高效液相色谱法测定祛痰止咳合剂中黄芩苷的含量

高效液相色谱法测定祛痰止咳合剂中黄芩苷的含量 高效液相色谱法测定祛痰止咳合剂中黄芩苷的含量 作者: 付凌燕 程晓英 赵明会 【摘要】 目的: 建立祛痰止咳合剂的含量测定 方法 。方法: 采用高效液相色谱(HPLC)法测定祛痰止咳剂中黄芩苷的含量。结果: HPLC法测得本品中黄芩苷的含量为0.512,0.541mg/ml，在0.40,2.00μg的范围内，溶液的浓度与峰面积呈良好的线形关系， r = 0.9993， 加样平均回收率为99.85%(n=5)，RSD为0.69% 。结论: 本品定量方法简便、准确，专属性强能够控制该制剂的内在质量。 【关键词】 祛痰止咳剂 高效液相色谱法 含量测定 黄芩苷 Determination of Baicalin in Qutanzhike Mixture by HPLC 【Abstract Objective】Study on the Quality Standarded for Qutanzhike Mixture. Method: Radix Scutellariae, Flos Lonicerae in Qutanzhike Mixture were identified by TLC,and the content of Baicalin was determined by HPLC. Result: The Baicalin showed a good linear relationship within a range of 0.40,2.00ug(r=0.9993), the average recovery was 99.96%(n=5), RSD= 1.37% . Conclusion: method HPLC is accurate and reliable method.The quality standard can be used for quality control of this product. 【Key words】Qutanzhike Mixture HPLC Baicalin determination 祛痰止咳合剂是由黄芩、苦杏仁、甘草、瓜蒌仁等药物组成。该方是在大量的基础上，以中医辨证为主，结合 及现代药理研制出的 治疗 急、慢性气管炎的有效药物。为更好地控制其质量，保证该制剂的临床疗效，本 研究 采用HPLC法对制剂中的主要有效成分黄芩苷进行了含量测定，现报道如下。 1 实验材料 1.1 仪器 LC-2017A 高效液相色谱仪，CLASS-VP色谱站，UV-2401型紫外分光光度仪(日本岛津)。 1.2 试药 黄芩苷对照品( 中国 药品生物制品检定所，供含量测定用，批号: 110715-201712);祛痰止咳合剂(吉林市船营区中 医院 制剂室);甲醇为色谱纯;其余试剂均为 纯。2 方法 与结果 2.1 色谱条件与系统适应性试验 色谱柱: DiamosilTM(钻石)C18(5μ 250×4.6mm，);流动相: 甲醇-水-冰醋酸 (45: 55: 1);检测波长: 276nm;流速: 1.0ml/min;柱温: 室温(25?);进样量: 对照品溶液6μl，样品溶液10μl; 理论 塔板数按黄芩苷峰计应不低于1500。 2.2 溶液的制备 2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取在60?减压干燥4h的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。 2.2.2 供试品溶液的制备 精密量取本品10ml，置50ml容量瓶中，加60%甲醇适量，超声(功率250W)处理20分钟，放置至室温，加60%甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。 2.2.3 阴性对照溶液的制备 取除黄芩以外的处方中其余药材的十分之一量，按法制成合剂，再按供试品制备方法，制成阴性对照溶液。 2.3 专属性试验 分别精密吸取供试品溶液、阴性对照溶液10μl，对照品溶液6μl，注入液相色谱仪，色谱(图1)。从图中可见，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，有相同保留时间(30.8min)的色谱峰，阴性试验无干扰，证明本法可行。 2.4 线性关系考察 精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml约含0.1mg的溶液，分别精密量取对照品溶液 4、 8、 12、 16、20μl，进样测定，以浓度(X)为横坐标，峰面积(Y)为纵坐标，得回归方程为 Y=1151340.8+100157.4 X，r =0.9993，线性范围0.40,2.00μg。 取样品(批号: 2.5 精密度和稳定性试验 050517)按“2.2.2 供试品溶液的制备”方法制备样品溶液，重复进样5次，进样量10μl，其峰面积的相对偏差(RSD)为0.9%，明精密度较好。取同一样品溶液，在0、 2、 4、 10、24h分别进样测定，结果5 次测得值(黄芩苷，mg/ml)的RSD为 1.3%，可见黄芩苷在24h内稳定。 2.6 重现性试验 取供试品(批号: 050517)，共5份，分别按“2.2.2 供试品溶液的制备”方法制备样品溶液，进行测定，其黄芩苷含量的RSD为0.7%，表明重现性较好。 2.7 加样回收率试验 精密量取已知含量的样品(批号: 050516，含量为0.529mg/ml)适量，共5份，分别定量加入黄芩苷对照品适量，按“2.2.2 供试品溶液的制备”方法操作，得回收率试验溶液，依法测定，结果见表1。 2.8 供试品的测定及限度制定 取多批供试品，照正文所述方法测定黄芩苷的含量，结果各批样品中黄芩苷的含量均高于0.50mg/ml，暂定为本品每1ml含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于0.40mg。表2 3批样品含量测定结果 3 讨论 3.1 检测波长的确定 在选择检测波长时，笔者取样品在200,350nm波长范围内进行扫描，结果在276.5nm处有最大吸收，故选择276nm为检测波长。 3.2 流动相的选择 笔者比较了甲醇-水-磷酸(50:50:0.3)和甲醇-水-冰醋酸(50:50:1)等流动相，结果以甲醇-水-冰醋酸(45:55:1)分离效果最好。 采用HPLC法对制剂中的黄芩苷进行定量，结果准确，方便简便，重现性及回收率均理想，可以有效地控制产品的内在质量。【 参考 文献 】 国家药典委员会编(中华人民共和国药典[M](2017年版，一部(北京: 化学 工业 出版社，2017，1，370,371，405,406(