HPLC法测定参桂调经丸中丹皮酚的含量.doc

HPLC法测定参桂调经丸中丹皮酚的含量.doc HPLC法测定参桂调经丸中丹皮酚的含量 【摘要】 目的 建立HPLC法测定参桂调经丸中丹皮酚的含量。方 法 采用Agilent Hypersil-ODS-C18分析柱(250 mm×4.0 mm,5 μm),以 甲醇-水(70?30)为流动相;检测波长为274 nm,流速为1.0 mL/min。 结果 线性范围为0.052,0.84 μg(r,0.999 9),平均回收率为 99.94%(RSD,1.63%)。结论 本法简便、灵敏、准确,可用于该制剂 的质量控制。 【关键词】 参桂调经丸;丹皮酚;高效液相色谱法 Abstract:Objective To establish a method of HPLC for determining the Paeonol in Shengui Tiaojing Pill. Method Agilent Hypersil-ODS-C18 (250 mm×4.0 mm, 5 μm) was used, the mobile phase consisted of methanol-H2O (70?30). The flow rate was 1.0 mL/min. The detecting wave length was at 274 nm. Results The method was linear at the range of 0.052,0.84 μg for Paeonol (r=0.999 9). The average recovery was 99.94%. Conclusion The method is simple, sensitive, accurate and can be applied to the quality control of Paeonol in Shengui Tiaojing Pill. Key words:Shengui Tiaojing Pill;Paeonol;HPLC 参桂调经丸是由党参(炙)、川芎(制)、牡丹皮等多味中药制成的中 药制剂,具有温经活血之功效,临床用于月经不调、经前后虚冷腹痛、 月经过多。本品标准收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中 药成方制剂第十四册[1],原标准中无含量测定项。本品处方中牡丹皮 具清热凉血、活血化瘀之功,为处方之主药,其主要成分为丹皮酚。笔 者3.2 线性关系考察 精密称取丹皮酚对照品约5 mg置50 mL容量瓶中,加甲醇溶解并 稀释至刻度,再分别精密吸取0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mL置10 mL 容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,各进样10 μL,照上述色谱条件测定峰面 积。以进样量(μg)对峰面积积分值进行线性回归,得回归方程:Y,9 855.792，2 066 694X,r,0.999 9,线性范围为0.052,0.84 μg。 3.3 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液l0 μL,按上述色谱条件重复进样6次,丹 皮酚峰面积积分值RSD,0.87%。 3.4 稳定性试验 取同一份供试品溶液(批号0405002),按上述色谱条件,分别每隔1 h进样,丹皮酚峰面积在12 h内性质稳定,RSD,0.70%。 3.5 重现性试验 取同一批供试品(批号0405002)6份,照供 试品溶液制备制备,依法测定含量,结果RSD,1.00%。 3.6 加样回收率试验 采用加样回收法,取已知含量的供试品(批号0405002)9份,每份1 g, 精密称定,其中3份分别精密加入0.445 0 μg/mL丹皮酚对照品溶液0.5 mL,3份分别精密加入1 mL,另3份分别精密加入2 mL,混匀,其余按供试品溶液制备方法制备供试液,依法测定,计算回收率。结果见1。表1 回收率试验结果(略) 3.7 样品测定 取不同批号的样品,按供试品溶液的制备方法制备,分别取供试品溶液及对照品溶液注入液相色谱仪,各进样10 μL,用外标法计算丹皮酚含量。5批样品含量测定结果见表2。表2 参桂调经丸中丹皮酚含量测定结果(略) 4 讨论 来用流动相配制的对照品溶液,测定其紫外吸收光谱,丹皮酚的最大吸收波长为274 nm,故确定以此为HPLC的检测波长。 根据丹皮酚的溶解性,选用甲醇、50%甲醇、70%甲醇为提取溶媒,提取方法选择超声处理,结果70%甲醇为提取溶媒提取效果最理想。超声时间选用25、30、35、40 min,结果35 min提取已完全。 本试验建立的方法简便,专属性及重现性好,结果准确可靠,可用于该制剂的质量控制和分析。 【