清开灵注射液对进行期寻常型银屑病患者外周血CD3+、CD4+、CD8+T

清开灵注射液对进行期寻常型银屑病患者外周血CD3+、CD4+、CD8+T 【摘要】  目的 结果 P P 结论     【关键词】  清开灵注射液  寻常型银屑病  T细胞     Effect of Qingkailing injection on CD3+，CD4+ and CD8+T cells in peripheral blood of patients with development psoriasis vulgaris         【Abstract】  Objective  To definite the changes of CD3+，CD4+，CD8+ T cells in peripheral blood of patients with development psoriasis vulgaris （PV）.To investigate effect of Qingkailing injection on CD3+、CD4+、CD8+ T cells in peripheral blood of patients with PV.Methods  40 cases of PV were observed，20 cases were chosen randomly as treating group and the others  as control group.20 cases were chosen randomly from the healthy persons as confnols.Patients of the treating group injected with Qingkailin Injection (1ml/kg adding into 5%GS 500ml，once a day);and orally took Tuhuaiyin decoction 200ml，twice a day; and locally applied Jiaweihuangqingao twice a day.Patients of  the control group only orally took Tuhuaiyin decoction 200ml twice a day;and locally applied Jiaweihuangqingao twice a day.All patients were treated for 4 weeks.Results  CD3+，CD4+ and CD8+T cells of peripheral blood of patients with PV were all improved in the treating group and the control group.Conclusion  Qingkailing injection has definitely effec on PV，and can correct the unbalance of CD3+，CD4+ and CD8+T cells in peripheral blood of patients with PV.     【Key words】  Qinkailing injection  psoriasis vulgaris  T cells         银屑病是T细胞介导的自身免疫性疾病［1］。银屑病患者存在免疫学异常，文献报道银屑病患者外周血T细胞及其亚群的变化结论不一。清开灵注射液治疗银屑病有效。清开灵注射液治疗银屑病的机制，文献多从学的角度进行阐述，现代实验研究相对缺乏。本试验探讨进行期寻常型银屑病患者清开灵注射液治疗前后外周血CD3+、CD4+和CD8+T细胞变化，从免疫学角度试图阐述清开灵注射液对进行期寻常型银屑病患者的疗效。     1  资料与方法     1.1  一般资料  本试验共收集进行期寻常型银屑病完整资料40例，按住院先后随机分为治疗组和对照组，每组各20例。另选择门诊健康体检者20例，作为健康对照组。     治疗组：共20例，其中男12例，女8例；年龄最小者20岁，最大者55岁，平均年龄(33.95±10.92)岁，病程1年以内者2例，3年以内者7例，10年以内者9例，10年以上者2例；皮损形态：以点滴状和混合型为主，PASI积分最小者10.9，最高者35，平均积分24.31±6.97。对照组：共20例，其中男9例，     女11例；年龄最小者18岁，最大者44岁，平均年龄(31.95±8.23)岁；病程1年以内者1例，3年以内者5例，10年以内者10例，10年以上者4例；皮损形态：以点滴状和混合型为多；PASI积分最小者11.6，最高者32.7，平均积分22.96±7.75。     1.2  病例入选  上符合寻常型银屑病诊断且为进行期；常规检查除外其它器质性病变。入院期间及入院前1个月内未用皮质类固醇、免疫抑制剂、迪银片和维A酸。     1.3  方法及药物提供  (1) 抽取患者及健康体检者外周静脉血3ml，加肝素(20u/ml)抗凝，用淋巴细胞分离液制备淋巴细胞悬液，采用间接免疫荧光染色后再用流式细胞仪检测法测定T细胞亚群。取已制备的淋巴细胞悬液各100μl，分别加入1∶100稀释的抗CD3+、CD4+、CD8+单克隆抗体即OKT3、OKT4、OKT8单克隆抗体(美国Dako公司产)100μl，室温孵育30min，加入1∶200稀释的二抗(羊抗鼠IgG-FITC)100μl，室温孵育30min，最后加PBS液2ml上机检测。试验中用PBS液分别代替一抗、二抗作阴性对照。采用美国BD公司生产的FACSCalibur型流式细胞仪检测，每份标本检测10000个细胞，计数荧光标记阳性的细胞，测量的数据输入，用相应的软件程序进行资料处理，输出数据结果，并进行t。(2) 清开灵注射液由山西太行药业股份有限公司提供（批号：020301）；“加味黄芩膏”由江苏省中医院制剂室提供；中药汤剂“土槐饮”的中药饮片由江苏省中医院中药房提供。     1.4  观察指标和疗效判定  (1)安全性检测：血、尿、大便常规，肝、肾功能；(2)症状积分改变情况：采用PASI积分系统，衡量银屑病皮损受累面积及严重程度，实验开始及实验结束各记录1次PASI积分；(3)患者治疗前后及健康对照者的T细胞及其亚群。     1.5  学方法  全部数据资料采用统计学软件 SPSS11.5软件包进行统计学处理。计量资料用x±s示，采用t检验，计数资料采用χ2检验。P＜0.05认为差异有显著性，P＜0.01认为差异有非常显著性，P＞0.05认为差异无显著性。     2  结果     2组治疗前后经配对t检验，P＜0.01，组间经t检验，P＞0.05，差异无显著性，见表1。     表1  2组治疗前后PASI积分比较  (x±s)                                           治疗组在痊愈率、显效率和总有效率都高于对照组，但经χ2检验P＞0.05，差异无显著性，见表2。                                                            表2  2组疗效比较  (例)                             注:痊愈率＝痊愈／n×100％；显效率＝（痊愈＋显效）／n×100%；总有效率=(痊愈+ 显效+好转)/n×100%    表3  2组治疗前后T细胞亚群变化情况  （x±s）         2组治疗前CD3+、CD4+、CD8+T细胞均明显低于健康对照组（P＜0.05），CD4+/CD8+明显高于健康对照组（P＜0.05），治疗后2组CD3+、CD4+、CD8+T细胞均有提高，CD4+/CD8+比值下降，治疗组优于对照组（P＜0.05），见表3。     3  讨论     中药针剂清开灵注射液系在清代《温病条辨》“安宫牛黄丸”基础上由北京中大学研制的复方制剂。其主要药物成分为：板蓝根、金银花、栀子、水牛角、珍珠母、黄芩苷、胆酸、猪去氧胆酸。清开灵注射液虽然不是为治疗银屑病而开发研制，该药的主治病（证）中也没包括银屑病，但从该药的药物构成和功效来看，与银屑病的病症相吻合，从中的角度可用于银屑病的治疗。“土槐饮”和“加味黄芩膏”是江苏省中医院皮肤科常用治疗银屑病的2个方剂，“土槐饮”主要由土茯苓、生槐花及其它中药加减变化组成，全方有清热解毒、凉血活血的功效；“加味黄芩膏”系江苏省中医院院内制剂，主要由黄芩、枯矾等药物组成，具有清热解毒、消炎止痒功效。以上三方同用，具有清热解毒、凉血活血、消炎止痒的功效，达到改善银屑病的目的。     本试验提示进行期寻常型银屑病患者，治疗前外周血CD3+、CD4+、CD8+T细胞明显低于健康对照组（P＜0.05)，治疗后患者T细胞及其亚群随患者的症状改善及PASI积分的降低而趋于正常，提示