盐酸萘替芬的毒性研究

0110, 0120, 与溶媒对照组相同 (0120) , 表明萘普生 肠溶微丸胶囊对胃无刺激作用; 灌胃给予萘普生胃 溶胶囊 3 个剂量组致溃疡指数分别为 2160, 3140, 3160, 与溶媒对照组比较 3 个剂量组对胃均有明显 刺激作用 (P < 0101)。结果 (见表 3 和图 1)。 表 1　对大鼠灌胃给药急性溃疡实验结果 (X±S, n= 10) 组别 剂量 (m g·kg- 1) 溃疡指数 发生率 (% ) 溶媒对照组 20m l·kg- 1 0120±0142 20 肠溶微丸胶囊 100 0120±0142 20 200 0110±0131 10 400 0120±0142 20 胃溶胶囊 100 2160±11073 3 90 200 3140±01523 3 100 400 3160±01523 3 100 注: 与溶媒对照组比较, 3 3 P < 0101。 图 1　萘普生肠溶微丸胶囊和胃溶胶囊对大鼠灌胃给药急性溃 疡实验结果 4　讨论 411　萘普生 (N ap roxen) 作为一种非甾体抗炎镇痛 药, 在临床上主要用于治疗类风湿关节炎、骨关节 炎、各型风湿病、痛风等疾病。萘普生与其它传统的 非甾体抗炎药 (N SA ID ) 一样, 由于阻断环氧化酶, 使 具有胃粘膜保护作用的内源性前列腺素 (PGE2) 合 成减少, 因而易造成胃粘膜损伤〔4〕。这种损伤作用主 要来自萘普生对胃粘膜的直接作用, 这对类风湿性 关节炎等慢性病的长期口服给药带来许多不利因 素, 许多患者因为严重的胃粘膜损伤而中断治疗, 为 克服或避免这一不良反应的发生, 我院研究开发的 萘普生肠溶微丸胶囊是以多单位肠溶包衣小丸的形 式存在于胶囊, 可有效的防止单个普通肠溶胶囊由 于工艺或质量等原因可能产生的“崩释”现象, 使其 药物全部在肠道内溶解吸收, 避免了药物对胃壁的 直接损伤, 解决了非甾体抗炎镇痛药这一副作用。 412　本次实验结果显示, 对大鼠灌胃给予萘普生肠 溶微丸胶囊 400m g·kg- 1 时, 平均溃疡指数仅为 0120±0142, 溃疡发生率为 20% , 与溶媒对照组相 同; 而灌胃给予萘普生胃溶胶囊 200m g·kg- 1时, 平 均溃疡指数达 3140±0152, 溃疡发生率就达 100% , 说明萘普生肠溶微丸胶囊对胃无损伤作用。 413　急性毒性结果显示, 小鼠灌胃给药 LD 50 为 132916m g · kg- 1, 小 鼠 腹 腔 注 射 给 药 LD 50 为 59613m g·kg- 1, 文献报道〔5, 6〕萘普生胃溶胶囊小鼠 灌胃给药LD 50为 1234m g·kg- 1, 说明萘普生肠溶微 丸胶囊比胃溶胶囊毒性低些。 参考文献 〔1〕中华人民共和国卫生部药政局 1 新药 (西药) 临床前研究指导原 则〔S〕, 1993, 1431 〔2〕徐叔云, 卞如濂, 陈修主编 1 药理实验方法学〔M 〕1 第三版, 北京: 人民出版社, 2002: 1871～ 18851 〔3〕李仪奎主编 1 中药药理实验方法学〔M 〕1 上海: 上海科学技术出 版社, 1991, 453～ 19911 〔4〕古德曼, 吉尔曼主编 1 治疗学的药理学基础〔M 〕1 第十版, 北京: 人民卫生出版社, 2004: 529～ 5481 〔5〕温玉麟主编 1 药物与化学物质毒性数据〔M 〕1 天津: 天津科学技 术出版社, 1981, 3061 〔6〕Roszkow ski A P, Rooks W H 2nd, Tomolonis AJ, et al1A nti2inflam 2 m atory and analgetic p roperties of d222(6’2m ethoxy22’2naphthyl) 2 p rop ionic acid (nap roxen)〔J〕1J Pharm acol Exp Ther11971 O ct; 179 (1) : 114～ 231 盐 酸 萘 替 芬 的 毒 性 研 究 王剑萍, 吴 斌 (中国人民解放军第 476 医院药械科 福州 350002) 摘要: 　小鼠 ig 盐酸萘替芬 1 次灌胃的LD 50> 5g·kg- 1, 长期毒性用大鼠 40 只。分给药组与对照组, 给药组 ig, 50m gö(kg·d) , 连续给药 12 周。 动物未出现任何中毒反应及死亡, 血象常规、血液生化和重要脏器病理检查及脏器系数均无异常发现。 关键词: 盐酸萘替芬; LD 50; 最大耐受量试验; 长期毒性 中图分类号: R99　文献标识码: A 　文章编号: 100623765 (2005) 0620056203 作者简介: 王剑萍, 女 (1964110- )。1996 年毕业于上海第二军医大学药学大专。 职称: 主管药师。联系电话: 13675039919 ·65· 海峡药学　2005 年　第 17 卷 第 6 期 　　盐酸萘替芬是第一个烯丙胺类外用抗真菌药, 具有优良的抗菌活性, 新颖的结构特点和作用机理。 福州金山制药厂根据《国家药物制剂新产品开发指 南 (第一辑)》的推荐, 对盐酸萘替芬进行研究、开发。 并根据新药临床前研究指导原则的进行了盐酸 萘替芬的急性和长期毒性研究, 现将结果如下: 1　急性毒性实验 111　实验动物　昆明种小鼠, 日龄 25～ 30d, 体重 18～ 22g, 购自上海西普尔2必凯实验动物有限公司, 合格证号: 23016。各剂量组 10 只动物, 雌雄各半, 试 验前禁食 12h。 112　受试样品　盐酸萘替芬, 福州金山制药厂提 供, 批号 921016, 含量 99194% , 羧甲基纤维素钠 (CM C) , 实验试剂, 长红塑料厂产品。将 CM C 溶于 蒸镏水中配成 015% CM C 溶液, 加入盐酸萘替芬制 成不同浓度的混悬液。 113　小鼠LD 50预测　取昆明种小鼠 50 只, 分 5 个 剂量组: 015g·kg- 1、110g·kg- 1、215g·kg- 1、510g ·kg- 1、1010g·kg- 1, 1 次灌入小鼠胃中, 每只动物 接受容量不超过 1mL。给药后观察 2 周, 各组动物无 一死亡, 未观察到毒性反应。其中 1010g·kg- 1组采 用 20% 盐酸萘替芬CM C 混悬液, 因药物浓度太高, 混悬不均, 无法操作而舍去。 114　最大耐受量试验　取昆明种小鼠 20 只, 雌雄 各半, 按 5g·kg- 1剂量, 用计算量的 10% 盐酸萘替 芬CM C 溶液灌入小鼠胃中, 间隔 6d 重复给药 1 次。 连续观察 14d, 结果全部小鼠活动正常, 未见中毒现 象, 无一死亡。因此认为小鼠口服盐酸萘替芬的LD 50 > 5g·kg- 1, 为微毒药物。 2　长期毒性实验 211　材料及方法 21111　实验动物: SD 大鼠 40 只, 雌雄各半, 38～ 42 日龄, 体重 170±20g, 上海西普尔2必凯实验动物有 限公司提供。动物合格证号: 0000244。动物单笼饲 养, 动物室室温: 18～ 26℃, 湿度: 40%～ 60%。饲料 由福建省防疫站动物场提供。 21112　受试物: 盐酸萘替芬: 福州金山制药厂提供, 批号 921016, 含量 99194% , 配成 015% 豆油溶液。 21113　实验方法: ①给药方法及剂量: 大鼠按性别、 体重随机分两组, 每组 20 只。给药组剂量 50m gökg ·d, 另设溶剂对照组。采用灌胃给药法, 每日上午 9: 00～ 10: 00 进行, 连续给药 12 周。②观察指标及方 法: 动物的外观体征、行为活动、食量及体重变化每 两周 1 次, 在整个给药过程结束后, 动物断头取 血, 作各项指标测定, 测定方法 (见表 1)。计算脏器系 数, 肉眼检查脏器的变化并作病理切片检查。 表 1　血液学及血液生化检测方法 检测项目 　　　方法 血红细胞计数 显微镜计数法 白细胞计数及分类 姬姆萨染色法 白红蛋白 氧化高铁血红蛋白法 血小板计数 细胞计数法 血浆总蛋白 双缩脲法 血浆白蛋白 溴甲酚绿法 AL T 比色测定法 A ST 比色测定法 AL P 比色测定法 尿素氮 二乙酰一肪法 总胆固醇 A bell氏法 血糖 葡萄糖氧化酶法 总胆红素 重氮法 21114　数据处理: 所有试验数据用平均值±差 表示 (X±S) , 显著性测定用 t 检验。 212　试验结果 21211　盐酸萘替芬对大鼠一般状况的影响: 整个给 药过程中无一动物死亡, 动物外观及行为无异常发 现, 动物体重及饲料消耗量情况 (见表 2、3)。给药组 与对照组间无显著差异, P > 0105。 表 2　盐酸萘替芬口服给药对大鼠体重的影响 组别 n (只) 试验前体重 (g) X±SD 试验期间各周体重 (g)X±S 2 周 4 周 6 周 8 周 10 周 12 周 给药组 20 174±9173 203±10133 250±133 292±113 313±8123 330±173 317±123 对照组 20 175±917 208±13 249±14 291±15 315±17 332±813 350±133 P > 0105vs 对照组 ·75· Strait Pharm aceutical Journal V o l 17 N o. 6 2005 表 3　盐酸萘替芬口服对大鼠饲料消耗量 (gö50g, 体重, 天的影响) 组别 n (只) 试验前体重 (g) X±S 试验期间各周体重 (g)X±S 2 周 4 周 6 周 8 周 10 周 12 周 给药组 20 1414±3173 14±3193 1315±3143 1410±3123 1415±3173 1410±4143 1410±3183 对照组 20 1312±210 14±211 1317±312 1415±310 1415±310 1318±316 1410±3103 P > 0105vs 对照组 21212　血液学检查: 给药组与对照组无显著差异, 均在正常范围内 (见表 4, 5)。 表 4　盐酸萘替芬大鼠长期毒性试验血液学检查 (一) 组别 n(只) 红细胞数 (1012öL )网织红细胞(% ) 血红蛋白(g·L - 1) 血小板(109öL ) 凝血时间( s) 给药组 20 7104±1123 01314±01193 125±243 231±703 3114±7193 对照组 20 7117±113 01293±0123 120±27 221±74 2812±3193 P > 0105vs 对照组 表 5　血液学检查 (二) 组别 n(只) 白细胞数 (109öL ) 中性(% ) 淋巴(% ) 单核(% ) 碱性粒细胞 (% ) 酸性粒细胞 (% ) 给药组 20 1211±3123 2711±8103 7219±8103 03 03 03 对照组 20 1118±311 2911±815 7019±815 0 0 03 P > 0105vs 对照组 21213　血液生化检查: 给药组与对照组无显著差异 (见表 6, 7)。 表 6　血液生化检查 (一) 组别 n(只) 总蛋白 (g·L - 1) 白蛋白 (g·L - 1) AL T (卡门单位) A ST (卡门单位) AL P (金氏单位) 给药组 20 7116±8153 4016±5193 5011±9193 79±12173 6415±8163 对照组 20 7215±814 4019±811 4718±917 75±1311 6413±7153 P > 0105vs 对照组 表 7　血液生化检查 (二) 组别 n(只) 尿素氮 (mmol·L - 1) 肌肝 (Λmol·L - 1) 总胆固醇(mmol·L - 1) 血糖(mmol·L - 1) 总胆红素(Λmol·L - 1) 给药组 20 7121±01723 4914±7193 311±0153 613±0193 316±0183 对照组 20 7133±114 5117±12 219±014 610±019 317±0173 P > 0105vs 对照组 21214　病理学检查: 用药 12 周后给药组及对照组 动物的肾上腺、胰腺、胃肠、食道、睾丸、前列腺、胸 腺、唾液腺、大脑、小脑、心、肝脏、脾、胸骨、骨髓组 织、肾、肺的肉眼检查及病理切片检查均无明显变 化。 21215　脏器系数: 实验结束后测定肝、脾、肾、心、 肺、脑、肾上腺、胰腺的脏器系数, 给药组与对照组无 显著差异 (见表 8)。 表 8　盐酸萘替芬对脏器系数的影响 组别 n (只) 肝 脾 肾 心 给药组 20 4110±0128 0139±0103 0177±0105 0135±0103 对照组 20 4102±0121 0141±0105 0174±0105 0138±0102 组别 n (只) 肺 脑 肾上腺 胰腺 给药组 20 0175±0106 0127±0107 0102±0107 0138±0107 对照组 20 0177±0109 0129±010801019±010090139±0111 3　小结 根据新药研究指导原则〔1〕, 规定在受试物未测 出LD 50值时, 用最大浓度最大给药容积进行最大耐 受量试验, 而本试验中最大可给药剂量为 5g·kg- 1, 动物未出现死亡, 可以认为盐酸萘替芬的小鼠口服 灌胃LD 50> 5g·kg- 1。 另据新药研究指导原则〔1〕规定, 小鼠口服LD 50 > 5g·kg- 1, 长期毒性试验可只设一个高于临床剂 量 50 倍的剂量组, 而本试验中选用的剂量 50m gökg ·d, 此剂量按国外文献报道〔2〕的人皮肤吸收量 (18Λg·kg- 1)推算, 已远远地超过了皮肤吸收量。用 此剂量连续灌胃 12 周, 对大鼠无任何毒性反应。 参考文献 〔1〕中华人民共和国卫生部药政局, 新药 (西药) 临床前研究指导原则 汇编: 1993, 198～ 2011 〔2〕F. Schatzetal, A rzneim 2Forsch, 1986, 36 (É )N r2, 248～ 2551 ·会讯· 泉州市药学会 2005 年学术年会召开 泉州市药学会 2005 年学术年会于 2005 年 11 月 4～ 6 日在泉州市泰和大酒店七楼会议厅隆重召开。出席会议的领导有福 建省药学会刘锡钧副理事长, 泉州市科协郑今奋主席、林丕鼎副主席, 市药监局陈国荣局长、蔡锦忠副局长、陈平副局长, 市卫生 局许顺清副局长, 市民政局傅温典主任。参加会议的有来自我市药品监督、检验, 医疗单位, 药品生产、经营、教学等部门的代表 共 225 人, 以学术交流的形式共同庆祝泉州市药学会成立 40 周年。开幕式由市药学会蔡锦忠秘书长主持。 泉州市药学会林必杰理事长致开幕词, 省药学会刘锡钧副理事长, 市科协林丕鼎副主席、市药监局陈国荣局长、市卫生局许 顺清副局长在会上分别作了重要讲话。大会共收到论文 46 篇, 其中 3 篇在大会上交流。会议邀请了中国药科大学于锋教授、北 京费森尤斯卡比医药有限公司陈哲峰政务总监、复旦大学药学院王仲义教授、福建医大附属第一医院杨立勇博士、成都地奥制 药集团陈长雄博士分别作《手性药物研究的新进展》、《药物经济学》、《糖尿病的药物治疗》、《糖尿病神经病变治疗药物的新进 展》、《红曲研究的新进展》等 5 场专题学术报告, 为促进学术交流、更新知识、加强会员之间的沟通和交流提供了良好的氛围, 把 我市药学学术水平不断推向新的高度。 (泉州市药学会卢文斌供稿) ·85· 海峡药学　2005 年　第 17 卷 第 6 期