酒精及其代谢物乙醛对鼠胚胎发育的作用

酒精及其代谢物乙醛对鼠胚胎发育的作用 ,]j崛却奶 中华医学杂志1999年10月第79卷第10期NailMedJChina.Oetdaer1999.?79..10 肝组织内出现大量急性虫卵结节,肉芽肿面积达到最大值; 而后肉芽肿逐渐缩小,8,9周可见较多慢性虫卵结节,炎 症反应明显减轻;11周后虫卵结节周围已出现明显纤维化; 此后纤维化程度逐渐加重,至第l6周,门静脉分支周围可见 大量纤维性虫卵结节,肉芽肿面积进一步缩小. 2.不同感染期小鼠肝脏羟脯氨酸的结果如图1所示.小 鼠在感染日本血吸虫后第4,11周之间肝内羟脯氨酸逐渐 增多,至l1周时达到高峰,而后缓慢下降,但至感染第16 ,6倍. 周时其羟脯氨酸仍为正常小鼠的5 3不同感染期小鼠肝组织I'GF-~1nd~/A表达水平的检 一:l图口口口口llJIlIlllUJ 喜 冀 量 围2小鼠感染日本血吸虫后肝脏TC-F-fllmRNA的表达 测结果如图2所示鼠感染日本血吸虫后,其肝脏TC-F一01 nd~/A的表达水平逐渐增高,9周时达到高峰,以后逐渐下 ,仍维持在较高水平,为正常小鼠的 降,至感染后l6周时 21倍. 4.直线相关:小鼠感染日本血吸虫后,其肝脏 TGF-~Im卧A的表达水平与羟脯氨酸呈明显正相关.r: 07136,:2.82,P<005 三,讨论 迄今愈来愈多的证据表明TGF-~I作为一个前炎症因 子,在急性血吸虫病向慢性期过渡的过程中发挥了极其重 要的调节作用,并且它在血吸虫病肝纤维化过程中是主要 的致纤维化因子.本实验结果表明鼠肝纤维化过程 中a'GF-~表达高峰位于感染后第9周,与其虫卵肉芽肿相比 较后发现,此时正是急性虫卵肉芽肿向慢性过渡之时(虫卵 肉芽肿于感染后第7周达到最大值,于第9周起逐渐变小), 这些结果与Kresina等l3的研究报道基本一致,这或许恰好 反映了TGF_Bl的免疫抑制炎症细胞应答的效应.为了动态 观察TGF-~I与日本血吸虫病肝纤维化的关系,对不同感染 时期的小鼠肝脏羟脯氨酸进行连续生化检测,并与TGF_口l mRNA表达水平进行直线相关分析,发现它与TC-F..盥mRNA 表达水平的高峰虽然不完全一致,但两者呈明显正相关,提 示TGF-~1与日本血吸虫病肝纤维化的发生,发展密切相关, 它的过度表达是导致肝纤维化的主要原因之一. 参考文献 1wsM.nJ—M,血WW,d.Cyl~Une叩0f w.hi~indueedgumulonmandfibrc~is.dnIra.199751:I370一 l375. 2Jaeob~W,Klamar鹤.BJ,dolTr,mdonnlag~owthfact.-beta, nII—ra口e伽】e日andl.印珊pI】且lp瑚a瑙in expel~anltalb~epatiesekisto~mfiasismansaraCTissue.18. 292:1D1—106 3Kr~ina1F,mQ.BiSD,elolcfibrosisandgeneexpre~一 ?chinducedbypra~quaateltrealnmntduringmlmttnenrldula- ?_1n0fSehiacsom~1~aotacttmi.Patasitol~,1993,107:397- 404 77f? 酒精及其代谢物乙醛对鼠胚胎发育的作用 屈卫东吴德吴玮邓莹用颖张雪王云波何雁缸 ,二 本课题为四川省计划生育委员会资助项目(964~) 作者单位:610041成都,华西医科大学公共卫生学院环境卫生教 研室:屈卫东(现在上海医科大学环境卫生教研室,200032)吴德生, 邓莹,岗颖,张雪,王云泣,何雁红];乌鲁术齐石油化工厂医院(吴玮) (收稿:1998—10-21修回:1999-06—10) (本文编辑:刘小梅) 孕期饮酒会导致胎儿酒精综合征(FAS)和酒精相关性 出生缺陷(M~d3Ds).因母体摄入酒精可为多种酶代谢为乙 醛,经血液循环入子宫内环境,故两者可共存于子宫内影响 胚胎发育.由于体内因素干扰和胚胎发育的复杂性,两者联 中华医学杂志1999年l0月第79卷第l0期NatlMedJChina,October1999.vnl79.N0l0 合作用研究一直存在困难,而植入后垒胚胎培养(WEC)有利 于研究化学物质联合作用,且与体内研究有较好一致性1]. 故我们利用WEC研究酒精,乙醛对胚胎发育影响,以期探讨 两者在FAS的作用. 一 ,材料与 1.实验动物:14周龄sD雌鼠l1只,每1318时雌雄1:1 合笼,次日晨镜检有精子者为孕第零天,第9天16时为胚胎 发育9.5天龄. 2.实验培养基:由大鼠即刻离心血清(ICS),体积分数为 10%的三蒸水和终浓度均为100IJ/的青霉素及链霉素组 成.ICS制备方法按文献[2]. 3.实验分组:以3×4析因分析方法研究酒精,乙醛联合 作用:按所给酒精(mg.dl)+乙醛(.dlI1)分为12组:即 0+0组,100+0组,100+20组,100+40组,100+100组,200 +0组,200+20组,瑚+40组,200+100组,0+加组,0+40 组,0+100组.受试物随ICS加入培养液. 4.胚胎移植:孕9.5天将鼠脱颈处死,无菌暴露宫内"梨 形"蜕膜组织,取子宫中部3—4只含蜕膜组织胚胎,分离胚 胎,剥离Reichert'日膜,取体节数(2?1)胚胎用于WEC培养. 5.全胚胎培养:胚胎置50含3mlICS培养瓶,首次通 气后以体积分数为10%的三蒸水稀释(内含双抗及受试 物),置旋转培养箱[(37.?05).c,35r/m_m_培养48小时. 6.观察指标:(1)胚胎发育:在显微镜下观察卵黄囊 (Vvs)直径,头长,体长,体节数等测试终点及胚胎蛋白质和 DNA含量.(2)胚胎器官形态分化:以改良Brown's评分系 统评价胚胎器官形态分化. 7.统计学处理:应用SAS软件进行数据处理(方差分 析):析困分析判别联合作用类型l3J. 二,结果 1.酒精,乙醛对体外培养大鼠胚胎发育影响:由表1可 见,低剂量组合:(100+2o)mg-dl]除vYs直径,DNA含量 外与对照组比较差异无显着意义(F=192,P>0o5).当 剂量增至(100+40)-dl时除头长,蛋白质,其他指标均低 于对照组(F=7.21.P<0.05).中剂量(100+100)mgdl,, 高剂量组各指标与对照组比较差异有显着意义(F=127,P <005). 2.酒精,乙醛对胚胎器官形态分化的影响:由表2可 见,(100+加)-dl组与对照组比较多数指标的差异无显 着意义.仅体节数,ws循环,翻转,前肢芽,前脑等指标低 于对照组(F=912,P<005).中,高剂量组各指标低于两 者单独作用形态评分. 3.酒精,乙醛联合作用析因分析:无交互作用根据P值 判定主因素=有交互作用则分析交互作用类型l3.结果显 示胚胎中脑,后脑,下额突为酒精单独作用,前肢芽为乙醛单 独作用.二者均能影响体节数,VYS循环,翻转,上额突,后 肢芽,神经管,Broom总评分和蛋白质等发育分化指标ws 直径,头长,体长,心脏,前脑和DNA等指标有交互作用当 酒精为主效应时[(100+20)ms.dl]胚胎头长,前脑,DNA含 量呈独立作用,vYs为协同作用,体长,心脏为拮抗作用,即 两者共存比单独作用效应低.(100+40)mg.dl..时vYs为 拮抗作用,体长为协同作用,而前脑,头长,心脏,DNA含量仍 呈独立作用.(100+100)nag?dlI1时各项指标均为协同作用. 200mg-dl酒精与乙醛组合除(200+100)mg-dl组外心脏 呈协同作用,其余为酒精独立作用,乙醛并未加重对头长,前 脑及体长发育分化的影响. 三,讨论 本研究显示,单独作用对胚胎发育分化无明显作用的酒 精,当其与乙醛组合时可影响胚胎的部分发育和形态分化指 标,中,高剂量组合对发育分化影响均超过两者单独作用效 应.影响中脑,后脑,下额突器官形态分化主要因素是酒精. 而乙醛是影响前肢芽的主要因素=不同浓度的酒精,乙醛组 合时酒精仍是脑发育异常的主要原因. 表1酒精,乙醛联合作用对体外大鼠胚胎生长发育的影响(?s) 注:与0+0组(对照组)比较P<005 中华医学杂志1999年l0月第79卷第10期NailMedJcl,0ct01999,Vol79,N010 表2酒精,己醛联合作用对大鼠胚胎生长发育及形态分化的影响(?) 791 注:与相应对照组比较P<0?;为Bm帅评分系统的分数 参考文献 1R.衄匝dIR,d皿,砒眦leI.Inbl?Ialk哪唧I嘶j bve~lrmmaand_乜reversalby?JNI】,1982t112:1994-20OO. 2ThomasJ.耶v?.creseow,h1岵irIgvitro~stemIM咖一 eeAtlb~'O~ltumEns'ir~HealthPer,4~c.1987,72:203— 210 3垒丕焕.主编.医用统计方法上海:上海医科大学出版社 1992327-336 77I77j厶 自蛋白对脂肪栓塞综合征防治作用的实验研究 ? 张伯勋张群刘郑生郭jL柱梁雨田 ,—一,'_一 脂肪桂塞综台征(Faterr山蛐syndrome.FEs)是创伤.尤 其是长骨骨折或骨盆骨折后的严重并发症.游离脂肪酸 (FFA)是其重要的致病因素.利用FFA在血中常与血浆白蛋 白相结合这一生理特点,在脂肪栓塞的基础上.选用血浆白 蛋白治疗,以观察其是否具有防治FES的作用: 一 材料与方法 , 作者单位:100~53中国人民解放军总医院骨科 撇杉荔ljIf 【收稿:1998.11-O3修回:19994)4.22) (本文编辑:刘小梅) 兄甜 1.实验动物与分组:选用健康杂种犬21只,体重15,18 ,动物模型的建立,按文献[1一方法进行.随机分为A,B, C,3组,每组7只A组单纯静脉注射骨髓脂肪,不采用任 何防治.B组在静脉注射骨髓脂肪后2小时和24小时 分别静滴,质量分数为10%犬白蛋白渡5ml/.C组在静 脉注射骨髓脂肪后12小时和36小时亦分别静滴质量分数 为10%犬白蛋白液5ml/体重.3组犬均观察48小时,按 下列要求进行血液学,组织学检查. 景凌丝对乏