端接触冰面，以免冰上熔化 的微量水渗入毛细 管，影响熔点结果的判定 3．2 油脂固化后，要擦干净毛细管表面的油脂，因为 油脂本身的导热性差 ，毛细管外壁残留的油脂影响熔 点的观察、会使传热效果差而引起结果偏高。 4 固化的条件 4-．1 固化的温度 冷却的温度一般设在 4～10℃ ， 这是让熔化的棕榈油脂冷却到熔点以下，形成不稳定 的过饱和状态，在此情况下，油脂内部先形成晶核，然 后结晶成长并稳定 ，固化的温度过低 ，过冷状态过头， 由于同时形成的晶核很多，容易产生细微、无定形的 结晶，使整个体系的粘度变大，晶体不容易成长，不容 易形成稳定的结晶．会影响结果的准确性。 4．2 固化的时间 一般设为 16h，因为甘油三酯在 低温时分子反应很慢，结晶过程也慢，如果凝固时间 不足形成的晶体不稳定，所测熔点不易再现。 5 测定过程中的细节问题 5．1 毛细管的固定位置 用橡皮筋固定毛细管时，将 毛细管蘸有油脂的一端紧贴温度计水银球的下端，使温 度计显示的温度尽可能接近毛细管内油脂的温度。 5 2 升温速率的控制 先调节浴液的起始温度至试 样预计熔点以下8～1 ，用搅拌器缓缓搅拌，以使温度 均匀。加热温度开始时为每分钟 1℃，将临熔点时，减缓 为每分钟上升 0．5'E。升温速率太快，温度计显示的温度 比毛细管内油脂的温度高，会使最终熔点结果偏高。 棕榈油熔点的检测看似简单，但它的成分组成较 复杂，并且还具有多晶型及导热性差等特点，要求测 试熔点的条件十分严格，因此从实验的选择、样 品的制备 、毛细管的制备、固化条件的选择到最终的 熔点测定，每一步都要认真按照规定慎重操作 参考文献 1 AOCSCC 3～25标准 2 马来西亚棕榈油研究协会 ．熔点的测定 ．PORIM测试方法 11 2～ 11 3 3 雕鸿荪 食用油脂(上)无锡轻工业学院 ． 4 于学军，李荣启 劣变棕榈油精制再生技术 中国油脂， 2000，6：86—88 脂肪酸聚甘油酯的分析 杨继生 张俊桂 扬州大学化学化工系 徐逸云 扬州进出口商品检验局 倪永全 无锡轻工大学化工系 摘 要 采用 MS、HPLC—MS联用法对脂肪酸聚甘油酯样品进行测定。通过直接进样 APCI质谱分析，来确定样品组 分：根据有关选择离子对样品中各酯的相对含量进行分析。 关键词 质谱 高效液相色谱一质谱联用法 脂肪酸聚甘油酯 维普资讯 http://www.cqvip.com ※分析检验 曩日曩学 2002，Vot．23，NO．j 109 Al：~tl'aat MS and HPLC—MS techniques are applied in the determination ofpolyglycerol fatty acid ester．The c0m— ponent of polyglyeerol ester cat1 be analyzed by injecting sample directly in the APCI mass spectrometry．Esters in polyglycerol esters offatty acids ca probably be quantified respectively by selective ion diagram． KeT~ords Mass@eetra Hi曲performancel(quidehronmtography—massspectrometry Polyglyeetolfattyacid ester 聚甘油脂肪酸酯作为一类重要的食品乳化剂， 已被应用多年。与其它食品乳化剂相比，其具有更 优越的性质I I：完全无毒，能被人体新陈代谢，被消 化程度与天然脂肪酸基本相同，耐热性、粘性比其 它多元醇系脂肪酸酯高等。故近来它们再一次受到 人们的青睐” ，除食品行业外，它们现已在日化、医 药、纺织、洗涤剂、粘合剂等众多领域内拓展其应 用范围。 为比较它们的乳化性能，需对这类乳化剂组成 进行分析。但由于甘油聚台度和聚合方式的不同， 脂肪酸的种类不同，聚甘油被酯化的程度与位置的 不同，使得对这类物质的分析难 令人满意。据文 献 报道，薄层色谱、气相色谱和毛细管色谱(采用 三甲基硅烷衍生化)等方法用来分析脂肪酸酯聚甘 油，但是方法繁琐费时，复杂，且未能很好地将混 合物分离。本研究中我们采用 HPLC—MS对该类乳 化剂的组成进行分析。 1 实验部分 1．1 主要试剂与仪器 异丙醇，正己烷，化学纯；甲醇．色谱纯；乙 醇，优级纯；高纯棕榈酸聚甘油酯，高纯油酸聚甘 油酯 自制。 高效液相色谱仪器 ：Platform LCZ2000，具二极 管阵列检测器 ；分析柱 ：Bondapak NH 柱 ，3．9× 300mm；质谱仪：Platform LCZ4000；均为 Waters公 司出品。 1．2 实验方法 1．2．1 样品处理 称取适量聚甘油酯样品，溶于无水甲醇中，配 制成万分之一浓度的溶液，用于直接进样，进行 MS 分析 样品用异丙醇溶解配成 1％左右的溶液 ，经 0．45txm的滤膜过滤后 ，置于 自动进样室 ，进行 HPLC—MS分析。 1．2 2 测试条件 质 谱 条 件 ：离 子 源 ： APCI：电 离 电 压 ： 3．41KV；第一级锥孔 电压 ：29V；第二级锥孔 电 压 ：5V；源温：120℃；探头温度 ：500~C；倍增器 电压：650V；真空度：2．6×10。mBar；氮气流量： 3．5L／h； 色谱条件 ：分析柱 ：NH。柱(3．9×300ram， 10ttm)(Waters)；柱温：50 ；进样量：201．tI；流动 相 ：正己烷 ：异丙醇：甲醇 =99：1：0(0min)一 99： 1：0{5minj—+85：1O： 5【30min) 85： 1O： 5 (40min)，2ml／min；检测波长：200～300nm；液相 色谱的流出组分经一不锈钢三通对进入质谱部分进 行分流 使进入质谱的流速为 10txv／min。 2 结果与讨论 2．1 脂肪酸聚甘油酯的MS分析 高纯棕榈酸聚甘油酯的 AP+谱图见图 1，高纯 油酸聚甘油酯的AP+谱图见图2。 m 瑚 ⋯ ⋯ 03 1 m 0 1晰 图1 高纯棕榈酸聚甘油酯的AP+图 图2 高纯油醴聚甘油醇的AP+图 维普资讯 http://www.cqvip.com l10 2002．¨ ，2． ．M ． 曩品曩学 ※分析检验 产 】 2 n 邋 ， 熊 3 ：： 釜 墨 = ． =；兰 ．， 图3 棕榈酿聚甘油酯a，液相色谱紫外检捌图；hAP+总离子 流图 c，AP一总离子流图； 对图 i、图2分析可得：虽然棕搁酸聚甘油酯及 油酸聚甘油酯合成时 ，原料脂肪酸与聚甘油的摩尔 比为 1．5：1，但是产物中除单酯外，还有二酯和三 酯。另外，原料聚甘油的聚合度 n为2．67(羟值测定 法 )，但产物中存在甘油酯、二聚甘油酯、三聚甘 油酯、四聚甘油酯、五聚甘油酯等高聚甘油酯。该 体系中大约有 30～4o种相对分子质量的物质 相同 台成条件制得的饱和与不饱和脂肪酸的聚甘油酯， 其酯化产物的组成大致相似。 聚甘油脂肪酸是一个组成复杂的体系，随着脂 肪酸种类、甘油聚合度和酯化度的增加，体系将会 变得更为复杂。 在谱图中，根据离子响应信号的强弱来判断体 系中相关组分的分布，有一定的参考价值。在该质 谱条件下，测得的单、双、三酯的峰高与其相对含 量的高低有一定的联系，如通过 HPLC—MS分析(见 后)可知，该样品中单酯含量较二酯或三酯要高，质 谱图中，各酯的峰高呈现同样的趋势。 笔者认为，可用该法对同类物质的不同样品问 有关组分相对含量的高低进行分析。对组成复杂， 无其它有效分析手段的样品，该法不失为一种快速 有效的分析手段 2．2 脂肪酸聚甘油酯的 HPLC—MS分析 棕榈酸、油酸聚甘油酯液相色谱紫外检测图及 表 1 样品中各酯的相对音量分析 ∞ ∞ 20~0 ，5∞ |D m 图4 油酿橐甘油醇a，液相色谱紫外检浊图．b，AP一总离子流 图 AP+总离子流图； 总离子流图分别见图 3，图4。棕榈酸、油酸聚甘油 圈5 棕榈摩醇选摔离子圈 维普资讯 http://www.cqvip.com ※分析检验 曩嗣曩学 2002．V ．23，No．1 l1I a，甘油单酯；b．二聚甘油单确；C．三聚甘油单带 - ~ l AP+ L一． 出：喾 1l ． L一．! f! 萃J l l U 8 翟 f R H AP~ n J ．J = ：： ．． ．．．一 竹ifIl二酯 b．二 t 南二酯； -C璇 油二酯 d，四聚竹浦二酯； 业 ，： l竺 塾 ．：：：： 油二确；h．一景甘油二醋； ．二聚甘油一确； d．田景甘油二酯； 图6 油酸醇选择离子图 酯的选择离子图如图5、图6所示。 由图 5、图6可见，在相同酯化度的聚甘油酯 中，随着甘油聚合度的增加，其保留时间延长。相 同聚合度的甘油酯出峰顺序总体是从三酯到二酯再 到单酯。 比较图 5、图 6可知，棕榈酸与油酸的相应的单 酯、双酯和三酯有着几乎相同的保留时间值。这说 明在该色谱条件下，脂肪酸链长的不同及双键的存 在，不影响保留时间，不改变分离结果。 从备选择离子图中明显看出，聚甘油酯随着甘 油聚合度的增加，酯化度的增大，峰的数目随之增 多，这也表明了相应异构体的数 目在增加。甘油的 聚合度、酯化度越高，异构体的数目越多，结构越 复杂 由于聚甘油酯样品的紫外吸收信号不强(见图 3a、图4a)，分析困难，笔者采用对备酯的选择离子 图进行峰面积归一化处理的方法来确定各类酯的相 对含量，结果如表 2所示，该分析的数据与文献 的 分析数据相近。 参考文献 1 松下和南、盐山浩 术IJ IJ七 IJ脂肪酸工z于， 油脂，1985 (4l：5 2 N．GaritandA Aserln PloyglycerolEstersComposition：Theo— retical Randow Distribution Versus HPLC Anal~is．JAOCS， 1982，59(7)：317 3 M R Sahasrabudhe Chromatographie Analysis of．eolygl，c— erolsandTheirFattyAcidEsters．JAOCS，1967，44(7j：376． 4 前田、芳仓．，’J七I J’／缩合物∞制造法 平0l一125338． 5 K．Ailzetmuller．Analysis ofPolyglycerols andotherP出olsfrom Emulsifiers byHPLC FetteSeifenAnstriehmit~1．1979，(】】j： 436 毛细管电泳法测定奶粉中的镉、铅和铜 袁道强 郑州轻工业学院食品与生物工程系 450002 摘 要 用毛细管区带电泳(CZE)法测定了奶粉中的镉、铅和铜，在 lOmmol／L苄胺 ．1Ommol／La一羟基乙酸．pH=4．0 的电泳介质中，3种离子在 12rain内得到了分离，用间接紫外吸收法在 214rim处进行检测， 外标法定量。对样品进行 5次测定，峰面积的RSD小于1 6％，回收率在97．8％～102．2％之间．方法简便、快速、灵敏度高、重现性好、测定成本 低 关键饲 毛细管区带电泳 间接紫外检测 镉 铅 铜 维普资讯 http://www.cqvip.com