【doc】在膀胱移行细胞癌发生发展过程中突变P^53基因的表达

【doc】在膀胱移行细胞癌发生发展过程中突变P^53基因的表达 在膀胱移行细胞癌发生发展过程中突变 P^53基因的表达 C1L7啜科照扔 在膀胱移行细胞癌发生发展过程中 突变P基因的表达 第二医院兰兰苎 P基因位于17号染色体短臂1区4带, 有两种表型.目前研究显示它能控制细胞周期, 表现在:1.P蛋白能直接与DNA结合,调控 DNA复利起点,从而直接或间接调节某些基因 的表达,是这些基因细胞周期中G1一s期分裂 的重要调控子.2.抑癌基因P"的突变是细胞 增值和分化的重要调控子,在膀胱癌的发生发 展过程中是一种比较常见的基因突变,与癌的 浸润和转移表达密切相关. P最初被认为是细胞的前癌基因,起负性 调控作用,但目前被列入为肿瘤的抑制基因或 抗癌基因,有可能突变型蛋白量过多导致野生 型P的功能灭活.P"基因突变和等位基因的 丧失,可能与部分肿瘤患者恶性转化有关.我 们应用免疫组化P抗癌基因评估膀胱肿瘤 恶性度及其预后.如下: 材料和方法 一 ,标本来源 所有标本来自我院膀胱组织活检及全膀胱 切除,经1o中性福尔马林液固定,常规石蜡 包埋切片. 二,APC免疫组织化学染色 (1)试剂:鼠单克隆抗突变型P蛋白抗体, 羊抗鼠免疫球蛋白G(IgG)及ABC试剂均为 美国Dako公司产品. (2)步骤:切片常规脱蜡,逐级水化,0.3 Hzo:阻断内源性过氧化物酶30分钟,微波炉 45.C20分钟,小牛血清封闭30分钟,依次加一 抗(P抗体)l:20,4?冰箱过夜,二抗(羊 抗鼠IgG)及ABO蔓合物各室温6O分钟,上述 新o- 各步骤间均以PBS缓冲液振洗15分钟,DAB 显色,逐级脱水,透明,封片. (3)对照:膀胱正常粘膜用PBS代替一抗, 二抗和ABC液傲为阴性对照. 结果 一 ,ABC免疫组化染色结果;光镜下见阳 性反应表现为细胞核被染成棕褐色,可见清楚 的染色质团块(见图1,2). 田1簪开绷胞乳头状癌(I缎) 囊断面细胞棱梭桑成椽幡色,为誊衰选 二,P基因表达结果与组织学分级:见附 表 .2例为I级浸润 7种病变中过表达6例 癌,2倒为I级癌浸固有膜,1倒为I级癌浸纤 维血管束,1倒为原位癌.21倒为一般表达,l6 例为弱表达,24倒为不表达.P壤达主要为I 级浸润移行上皮癌和I级浸润癌和原位癌,未 授润癌中7例不表达,过表达者细胞异型突出. p, LT 楮0兄尼 48 田2融台性咎抒细胞乳头技囊(I鳗)细晦接簋溉睫 棒相色可见清繁的檠色质毋块.为萄裹达 附衰P5基西衰选产牺捡弼结枭 讨论 P肿瘤抑制基因产物是核磷酸蛋白,在细 胞周期中调节细胞停滞于G.期,这种阻滞G 一s期作糟有利于DNA损伤的充分修复,保证 细胞分裂的高保真度,如果DNA难以修复,则 将诱导细胞凋亡.P突变是人类肿瘤演化过程 中的高频率事件,P失活由等位基因的缺失和 点突变构成.P肿瘤抑制基因与癌基因突变或 原位基因丧失,可见于多类肿瘤,包括肺,乳 腺,结肠,食道,肝卵巢,脑与膀胱的肿瘤 Habuch等研究指出染色体17P染色丧失,表 明P基因即位于该部位.目前已证实高级别, 浸润性移行上皮癌其野生型P失活.序列分析 表明,存在残余等位基因的错义点突变,而这 些突变与肿瘤的浸润有关].P聚集与肿瘤的 进展有明显相关0】.约1/3结构不良及原位癌 病变有P蛋白的聚集,而在I期癌标本P蛋 白则聚集较少见[.本研究所得结果与文献相 符.研究证明P突变对于膀胱癌的发生发展是 重要因素之一.但肿瘤的发生有多种途径,虽 累积的基因不同,但可产生相似的肿瘤形态学 改变,而其生物学行为不尽相同.一般认为这 是由于肿瘤的亚群不同所致. 参考文献 1HabachiT.eta1.Alieliclossofch~'omosome17pitturothNial can靶r:打0姆as~ociafioowith~vaslveloheac4"ypeJ.u?I 1992:148:1999,1599 2Fu~motokPeta1.FlmtassociationofPgenemutation ininvaslvebladder?LCncerRes,1992;52:1393, j398 3SarkisAteta1.Nuclearaer旺Dressl呻ofPproteinintran- si~ional础bladdercarcinoma,amarker虹di~sesprogres- sion.jNailCaIIeL=X"lnst,1993;85:53,99 4Schmltz--Dr~gerHJ."Paccumulation_nprerutsar leaioosandearlystagesofbladdercancel-.WorldJUrol, 1994:I2.79,83 (1996-07-18收稿)