温阳散郁法对小鼠H22肝癌细胞凋亡及增殖关系的实验研究

中医研究2008年9月第2l卷第9期TCMRes．September2008Vo!，21No．9 ·t1· 明显阻抑在G，期，GL能诱导肝癌细胞株BEL一 7321凋亡，并与GL裁鐾成歪耀关。缨胞麓亡与翳 瘤发病的关系为抗癌药物的研究提供了新的药理学 视裁襁薪靶点譬’。抗肿瘤药若麓大量诱发瘗细胞 的凋亡，激活其自发的程序性死亡过程，就可避免因 大量细胞坏死而释放胞内物质引趁的各种副作糟， 减轻化疗对正常缀织的擐佞，从丽戆长患者的生存 期。 GL对BEL一7321瓣瘤缨庭凝亡的影镌实验结 果明，GL对肿瘤细胞的凋亡有一定的促进作用。 有文献摄遘，GL爵增强，l、鼠NK绦脆的缓胞毒活 性，而NK细胞引起的觏细胞死亡是凋亡旧。，而本次 研究结果表明，GL也可能直接诱发肿瘤细胞凋亡。 GL能够诱导肝瘵缨胞BEL一7321凋亡，有直接抗 肿瘤的作用，可阻止肝癫细胞增殖，其与化疗药物相 毙，不良反趣小，易被患者接受，临床上霹望成力翳 癌治疗的薪手段。 参考文献： [1]ShawPC，ChanWL，YeungHW，eta1．Minireview：trichosan- thin—aproteinwithmultiplepharmacologicalproperties[J】．Life Sci，1994。55(4)：253—262． 【2】LeungKN，YeungHW，LeungSO。Theimmunomodulatory andantitumoractivityof trichosanthin-anabortifacient proteinisolatedfromTianwHua—Fen≤Tfiehosanrhes kirilowi)[J]．AsianPacJ AllergyImmunol，1986，4(2)： lll一120． C3]WongYF，WongWSF，ChenXG，eta1．Evaluationoftri— chosanthinagainstxenograftsofhumanchoriocarcinoma cells[J]．MedSeiRes，1990，18(1)：95—96． [4】MartinSJ，LennonSV，BonhamAM，elal，Inductionofap— optosis(programmedcelldeath)inhumanleukemicHL-60 cellsbyinhibitionofRNAorproteinsynthesis【J】．jlmmu— nol，1990，145(6)：1859-1867． 【5】Darzynkiewiczz。BrunoS，DelBinoG，etal。Featuresof apoptoticcellsmeasuredbyflowcytometry[J]．Cytometry， 1992，13(8)：795—808． [6]VauxDL， StrasserA．Themolecularbiologyof apoptosisCj】．ProcNatlAcadSciUSA，1996，93(6)： 2239．2244． 收稿酲麓：2008-02—29；修隧西麓：2008-06。23 (编辑陶妹) 文章编号：1001—6910(2008)09—0011—04 ·实验研究· 温阳散郁法对小鼠H22肝癌细胞凋亡及增殖关系的实验研究 郭勇义 (郑州市中医院，河南郑州450007) 摘要 目的：探讨《内经》“辩化气，阴成形”理论与细胞凋亡 之阚的掘应性，以为糖床运塌提供理论依据。：以申医 理论为指导，以H：：肝癌瘤株小鼠为研究对象，采用H：：小鼠 骏本瘸移植法建嫫，将75只昆明秘小鼠醚机分为模型对照、 温阳傲郁、阴阳双补、单纯温阳、单纯滋阴等5组，各组以相 应蘸耪灌霉，连续7d；第8天瑟瑟动戆取痿薅稳重，诗冀挣 瘤率；石蜡切片用免疫组化法测Bax蛋白、PCNA；采用原位 辕疆零糍标琵法测定凋亡舞德，缮塞凋亡摇数。结栗：④涅 阳散都组平均瘤重低于模型组；②经秩和检验，瀛阳散郁组 Bax黎霞蛋鑫表达鬻子模鳖经，蓑疑褰统诗学意义20％为阳 性显色。阳性显色按细胞着色的强度和范闱分： 20％～25％为弱阳性(十)，26％一50％为中等阳性 (++)，5l％一75％必强阳性(+++)。 1．8统计学方法 采建SPSS10．0统计分辑软{譬处理。呆耀双弱 检验，检验水准取d=0．05。正态分布数值的统计 播述采蔫均数热减

标准

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差；菲歪态分布瀚数值经变 量变换后再用均数加减标准差进行描述。参数估计 采用95％的CI。计量资料的假设检验采用r检验 和q检验；计数资料采用∥检验，等级资料采用秩 和检验。 2 结 粱 2．1’一般状况及生物行为的观察 模燮对照缰与温阳散郁组动物安静，反应灵敏。 万方数据 中熙研究2008年9月第21卷第9期TCMRes．September2008V01．21No．9 ·13· 皮亳委蹶、蠢光泽、紧贴飘肤，食饮正常；阴鼷双李}组 与温阳组动物安静，喜聚堆，反应迟缓，皮毛蓬松、有 光泽，食饮、饮水正常；滋阴维动物活动凌尚霹，喜聚 壤，反应欠灵敏，皮毛蓬松、无光泽，食饮、饮水减少。 2．2 温阳散郁法对H，，肝癌小鼠死亡率的影响 治疗后潺阳散郁组死亡率最低。觅表l。 表l 懑辩教稻法对辩：：翳薅，|、藏廷亡零静影骥 2．3 漫阳散郁法对H：：肝癌小鼠体质量的影响 药物治疗7d后，各组荷瘤鼠体重与模型对照 缝襁沈无统计学意义，掇恭肿瘤旱期治疗效暴与薄 瘸鼠淬燕增加无必然联缳。见表2。 裘2泓阳散郁法对H：：肝癌小鼠体质量的影响 (莺±s) 2。4 温阳散郁法对H：：肝癌小鼠瘤重及抑瘤率的 影响 温阳散郁维瘸重与摸黧对照缝跑较，差涮有统 计学意义(P<0．05)；而温阳组、滋阴组瘤麓增大， 其有助长趋势，提示温阳散郁组药物鳃显有擗瘤效 暴。戴结果掇示黜瘤早期不易单缝使用潼潮、滋躅 药物，应适当选用缴鄣药物；温阳散郁组药物明曼有 抑瘤效果。见表3。 袭3溢潮毅郁法慰H：：搿瘗夺鬣瘸潼及 抑瘸率的影响(i±s) 拣 男哇 破钫教 德荦fg) 95％cl 揶瘟串(％) P 骥邵时鞭缴 14 0374±0．1090，311，0，437 0 ～ 鞠戮疆静维 12 0．364±O15l 0．248，0，480 2．83 0，9l 溺哪组 10 0376±0185 0．268．0482 —0．29 099 滋明组 9 0．659±0，4640327．0．990—75．9 0．00’ 溢粗敷部鳃 15 0．207±0．4150+185。0．231446 O．04’ 沣糟}，檀验，与摸制埘照组时比，P(0．05。 2。5 温精散都法对鞋22精癌小鼠Bax表这的影响 各照药鳃耀不同方药震，Bax量的差别在0。05 水准上有统计学意义；提示单纯温阳治疗早期肿瘤， 无促进肿瘤细胞诵亡的趋势。觉表4。 2．6漫艟散郁法对疆，，肝癌小鼠潺亡揍数的影嘞 光镜下观察发现，鹅亡缨胞散在分布予肿瘤组 织中，凋亡细胞核被染成棕黄色。坏死区可见均一 戆豹疆性漆恕，为棼特菇性染色，不予计数。表明湛 阳教郁缀鳇Al达刘2．99％有较好的趋势。见裘5。 袭4 温阳散郁法对H：：肝癌小鼠Bax表达的影响 注寤2。14，477，P=0。∞6《0，05。≮衰蟹鞋黧鲤对魄，·尹《母，05。 袭5 温阳散郁法对H。肝癌小鼠凋亡指数的影响 (露±s) 缀别 稍壤f／(kg·d)】霸镑(鼗) Al(％) 模裂对照缀 10mL 14 2．68±0．57 弼戮双耠维0，5g 12 2．69士0。78 瀛阳组0．3g lO 2．26土0．67 滋戮缰0．3g 9 2．53土0．50 温I：}j散郁组0．6g 15 2．99±0．87 2．7 温箱散都法对嚣：：肝癌◇鼠PCNA表达的影喻 组阀}|：：脬癌小鼠PCNA表达结暴瓣差努毒簸 著的统计学意义(P<0。05)，可认为5组小鼠各用 不同方药后PCNA表达嫠有所不同。见表6。 袭6 湛鬻数部浚瓣}|。：翳痉小靛PCNA表达戆影嘲 漶：，=14·544．P=0∞6<0．05。与模髓对照缀辩垅．·尹‘o+05。 3讨论 目前在中医临床辨证用药中存在“重寒凉药， 轻温阳药”现象。一些医家认为瘸肿就是“热毒”、 “毒溱”，两“瀑辫药会加速魏瘿魏生长”，哭蠢少数 医家有应用瀑嗣药治疗肿瘤的病例记载"’。中医 治疗肿瘤有一个明显的误区，即不辨寒热，不分碰 实，不求辨证炎俺爨，不阉歪鄹之多少，一旦躐医诊 为肿瘤，则一睬施照活囊化瘀、清热解毒、化痰除瀑、 软坚散结之药。此非真正的中西医结合，乃是西医 理论指导中医处方，这可能是中医抗肿瘤疗效不强 著的症结之所在¨，。 本实验通过荷瘤小鼠模型，探索肿瘤早期的治 疗方法及病理改变，导师瘸发祥认为人类的肿瘤早 期治疗皮以瀑飕教郜秀圭，实验缝果发现瀣豳散郡 组的死亡率在实验中为零；潺阳散郁组抑瘤率为 44。6％，高于模壁X尊照缀，差剐有统计擘意义(P< 0。01)；澡匿散郁药物有{霉瘤作用。《凌经》巾是以 阴阚二气为“生之本”的，阴阳是万物之纲纪，变化 之父母。万物的变化主宰为阴阳二气的运动，是阴阳 二气交感懿结果。瘗缨憩是交盏常缨娩变化魏，圈 万方数据 -14· 中医研究2008年9月第2l卷 第9期TCMRes．September2008V01．21No．9 榉受裂阴匿二气的影#惠。二者必然对缨憨躅亡熊影 璃不弱，鬏据《素翔·蕊疆瘟蒙大论》“翔纯气，瓣成 形”，阳气具有化物于无形的功能，阴气具有助长有 形的作用。肿瘤的产生是无限制助长有形的过程， 其海在必然有“黼忧气”的失调，阳气不行使化气功 熊或无霾气都链造成拖耪予蠢形的功薏丧失。我织 认为阳气是主导因素，恢复阳化气的作用及胡阳二 气的交感是解决肿瘤细胞凋亡减少的关键。 肿瘤早期的产生机理较为复杂，本实验仪从减 少缀瞧增殖、增搬Bax蛋自熬表达、促襞瓣瘤细胞凋 亡方覆遂行了郝分探讨，远不能阐臻缨胞穰亡、鸯待 于进一步探讨。 静鸯文献： 【1l张褥流．骧袋寒媾标记梭溅翳癌缨麓凝亡与PCNA袭遮 鹃霪痰器究鬣瑟(j】。广嚣嚣学，2001，23(2；：286—289， 【2]鄂征．癌变梳建研究[M]．北京：jE京出舨社，1999：1t— 12． 【3】TatebeS，lshidaM，KasagiN，et基+ApoptosisOCCURSmore frequentlyinmetastaticfocithaninprimarylesionsofhuman colorectalcarcino：analysisbyterminalwdeoxynueleotidge· transferase—mediatedUPTwbiotinnickendlabeling[J]．IntJ Cancer，1996，65(2)：173—179。 【43串杰+孛医缝计学【醚】．筵衰：又民军箧爨舨疆，2003； 221-225． [5]蘩德．药物诱导的肿瘸细胞凋亡研究进展【J]．国外医 学一肿瘤学分册。1995。22(1)：7-9． f6]仇恚搬，马伴吟，杨毅，铃．阿糖胞瞽诱譬HL-60缨胞礴 亡申bcl-2、e—myc基觳袭达瘩平懿变化【j3。中华盘灌学 杂悫，1997，18(7)：372—373． [7]丁潦．肝细胞凋亡[J]．中华病理学杂卷，1996，25(2)： 18．21． [8】彭黎冁，王曾筏。缨腿潺亡憋基础学l琏窳【触】．北京：人 民鼹惫出鹱裢，2000：15-3t． 较稿弱期：2008-01—18；穆豳13期：2008-05．29 (编辑陶珠) 文章壤号：100t一6910(2008)09—0014—03 ·实验研究· 大黄鹰虫丸对实验性子宫内膜异位症大鼠性激素的影响 赵 芳，李 岩，丁虹磊，耋 静，吴成平，宋焱鑫 (洛阳市妇女儿童医疗保健中心生殖医学研究所，河南洛阳471000) 摘骚 巨的：观察中药制剂大黄鹰虫丸对大鼠子宫内膦潞位 痘(Endometriosis，EMT)走襞性激素龅影嚏。方法：建立 EMT凄魏模望，按藤舞佳蠹蒺露黎将太鼠遮鬣分妻申鹰缀、 中低组、西药组、模灏组，灌霄治疗4周后检测指标。结果： 中高组、中低组及谢药组对异位子宫内膜有抑制作用。匈模 型鳃对比，差别有统计学意义(P<0．01)；大黄魔虫丸能明 显降低EMT走袋矗潦蛙二簿(E，)、罄体泌襄素≤PRL>永乎 (P《O。05袭P<0．01)，鹱蔓秀嘉血清孕激素≤P)未平《P《 0．01)，双向调节内分泌。结论：大黄鹰虫丸对EMT火鼠异 位内膜有明显抑制作用，其作用机制可能为通过双向调节性 激素水平面改善内分泌状态，是治疗EMT晦安全、有效药物。 关疆谲；夫簧鏖虫丸／蓊效掌 子宫内蕊莠醢痘 突袭 蛙 激素 中阐分类号：R285．5文献标志粥：B 子宫内膜异位症(Endometriosis，EMT)在育龄 期虹女中的发瘸率兔10％，鼹逆年星上舞趋势， 80％魏EMT患者有甓显戆癔经，50％合并不孕¨2。 大蓑鹰虫丸出爵汉代张姊景著《金匮要略》牡】，临床 报道其治疗EMT疗效显著”。，但泼方治疗内异癍的 桃制造未阐明，亦来觅相关报道。本课题通过动物 实验，观察了经方大黄瘗虫丸对EMT模型大鼹牲激 素的影Ⅱ晦，意在探讨其治疗EMT的机制，以便为临 床应异l摄{盐实验象撂，努中医药治疗EMT提供瓤的 悉路_零鞋方法。 l材料与方法 l。l 动 物 簧通缀9霹龄S玢健康成熟来交醚雌性大鼠， 俸囊量《200±lO)g，赉郑鲤大学医学院浮南省实验 动物中心提供。自然光照下常规饲养。 1．2 药 物 大黄磨虫丸，广东恒诚制药有限公司产品，批号 0512702；丹嚣唑胶囊，上海华联制药有限公霹产瑟， 攫号050402。将敬大黄痉蛊丸议蒸漓柬热适量 0．5％的羧甲基纤维索钠配成浓度为20％和10％的 混悬液；丹那唑用蒸溜水加适量1％阿拉伯树胶配 置成浓度海1％的混悬渡。 l+3盅要馥器与试热 SN．6595B型智麓放免测量仪，上海原子能研 究所融环仪器一厂产晶；雌二醇(E，)、臻酮(P)、泌 乳素(PRL)放射免疫分桥试剂盒，北京辩美东雅生 耪技术有限公嚣提供，生产懿号20060625。 万方数据 温阳散郁法对小鼠H22肝癌细胞凋亡及增殖关系的实验研究 作者： 郭勇义 作者单位： 郑州市中医院,河南,郑州,450007 刊名： 中医研究 英文刊名： TRADITIONAL CHINESE MEDICINAL RESEARCH 年，卷(期)： 2008,21(9) 被引用次数： 1次 参考文献(8条) 1.彭黎明;王曾礼 细胞调亡的基础学临床 2000 2.丁潦 肝细胞凋亡 1996(02) 3.仇志根;马伴吟;杨毅 阿糖胞苷诱导HL-60细胞凋亡中bcl-2、c-myc基因表达水平的变化 1997(07) 4.粟俭 药物诱导的肿瘤细胞凋亡研究进展 1995(01) 5.申杰 中医统计学 2003 6.Tatebe S;Ishida M;Kasagi N Apoptosis occurs more frequently in metastatic foei than in primary lesions of human colorectal carcino:analysis by terminal-deoxynucleotidgetransferase-mediated UPT- biotinnick end labeling[外文期刊] 1996(02) 7.鄂征 癌变机理研究 1999 8.张锡流 原位末端标记检测肿瘤细胞凋亡与PCNA表达的国内研究概况[期刊论文]-广西医学 2001(02) 引证文献(1条) 1.薛雪 温阳法辨治肿瘤思考[期刊论文]-吉林中医药 2011(3) 本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zyyj200809007.aspx