效应t细胞使靶细胞裂解死亡既有凋亡特征,又有坏死迹象

效应t细胞使靶细胞裂解死亡既有凋亡特征,又有坏死迹象 效应T细胞使靶细胞裂解死亡既有凋亡特征，又有坏死迹象 以下摘自李福荣 张顺利《免疫学》P182-184 T细胞对靶细胞的杀伤主要有两种途径:攻击靶细胞细胞膜，诱发细胞溶解坏死和攻击C 靶细胞细胞核，诱发细胞程序性死亡。 (一)释放穿孔素，诱发细胞溶解 在此种杀伤途径中，成熟T细胞识别抗原和MHC-?类分子并被激活后，迅速和靶细C [1]胞贴近，两者细胞膜发生接触，但之间留有空隙。CTL胞浆中的裂解性颗粒( lytic granule ) 藉助微管作用被集中在靠靶细胞的一侧，然后颗粒中的大分子内含物被释放至CTL和靶细胞凤的空隙中，称为颗粒胞吐( granule exccytosis)。内含物包括穿孔素(perform )、丝氨酸酯酶等。 穿孔素是导致靶细胞溶解的重要介质。穿孔素以其前体形式(单体)存在于T胞浆颗C粒中。当T受靶细胞上的抗原刺激和T细胞释放的IL-2及IL-5的作用而活化时，可引起CH 2+细胞内游离Ca水平升高，促使颗粒降解而释出单体形式的穿孔素。释出的穿孔素随即进 2+人细胞间隙，并在Ca的存在下迅速附着于靶细胞膜，嵌人细胞膜的双层磷脂中，不断形成不同孔径(50-160nm)的跨膜孔道，从而导致靶细胞膜去极化，使细胞外水分流人胞内，一些电解质和大分子物质流出胞外，最终使靶细胞溶解。对靶细胞进行攻击后的T细胞仍完C整无缺，经与裂解的靶细胞分离后，又可继续攻击其他靶细胞。一个T细胞在几小时内可C 以杀伤数十个靶细胞。这和补体级联反应最后C9在靶细胞膜上"打洞"，造成细胞裂解的效果十分相似[图9-16(b)，图9-17] 。 由上可以看出，T细胞溶解靶细胞过程可分为两个阶段: C ?效一靶细胞结合阶段: T细胞的TCR与靶细胞面的抗原-MHC-?类分子复合体紧C 密结合，这是触发T活化和释放溶细胞性介质的前提，该过程历时数分钟，须在37?进行，C 2+且需要Mg存在。 ?靶细胞溶解破坏阶段:此阶段Tc细胞对靶细胞造成不可逆的损伤，使靶细胞发生进行 2+性溶解，此过程历时约一小时或更长时间，对温度变化敏感，需要Ca存在。 (二)释放淋巴毒素。诱导细胞程序性死亡 许多重要的免疫生物学现象都有PCD(programmed cell death)参与，因而其意义远远不限于免疫应答的效应机制。如胸腺选择中大量细胞死亡即由PCD引起。另外，各种依赖于细胞因子而增殖的免疫细胞，在细胞因子不再存在时的自然消亡也属PCD。因而这是一种生理性"细胞自杀"过程。形态特点是细胞发生皱缩、核崩溃、细胞膜内折，形成凋亡小体，后者迅速被周围的巨噬细胞或上皮细胞所吞噬。因而PCD与穿孔素及补体引起的细胞裂解不同，不造成细胞内含物因细胞死亡而释放到细胞外环境中，也就不引起炎症反应。PCD的分子生物学表现主要是激活限制核酸酶，后者作用于DNA，使整个DNA断裂成长度和核小体相当(约200bp)，或与之成倍的(400bp、600bp、800bp……)核苷酸片段，在琼脂糖电泳带上呈现典型的"梯级结构" 。这是判断PCD是否存在最具特征性的指标，表明PCD的主要把目标是细胞核。 CTL接触靶细胞5-15min即可观察到PCD特征(核损伤、染色质固缩、核小片段出现)， 5130-120min后出现膜破裂和胞浆标记物Cr的释放。由于典型的PCD并不表现膜破裂，上 [2]述现象支持PCD和颗粒胞吐在CTL诱发的细胞毒中同时起作用。 综上所述，T细胞杀伤靶细胞有以下几个特点:?预先由抗原诱导，活化的T细胞可特CC异性杀伤携带内源性抗原的靶细胞而对其他细胞无损伤作用。 ?T细胞的杀伤作用受C MHC-?类分子的限制。?T细胞可连续杀伤靶细胞，其杀伤效率高。?T细胞必需与靶CC细胞直接接触才有杀伤作用。 图9-17两种细胞杀伤机制形态学比较 (1)正常细胞;(2)发生程序死亡后，染色质收缩，形成分布于核膜旁的边界清晰的团块，胞浆浓缩，核膜及细胞膜卷曲;(3)接着发生核断裂，细胞膜内折形成带蒂隆凸;(4)后者演化成由细胞膜包被的死亡小体，被附近细胞吞噬;(5)左侧所示为坏死过程，包括染色质凝成边界不明的结构，细胞器肿胀，线粒体出现絮状的结构;(6)细胞膜破裂，细胞分解 注: [1]即T细胞 C [2]说明效应T细胞发挥作用并非单纯的细胞的凋亡 ?以下摘自王金发《细胞生物学》 P603-604 14.2.2.1细胞坏死与程序性细胞死亡 细胞坏死与细胞程序性死亡是两种完全不同的过程和生物学现象，在形态学、生化代谢改变、分子机制、细胞的结局和意义等方面都有本质的区别。 细胞坏死是因病理而产生的被动死亡，而程序性细胞死亡是细胞接受指令后的主动死亡，属于"安乐死"。程序性细胞死亡是由它的生存环境、自身的代谢状况、发育史以及基因组等因素触发的，并且是受高度程序性控制的。 程序性细胞死亡与细胞坏死有3个根本的区别。首先是引起死亡的原因不同:如物理性或化学性的损害因子及缺氧与营养不良等均导致细胞坏死，而程序性细胞死亡则是由基因控制的;第二是死亡的过程不同，坏死细胞的质膜通透性增高，致使细胞肿胀，细胞器变形或肿大，早期核无明显形态学变化，最后细胞破裂;而程序性细胞死亡的细胞不会膨胀、破裂，而是收缩并被割裂成膜性小泡后被吞噬;第三是坏死的细胞裂解要释放出内含物，并常引起炎症反应;在愈合过程中常伴随组织器官的纤维化，形成疤痕。而程序性细胞死亡的细胞没有被完全裂解，所以不会引起炎症。 程序性细胞死亡最突出的生化特征是染色质DNA的有控裂解，并且是由于内源性内切核酸酶基因的活化和表达而造成的结果。这种由内源性内切核酸酶切割的染色质DNA片段大小是有规律的，即都为200bp的倍数。因此，抽提其中的DNA，进行琼脂糖凝胶电泳时， 或进行氯化铯溴化乙锭超速离心时，呈现出梯状(lad-der)谱型，可作为鉴别是否发生程序性 细胞死亡的一个重要的生化标志。