关于馏分合并与舍弃的纠结问题

关于馏分合并与舍弃的纠结问题 留样（做每一步之前要想清楚接下来要做什么，怎么做。最好是有了，写下来再动手做，不然毁了样品就后悔莫急啊。） 接馏分（每馏分的体积。大柱用梯度时1/3-1/2柱体积；小柱馏分收集仪1/8-1/2体积（以收集试管为最终判断，手动收集1-3柱体积不等） 回收溶剂。大柱回收溶剂（注意回收过程中物质（甚至晶体）的析出，回收干后烧瓶内固体的析出，如果有估计析出，用弱极性的溶剂洗涤，易溶溶剂溶解固体）（记录每一瓶的回收瓶中的样品状态（晶体、固体、胶质）、颜色、量（大致）） 点板（大柱：每一瓶点。用洗脱体系溶剂（但极性加大，使Rf值在0.2-0.8，如果是难分离的几个化合物最好是压一压Rf值），呈递减状。留样 （遵照等体积、等量最好体积和点样量都相等，或两者折合相等。定量毛细管），可看出化合物洗脱的趋势（总体和每一个）。晶体和干净固体、洗涤的母液重点观察。多用GF254，显色顺序：日光正反面（有色成分蒽醌、部分黄酮，叶绿素），紫外（荧光、暗斑，叶绿素排出），碘、硫酸，碘化铋钾（等30分钟，观察颜色的变化），水<最好每一次铺板，精确确定时每分样品等量点一个点，点量适中。确定要合并的部分。还有就，显色都照相，以方便最后>。{备注：开始确定大致范围时，可以把1~10号样品点一个点，11~20号点一个点，以此类推……以确定哪些段含有相似的点是，每一次点板时都要点留样的那部分，以确定馏分流出的情况｝ 放置、挥溶剂。每天观察，固体、晶体的析出。 晶体或固体析出后，继续放置直至脏的母液变成流浸膏附着在晶体或固体表面（这时候知道不会再析出晶体或固体了）。用滴管吸出流浸膏至另一瓶中，用微溶溶剂洗涤晶体或固体，洗涤液吸出），得到量较大的化合物。（原则是能拿到20毫克，就先拿出来） 待处理区段（一般为几十个馏分）的其余馏分全部挥干后，对照3点的薄层观察每一馏分的量的多少（固体、特别注意胶质、油状物）（用封口毛细管探） 。对有主点又有量的馏分关注。 能够洗涤出固体或晶体，就如5的操作。 溶解待处理的区段，采用不同于洗脱体系的展开体系展开（一般先用一种其他体系，若需要时再用第二种体系）。 合并时，目标要明确。根据斑点情况，确定（锁定）所要分离的目标。注意以分离主要化合物母液中其他次要化合物的锁定。（一般量少、斑点多而不特别明显、无主点、相同斑点在前后馏分没有或少、馏分干后黑色胶质的馏分，分离出化合物的可能性小）。 （一般觉得，溶液10毫升（大半安培瓶），1/5毛细管，斑点非常明显，就有可能分离出10毫克。）大柱下来若分离效果好（即不出意外），合并时每一段所锁定的待分离成分一般在3、4个以下（贪多不化）。 根据3和8的点板，若6中观察到的没有量（注意胶质和油状物）、没有明显斑点的，此时可以丢弃。 不敢扔的，放置在一边、挥干（也许可用于合并段分离后，次要成分量的累积） 对合并的馏分选择洗脱体系（洗脱体系一般不能与上一次的体系相同）（两个合并段一起选，点在同一张板上，原因极性相差不大） 量的概念。10毫克是多少 合并时目标明确 无量无明显点弃之