浅论胎盘滋养层细胞的功能 .doc

浅论胎盘滋养层细胞的功能 .doc 浅论胎盘滋养层细胞的功能 胎盘有两大重要功能，内分泌功能与侵袭功能，其功能与滋养层的结构密不可分。在妊娠早期胚泡埋入子宫内膜之后，滋养层细胞分化成两个主要的细胞谱系，即绒毛滋养层( villoustrophoblasts，VTS) 和绒毛外滋养层( extravilloustrophoblasts，EVTs) 。绒毛滋养层包括两种细胞，与内膜接触的滋养层细胞迅速增殖，滋养层增厚，细胞分化为内外两层。外层细胞互相融合，细胞间界限消失，称为合体滋养层，起到强大的内分泌作用; 内层细胞界限清楚，由单层立方细胞组成，称为细胞滋养层，其不断分裂，补充进入合体滋养层。二者构成绒毛结构，运输营养物质给胎儿; 此外，细胞滋养层绒毛的尖端可以分化成另一种类型的滋养层细胞称为绒毛膜外滋养层细胞，绒毛膜外滋养层细胞对母体子宫上皮的黏附与侵入行为是胎盘形成的前提。 1 侵袭功能 EVT 细胞的侵袭性迁移行为是胎盘形成、发育及妊娠顺利完成的基本要素。EVT 细胞首先迁移到母体子宫蜕膜，然后侵入到子宫肌层的螺旋动脉壁内，并沿着螺旋动脉壁进行迁移，启动血管重塑的过程，建立母胎循环联系。细胞介导的血管重塑由螺旋动脉穿过蜕膜板进入母体叶，最终在母胎之间形成一种高流量、低阻力的脉管系统，在胎儿小叶绒毛处进行物质交换，保证对胎盘充足的血液灌注，满足胎儿的生长发育和对氧气及营养物质的需求。 EVT 细胞的侵袭性迁移功能受到体内微环境的精确调节，有多种蛋白酶和黏附分子直接或间接地参与了滋养层细胞的浸润和黏附过程，这些因子之间可以相互作用，共同参与血管重塑过程的调节，对妊娠结果产生重要的影响。 1. 1 金属基质蛋白酶 EVT 细胞之所以具有强大的侵袭功能，是因为它能够分泌金属基质蛋白酶( MMPS) ，其中金属蛋白酶-2( MMP-2) 和金属蛋白酶-9( MMP-9) 是妊娠期EVT 细胞侵袭的关键酶。EVT 细胞分泌的这些胶原酶可以降解弹力蛋白、胶原以及层粘连蛋白，从而能够侵入子宫蜕膜的细胞外基质，整合到肌层螺旋动脉壁内。现有研究明，趋化因子-6( CXCL-6) 通过抑制基质MMP-2 活性来抑制人早孕胎盘滋养层细胞的迁移和侵袭。 1. 2 激活素A 激活素A 是一种多功能的生长因子，近年来发现滋养层细胞通过分泌激活素A 来上调MMP-2 和MMP-9 的表达从而促进滋养层细胞向子宫蜕膜浸润，同时刺激胎盘激素的产生，对早期胎盘形成发挥重要的作用。 1. 3 解整合素-金属蛋白酶 解整合素- 金属蛋白酶( a disintegrin andmetalloproteinase，ADAM) 是一类属含锌蛋白酶超家族的跨膜蛋白，定位在滋养层细胞中。ADAMs 分子作为多功能蛋白，通过其分子内在的催化、细胞黏附和细胞内信号的转导从而在妊娠系统中发挥作用，包括参与精卵识别和融合、组织发育及细胞迁移浸润 等。适量的ADAMs 对于妊娠过程是必要的，但ADAMs 的过量表达会使诱发人绒毛膜癌，使滋养层细胞的浸润能力下降，同时增强细胞间的黏附。上述结果表明，ADAMs 可能在胎盘发生过程中对滋养层细胞发挥非常重要的调节功能。 2 内分泌功能 产妇机体能够维持妊娠、孕育胎儿依赖于胎盘强大的内分泌功能。在早期的母胎界面中，胎盘滋养层细胞按两种途径分化: 一是绒毛内滋养途径，包括细胞滋养层细胞融合形成合体滋养层; 二是在绒毛外滋养途径，细胞滋养层细胞在子宫内壁增生，相互接触并锚定，参与螺旋动脉的重构。在怀孕的前3 个月，胎儿胎盘单位在低氧环境中发育，此阶段合体滋养细胞分泌大量活性物质，如甾体类激素、神经肽类激素、生长因子、细胞因子等多种生物活性物质。这些物质在母胎循环中影响母体的新陈代谢，增加母胎循环流量的活力，母体通过局部自分泌或旁分泌的机理与来自母胎循环的信号调控来发挥其分泌功能。 2. 1 甾体类激素fan【】 妊娠最初分泌雌激素和孕激素的组织是黄体，随着黄体不断退化，胎盘逐渐成为内分泌的主要组织。孕激素在合体滋养层细胞中转化为孕酮，人胎盘滋养层细胞可以从C-19 前身合成雌激素，对胚泡的发育起到至关重要的作用。 2. 2 调节肽 2. 2. 1 促性腺激素释放激素( gonadotropinreleasinghormone，GnRH) 胎盘产生的GnRH 与下丘脑产生的GnRH 在化学结构和生物学活性上是完全相同的。GnRH 主要分布于胎盘绒毛的细胞滋养层中，尚未发现合体滋养层细胞有分泌GnRH 的功能。研究发现GnRH 受体基因在胎盘绒毛的两层滋养层细胞中均有表达，其表达量的变化与人绒毛膜促性腺激素( hCG)的分泌量相一致，表明GnRH 有营养黄体、维持早孕、调控其他激素分泌的重要功能。 2. 2. 2 hCG hCG 是一类糖蛋白家族，包括促黄体生成素、促甲状腺激素和卵泡刺激素，有影响胎盘植入、血管重塑以及营养黄体、促进黄体分泌孕酮的作用。现有假说表明hCG 涉及肿瘤细胞抗细胞凋亡的作用，这一作用与激素的结构有关，正常约37. 5 kDa 分子质量的hCG 是由合体滋养层产生的，而相对分子质量 38. 5 , 40 kDa 的hCG 是由某些癌细胞分泌而来=，如绒毛膜癌、侵蚀性葡萄胎等，可能是游离-hCG 的增多与滋养层细胞未发育成熟相关。 2. 2. 3 促肾上腺皮质激素释放激素( corticotropinreleasing factor，CRF) CRF 的mRNA 于妊娠早期的胎盘中就有所表达，随胎龄逐渐增大，CRF 由胎盘合体滋养层细胞分泌[15]，是胎儿胎盘循环强有力的血管扩张剂，对妊娠期的应激信号起着放大作用。它通过与前列腺素、催产素、皮质激素和雌激素等多种内分泌激素的相互作用，形成分娩启动的正反馈环。 2. 2. 4 神经肽-Y( neuropeptide-Y，NPY) NPY 及其受体主要分布于胎盘绒 毛的细胞滋养层。孕妇通常具有高水平的NPY，其水平在分娩时发生明显的变化，实验发现，胎盘中NPY 可能参与调节局部血管的收缩和子宫肌的肌紧张调节。 2. 2. 5 卵泡抑素( follistatin，FS) 合体滋养层细胞可以分泌这种含半胱氨酸的单链糖基化多肽，它对胎盘自主分泌的hCG、孕酮无明显调节作用，但对激活素诱导的hCG、孕酮合成有显著的抑制作用。 2. 3 生长因子 2. 3. 1 表皮生长因子( epidermal groRNA 主要在合体滋养层细胞中表达， IGF-?的mRNA 主要在细胞滋养层细胞中表达。IGF-?已经显示出刺激EVT 细胞的迁移和入侵，从而影响胎盘发育和胎儿生长的作用。近年来，在胎盘的两层滋养层细胞和基质细胞中还发现了可与IGFs 结合的特殊结合蛋白( insulinlikegroing groulate factor，CSF-1)CSF-1 是一类糖蛋白生长因子，刺激单核巨噬细胞增殖与分泌。妊娠后子宫内CSF-1 水平明显上升，分娩时达到高峰。由子宫产生的CSF-1 可以结合到胎盘滋养层细胞的CSF-1 受体上，从而对胎盘的发育起重要调节作用。 2. 4. 4 免疫球蛋白GFc 段受体( FcR) 荧光化学组化法已证明胎盘滋养层细胞表面存在FcR?和FcR?，FcR?主要存在于绒毛间质细胞，FcR?主要分布于滋养层细胞和绒毛间质细胞。提示胎盘滋养层细胞具有免疫活化作用。 2. 4. 5 树突状细胞表面特异性非整联蛋白同源物( DC-SIGNR) 在不同孕期的胎盘组织中均有表达，主要位于滋养层细胞膜和Hofbauer 细胞的胞膜上。DC-SIGNR 能识别HIV、HCV 等病毒并介导其顺式或反式感染。这些病原体大多潜伏期长，能在体内长期滞留导致慢性感染。DC-SIGNR 在病原体的慢性感染和免疫逃避中发挥重要作用，因为与DC-SIGNR 结合的还包括多种病毒、细菌、寄生虫和真菌。因此DCSIGNR与病毒的宫内传播有紧密的联系。 早孕期滋养层植入对母体而言是一种炎性适应过程。滋养层必须维持它的同种异体表型避免成为母体免疫系统的靶标。母体免疫系统能识别和消除病毒，也能耐受遗传上与自身表型不同的胎儿细胞，特别是在滋养层细胞的侵袭过程中，胎盘滋养层所处的微环境使很多复杂且互相关联的细胞因子共同精密调控植入位点，从而控制滋养层细胞的入侵及母胎界面的相互交流。其中，白细胞抗原G( HLA-G) 对滋养层细胞起到重要的保护作用。HLA-G 分子主要在人胎盘组织中转录，表达于孕卵着床期植入母体子宫内膜的胎盘细胞滋养层细胞中，HLA-G 分子在母胎界面中的分布反映了母体对同种异体胎儿组织抗原产生免疫耐受的功能。 3 展望 胎盘滋养层细胞具有如此多的功能与特性，提示滋养层细胞与癌细胞具有非常多的相似性，因为滋养层细胞生长特性处于正常细胞和肿瘤细胞之间。滋养层细胞和癌细胞都具有强大的生命力和高度增殖能力，二者还有有许多相同的基因表 达，如肿瘤特异性基因PLAC1，肿瘤细胞的侵袭过程与滋养层细胞介导的胚胎植入过程中有相似的血管形成和逃逸机制，并受到多种因子的精密调控。正是因为胎盘具有这样的特点，使得胎盘滋养层细胞对肿瘤细胞的研究有着非常重要的意义，是模拟癌细胞生长发育的良好模型，有助于我们探索肿瘤的起源和发生机制。希望未来EVT 细胞有更多的功能可以被发掘，也希望可以通过对胎盘滋养层细胞微环境的研究，对胎盘发育、胎盘疾病、癌症以及更多方面的研究产生帮助。促销作为4P之一，在管理学院及商学院的教科上有多种提法，我们还是更倾向于美国哥伦比亚南卡罗来纳大学达拉穆尔商学院的营销学教授特伦斯A 辛普的解读。促销(Sales Promotion)，指商家用以诱使批发商、零售商、消费者购买一个品牌的产品，以及鼓励销售人员积极销售此产品的激励措施。 然而促销也有广义和狭义之分，广义的促销主要指延时促销，包括免费试用、联合促销、竞赛、公关赞助、会员营销、形象推广、事件活动等，短期不太会增加销售，但对长期增量有很好的延时效果。而狭义的促销，则包括折价、附送赠品、集点换购、抽奖、渠道激励、现场展售等短期刺激销售的活动，即即时促销。在OTC终端促销当中，两种促销类型经常交互联合使用，往往以组合的形式出现，充分体现了促销手段的多样性和延展性。 促销的组织落实 资源往往集中在少数人的手里，同样，药企领导掌握了促销资源的分配权力，但是领导过度使用或者挥霍这种权利的现象在实际中很常见，且不说导致资源分配不均，结果往往适得其反无法达到预期促销效果。 因此，作为领导者，应从促销资源分配者向信用监督者作角色转变，基于市场状况给予区域充分的信用授权，让执行者因地制宜发挥才智。但授权不代表放任自流，需扮演好监督者。促销是服务终端的重要手段，通常我们会建立一些来制约，比如促销负责人制度、结案评估制度、奖惩制度以及信用等级制度，这样一来，无形中很好地解除了领导的困惑和苦恼。 OTC更要常促销 OTC终端为什么做促销，促销的目的是什么，这一点非常关键，有的促销是为了提升企业品牌的知名度和美誉度，有的促销是为了和消费者交流沟通，有的则是为了促进新品的销售，但是毫无疑问，促销的终极目标是增加销量，改变目标顾客的态度。 总的来说，增加销量的途径有两种:其一，扩大目标顾客群，包括品类转换、品牌转换。比如，在白云山和黄中药期间，我们建立的家庭过期药品回收机制，消费者拿其他厂家过期的板蓝根颗粒，就可以换购白云山牌的板蓝根，还有花城制药的空瓶空盒可换药活动，也引导消费者做品牌间的转换。 其二，则是为了提高单位消费量，包括增加消费频次，增加每次消费量。再比如，在花城制药期间，我们提 出的联合用药，把抗病毒颗粒和猴耳环胶囊捆绑销售，既实现治疗感冒又做到中药消炎的目的，无形中也提高了消费者的客单价。因此，促销的目的一定要明确，坚决不做无谓的促销。 促销的分类 结合多年终端促销的经验，我们把促销做了一些实用的分类: 主促销让促销与品牌互动，让促销传播品牌的核心价值。 商业促销应以分销为主，会议、套餐是主要形式。 KA店促销用优惠吸引购买，表达自己产品的USP，让顾客感到物超所值。。 社区促销与社区医疗站、药店等开展社区居民教育。 药店促销给老顾客优惠，刺激新顾客购买。 协同促销类似招商银行信用卡与携程旅行的横向协同。fan【】 同时，我们对多种有效促销手段进行评估，并得到以下排序，可以看出，打折是最受消费者欢迎的促销手段，其次是免费试用，买赠活动和店内海报的顾客喜好程度非常接近。 促销应直击目标人群 在OTC终端市场，企业主要影响的群体无外乎三种:消费者、店员以及药店。 如何培养忠实消费者，并且挖掘潜在消费者，也是困扰OTC企业的难题之一。我们总结了一些针对消费者的促销手段，主要包括样品派发、礼品促销、包装赠品、折价、换领(购)、直邮信息、义诊咨询及社区教育等。 白云山和黄中药各个省深入社区的健康教育就是很好的例子，OTC代表携手社区周边药店为社区中老年人宣传心脑血管保健常识，提供健康咨询和用药安全方面的服务，既拉近了企业和潜在消费者的距离，又很好地为复方丹参片做了宣传推广。 另外，DM或夹报直投也是不错的选择，利用企业的品牌效应在连锁药店DM单上告知促销信息，由药店发放给会员或周边小区的居民，或者花费很小的代价把产品的宣传单页夹在《老年报》、《社区报》里随着报纸直投到居民的信箱。 店员是OTC产品和消费者之间的桥梁，尤其是在相关部门明令禁止企业在药店派驻促销员之后，店员的作用就更加重要了，往往他们的一句话可以直接决定产品的命运。企业对店员一直是又爱又恨，因此针对店员的促销也必不可少，我们主要采用的手段有推荐率考核奖(神秘顾客活动)，小礼品、试用品分发，佣金积分，药店间的竞赛(陈列比赛、POP比赛等)，旅游，等。比较成功的例子有，药店店员有奖征文，店员通过活动可以进一步了解产品，而千人千店则是以区域为单位组织店员旅游培训。 我记得在很长的一段时期内，OTC企业里有个现象，从事商务工作的同事会看不起做OTC的，他们常常会讲，商业一次收回多少多少预付款，而OTC纯销的拉动到底能有多大。白云山和黄期中药在国内是比较早建立队伍的，在2007年左右OTC的比重可以占到25%~30%，因此说终端药店的消化能力不能轻视，我们非常注重针对药店的促销，比如购进折扣(数量折扣及现金折扣)、维价奖励(执 行厂家规定的零价)、销售奖励(完成销量任务的奖励)、品牌提升(刊登广告及大型活动联合)等，通过一些促销政策的出台，也逐渐改善了与药店间的关系，除了销量外也换回了一些比如首推、突出陈列、联合开展会员活动等资源。 总之，终端是OTC企业供应链中不可或缺的一环，而促销则是服务终端的重要手段。