心叶淫羊藿的化学成分研究

现代中药研究与实践 2005年第 19卷第 2期 Research and Practice of Ch — inese M — edicines · 药理药化 · 心叶淫羊藿的化学成分研究 王 明权 ，彭 (1．浙江省宁波市药品监督管理局，浙江 昕 ，甘祺锋。 宁波 315100；2．浙江医药高等专科学校， 浙江 宁波 315192；3．张家港林业局，江苏 张家港 215600) 摘要：目的 对心叶淫羊藿的化学成分进行研究。 技术分离、纯化化舍物 ，应用波谱鉴定结构。结果 一 39 一 方法 采用硅胶柱层析及重结晶、Sephadex I H一20等 共 分离鉴定 13个化舍物 ，它们的结构确定为黄酮苷类 7个：淫羊藿苷(Icariin)，淫羊藿苷 I(Icariside I)，淫羊藿苷 Ⅱ(IcarisideⅡ)，淫羊藿定A(Epimedin A)。淫羊 藿定B(Epimedin B)，淫羊藿定C(Epimedin C)，Icaritin一3—0一D—rhamnoside；口山酮类(Xanthone)2个：1，3，5，8一 四 羟基 口山酮，1一羟基一3，4。5，一三甲氧基 口山酮；其他 醇类 4个 ：对甲氧基苯酚(p-methoxypheno1)。二 十三烷 酸 (behenic acid)，p一谷 甾醇(p—Sitostero1)，胡萝 卜苷(daucostero1)。结论 化合物 Ⅳ、V、Ⅶ、Ⅶ、Ⅸ、x、Ⅺ为首次 从心叶淫羊藿 中分 离得到。 关键词 ：心叶淫羊霍 ；化学成分 中图分类号：R284．1 文献码 ：A 文章编号：1004—2199(2005)02—0039—04 Studies on Chemical Constituents of Epimedium brevicornum M axim WANG Ming—quan ，PENG Xin ，GAN Qi—feng (1．Ningbo Drug Administration，Ningbo 345 100，China；2．Applied Biology Department，Zhenjiang Pharmaceutical College，Ningbo 315192，China；3．Zhang jia gang Forestry Administration，215600，China) Abstract：Objective Studies on chemical constituents of E．brevicornum Maxim． Method Compounds were isolated from E．brevicornurn Maxim with column Chromatography and identified on the basis of spectral analysis．Result Thirteen compounds were isolated from E．brevicornum Maxim．These compounds were：Icariin，Icariside I，IcarisideⅡ，Epimedin A ，Epimedin B，Epimedin C，Icaritin一3一O—D— rhamnoside，1，3，5，8-tetrahydroxy xanthone，1-hydroxy一3，4，5-trimethoxy xanthone，p-methoxyphenol， behenic acid，p—Sitosterol，daucostero1．Conclusion Among them，Epimedin A，Epimedin B，Icaritin一3一 O—D—rhamnoside， 1， 3，5，8-tetrahydroxy xanthone， 1-hydroxy一3，5， 8-trimethoxy xanthone， P— methoxyphenol，behenic acid，were isolated from E．brevicornum Maxim for the fist time． Key words：Epimedium brevicornurn Maxim；Chemical Constituents 1 仪器与试药 淫羊藿药材采 自陕西 ，经鉴定为小檗科植物心 叶淫羊藿(Epimedium brevicornum Maxim．)的干燥 茎叶，凭证标本存放于中国药科大学生药学教研室。 熔点测定用 X一4型显微熔点测定仪测定 (温度未校 正)，核磁共振谱用 Bruker ACF一300型核磁共振仪 收稿 日期：2004—12 10 作者简介：王明权(1976一)，男 ，江苏人．硕士，毕业于中国药科大学 中药学院 ，研究方向为中药活性成分及质量标准研究。 测 定 (TMS为内标 )，紫外光谱及质谱用 HP一1100 型液相色谱一质谱仪测定 (LC／DAD／MSD System， ESI Mode)。Sephadex LH一20为 Pharmacia公司产 品，薄层层析及柱层析硅胶均为青岛海洋化工厂产 品，其它试剂均为分析纯。 2 提取与分离 淫羊藿药材 1O kg，用 7O 乙醇 回流提取得总 浸膏，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取 ，取乙酸 乙酯部位浸膏 300 g，进行反复硅胶柱层析 ，以氯仿一 甲醇梯度洗脱，经重结晶及 Sephadex LH一20柱纯 维普资讯 http://www.cqvip.com 化 ，得化合物 I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅷ、IX、x、Ⅺ、Ⅻ、、ⅢI。 取正丁醇部位浸膏 300 g，进行反复硅胶柱层析，以 氯仿一甲醇梯度洗脱 ，经重结 晶及 Sephadex LH一2O 柱纯化，得化合物 Ⅳ、V、Ⅵ。 3 结构鉴定 化 合物 I黄色针状结晶 (甲醇 )．mp219 C～ 220 C，喷 AICI。试 剂溶 液显 黄色 。UVXmaxnm： 350，313，27O(Me0H)。 H—NMR(DMS0一d6．TMS) 3ppm ：12．57(1H。S，5一OH)，7．91。7．88(2H。d。_『 一 9．OHz，2 ，6 一H)，7．14，7．11(2H 。d，J===9．0Hz， 3 ， 5 一H)，6．64(1H，S，6一H)．3．86(3H。S．4 一 OCH。)1．69(3H，S，4 ，-CH )，1．60(3H，S．3 ，_ CH3)。0．8O，0．78(1H，d，J一 6．0Hz．rha一6-H)。” C—NMR(DMSO—d6，TMS)：157．5(C一2)．134．8(C一 3)，178．5(C一4)，160．7(C一5)，98．3(C一6)，161．6(C一 7)，108．5(C一8)，153．2(C一9)，1O5．8(C一10)．122．3 (C—l )，130．7(C一2 ，6 )，114．3(C一3 。5 )，159．3(C一 4 )，21．6(C一1”)，122．4(C一2”)，131．3(C一3 )，25．6 (C一4”)，18．0(C一5”)，55．7(C一4 一OCH )，1OO．8(Glc— C1)，73．5(Glc—C2)，76．8(Glc—C。)，69．9(Glc—C )， 77．4(Glc—C5)，60．8(Glc—C6)，1O2．2(Rha—C )．70．5 (Rha—C2)，70．9(Rha—C3)，71．3(Rha—C )．70．3 (Rha—Cs)，17．6(Rha—C )。上述光谱数据与文献报 道淫 羊 藿苷 一 致，故 鉴 定此 化 合 物为 淫 羊 藿苷 (Icariin)。 化合物 Ⅱ黄 色针状结 晶 (甲醇 )，mp206 C～ 207 C ，Uv~max(nm)：370，320，268(MeOH)。1H— NMR (DMSO—d 6，TMS)3ppm ：12．44( H ，S，5一 oH)，9．65(1H，S，3-OH)。8．1 7。8．14(2H ，d，I一 9．0Hz，2 ，6 一H)，7．16，7．13(2H，d，J一 9．0Hz， 3 ，5 一H)，6．60(1H，S，6-H)。5．37(1H，S，Glc一1一 H)，3．86(3H ，S，4 OCH3)，1．77(3H，S，4"-CH )， 1．63(3H， S， 3"-CH3)。” C—NMR (DM SO—d ， TM S)：147．1(C一2)，136．4(C一3)，176．7(C一4)． 16O．4(C-5)，97．7(C一6)，161．0(C一7)，108．4(C一8)． 153．0(C一9)，1O4．7(C一10)，122．6(C一1 )，129．7(C一 2 ，6 )，l14．4(C一3 ，5 )，158．6(C一4 )。21．7(C一1 )． 122．6(C一2”)，131．5(C一3 )，25．8(C一4 )，18 ． 2(C一 5”)，55．7(C一4 一OCH3)，1OO．7(Glu—C )，73 ． 5(G1u— C2)，76．7(Glu—C3)，69．8(Glu—C )，77．4(G1u—C )， 6O．8(Glu—Cs)。上述光谱数据与文献报道淫羊藿次 苷 I一致 ，故鉴定此化合物为淫羊藿次苷 I(Icariin 现代中药研究与实践 2005年第 1 9卷第 2期 Research and Practice of C hinese Medicines I)。 化合 物 Ⅲ 色针 状结 晶。mp207 (I、～208 (、， UvXmax(nm )：348，308，268(M e()H )。 1H— M R (DM SO—d 。TM S)3ppm ：12．44(1H。s．5-OH )。 10．91(1H。S，7-OH)。7．88．7．85(2H。d，J一 9．0 HZ，2 ，6 一H)．7．14，7．11(2H ．d． ．I一9．OHZ。3 ．5 一 H)．6．33(1H，S，6-H)，5．28(1H，S，rha一1一H)，3． 86(3H．S。4 一OCH )．1．68(3H．s．4”CH、)，1．63 (3H，s．3”一CH。)．0．8O．0．78(3H．d。J一 6Hz)。 13C—NMR (DMSO d6，TMS)：1 56．1(C 2)．134．6 (C一3)，178．2(C一4)，161．4(C一5)，98．5(C一6)．161．9 (C一7)．1O6．1(C一8)．1 54．0(C一9)．1 O4．4(C一1 0)， 122．6(C一1 )．130．6(C一2 。6 )，1 1 4．2(C一3 ，5 )． 159．0(C一4 )，21．4(C 1”)．1 22．5(C一2”)，131．2(C一 3”)．25．6(C一4 )．18．0(C 5 )，55．7(C 4 ()CH、)， 1O2．1(rha—C )．70．5(rha—C。)，70．83(rha—C )． 71．3(rha—C4)，70．3(rha—C s)，17．7(rha C )。上述光 谱数据与文献报道淫羊藿次苷 II一致 。故鉴定此化 合物为淫羊藿次苷 II(Icariin II)。 化合物 Ⅳ 黄色粉末 。rap206～207(、．UvXmax (Flm )：352．317。272(MeOH )。 1H MR (DMSO— d 6，TM S)3ppm ：12．61(1H，s，5()H)。7．93。7．9O (2H ．d，J一 9．0Hz．2 ，6 一H)，7．1 8．7．15(2H．d．J = 9．OHZ，3 ，5 H)．6．64(1H．s．6-H)．3．86(3H ． s．4 ()CH 3)1．70(3H，s．4 CH、)1．62(3H．s．3 一 CH )。0．80，0．78(2H．d，J一 6．0HZ，rha一6 H) 1 C— MR(DMSO—d ，TMS)：157．4(C 9)．13 ． 3(C 3)，1 78．6(C一4)，159．4(C 5)，98．5(C一6)，160．8(C 7)，1O8．7(C一8)，153．3(C一9)，106．0(C 10)。1 22． 1 (C一1 )，130．8(C一2 ，6 )，114．4(C 3 。5 )。157．1(C一 4 )，21．7(C一1 )，122．4(C一2”)，131．5(C一3”)．25． (C一4 )， 17．7(C一5”)，55．8(C—l () H )，1 00．9 (Glcl—C1)，73．7(Glcl—C2)。76．j((；lcl—C )．7O ． O (Glcl—C4)，77．5(Glcl—Cj)，61．O(Glc 一C )；1 O6 ． O (Glc2一C1)，74．1(Glc 2一C 2)，77．j(Glc：一C )．69 ． 6 (Glc2一C4)，77．0(Glc 2一Cj)，6O．8(Glc 一C )；1 O1 ． (Rha C )，81．5(Rha—C )，7O．4(Rha—C )，72 ． O (Rha—C )，7O．8(Rha—Cj)，17．7(Rha C．；)。上述光谱 数据与文献报道淫羊藿定 A一致 ．故鉴定此化合物 为淫羊藿定 A(Epimedin A)。 化 合 物 V 黄 色 粉 末，mp2()6 (～ 2O7 (、， UV max(nm )：352，317，272(Me()H )．1H—NM R 维普资讯 http://www.cqvip.com 现代中药研究与实践 2005年第 1 9卷第 2期 Research and Practice of Chinese M edicines (DM SO—d ，TM S)3ppm ：12．61(1H ， s， 5-OH )， 7．93。7．90(2H，d，J一9．oHz，2 ，6 H)．7．18，7． 15(2H ，d，J一9．OHz，3 ，5 H)，6．64(1H，s，6 H)，3．86(3H ，s，4 OCH )1．70(3H ，s，4"-CH ) 1．62(3H，s，3”CH )。O．8O，O．78(2H，d，J一6． OHz，rha一6-H)。 。C—NMR(DMSO—d6，TMS)：157． 4(C 2)。134．9(C一3)，178．5(C一4)，160．7(C一5)，98． 4(C一6)，161．8(C一7)，1O8．6(C 8)，153．2(C 9)， 1O6．6(C一1O)，122．4(C一1 )。13O．9(C一2 ，6 )，114．4 (C一3 ，5 )，159．3(C 4 )， 21．6(C一1”)，122．2(C 2”)，131．3(C一3”)，25．7(C一4”)，18．1(C一5”)， 5．7 (C一4 一OCH )，1OO．8(Glu—C )，73．6(Glu C，)，76．8 (Glu—C3)，69．9(G1u—C1)，71．8(rha C )，77．4(G1u— C )，6O．8(Glu—C )，1O1．2(rha C )，81．6(rha—C。)， 7O．5(rha—C 3)，70．6(rha—Ci)，17．6(rha—C6)，1O5．7 (xyl—C1)，73．6(xyl—C 2)，76．4(xyl—C3)，77．4(xyl— C )，7O．6(xyl—Cj)，66．0(xyl—C )。上述光谱数据与 文献报道淫羊藿定 B一致，故鉴定此化合物为淫羊 藿定 B(Epimedin B)。 化合物 Ⅵ 黄色粉末 ，mp206～207 C，UvXmax (nm)：351，317，272(M eOH)。1H M R(DM S()d ， TM S)Sppm ：12．61(1H ，s，5-OH )，7．90，7．87(2H ． d，J=9．OHz，2 ，6 一H)，7．14，7．11(2H。d，J一9．o Hz，3 ，5 一H)，6．64(1H ，s，6-H )，3．86(3H ，S，4 一 OCH3)，1．67(3H，s，4"-CH )，1． 9(3H，s，3”一 CH3)。O．8O，O．78(2H，d，J一6．OHz，rha一6-H)。 。 C—NMR(DMSO—d ，TMS)：157．4(C 2)，134．8(C一 3)，178．3(C一4)，159．2(C 5)，98．3(C一6)，160．7(C一 7)，1O8．6(C一8)，153．1(C一9)，1O5．7(C一10)，1 22．2 (C一1 )，13O．6(C一2 ，6 )，114．2(C一3 ，5 )，158．1(C一 4 )，21．5(C一1”)，122．2(C一2”)，131．2(C一3”)，25．6 (C一4”)， 17．9(C一5”)，55．5(C一4 ()CH )，100．7 (Glu—C )，73．4(G1u—C，)，75．7(Glu—C )，69．8(Glu— C 4)，76．7(Glu—C )， 6O．7(Glu C )；1O1．8(rha1一 C】)，77．3(rha1一C。)。70．5(rha1一C． )，71．5(rha1一 C1)，7O．2(rha1-Cj)，17．4(rha1一C )；100．9(rha2 一 C1)，72．1(rha2 C，)。72．0(rha2一C )，73．5(rha2一 C 4)，66．9(rha2一C )，17．6(rha2一C 6)。上述光谱数据 与文献报道淫羊藿定 C一致，故鉴定此化合物为淫 羊藿定 C(Epimedin C)。 化合物 Ⅶ 黄色粉末，mp206～207 C，UvXmax (nm)：348，308，268(MeOH )。1H— MR (DMSO d ，TM S)3ppm ：12．50(1H ，s，5 OH )。 7．95。7．92 (2H。d。J一9．OHz，2 。6 一H)，7．11，7．08(2H，d，J 一 9．OHz，3 ，5 一H )。 6．32(1H ，s，6 H )，5．29(1H ， s，rha 1一H )，3．85(3H ，s，4 一()CH )，2．72(2H ． ITI。2"-H )，1．54(2H ，ITI， 1”一H )，1．1 6(3H 。s，4”一 CH )，1．15(6H，s，3u_CH )，O．8O，O．78(2H，d，J 一 6．OHz，rha一6-H)。13C—NM R(DM SO—d6，TMS)： 156．6(C一2)，134．5(C一3)，1 78．1(C 4)，162．6(C一 5)．98．7(C一6)，161．5(C一7)，1O7．4(C一8)，153．9(C一 9)，1O4．1(C一1O)，1 22．7(C一1 )，13O．7(C一2 ，6 )， 114．2(C一3 ，5 )，158．8(C一4 )，17．6(C 1”)，43．1(C一 2 )，69．0(C一3”)，29．3(C一4”)，29．2(C一5”)，55．6(C一 4 oCH )，1O2．1(rha—C )。7O．5(rha—C )，70．8(rha— ClI)，71．3(rha—C 4)，7O．3(rha—Cj)。17．6(rha—C )。上 述 光 谱 数 据 与 文 献 报 道 icaritin一3一O D— rhamnosideC一致，故鉴定此化合物为 icaritin一3 O— D rhamnoside 化合物Ⅷ 无色针晶， H—NMR(CD COCD )， TMS)3ppm：7．98，7．95(2H，d，J一 8．7Hz。3，5 H)，7．O2，7．0(2H，d，J一 8．7Hz，2，6-H)，3．86 (3H 。s)。 C NMR (CD COCD )：168．4(C 4)， 1 65．O(C一1)，133．1(C一3，5)，1l5．1(C一2，6)。上述光 谱数据与文献报道对甲氧基苯酚一致 ，故鉴定此化 合物为 p—methoxypheno1。 化 合 物 Ⅸ 淡 黄 色 针 晶，1H NMR(CI)CI ， TMS)3ppm：12．04(1H，s，1一oH)，11．32(1H，s， 8一)H)，7．22(1H，d，J一 8．8Hz，6-H)，6．58(1H， d，J一8．8Hz，7-H)，6．49(1H，d。J一2．OHz，4一H)。 6．27(1H，d，J一2．OHz，2-H)。13C—NMR(CDCI )： 184．0(C一1O)，166．1(C 3)，162．5(C 1)，157．5(C一 12)，152．6(C一8)，143．4(C一13)，136．8(C一5)，123．2 (C一6)。1O8．9(C一7)，1O7．3(C一9)，1 O1．4(C一1 1)。 98． (c一2)，94．5(C一4)。上述光谱数据与文献报道 1，3，5，8一四羟基口山酮一致 ，故鉴定此化合物为 1，3， 5，8 tetrahydroxy xanthone 化合物 x 黄色针晶，1H—NMR(CDCL ，TMS) 3ppm：1 2．75(1H，s，1-OH)，7．78(1H，dd。J一 7．9，1．5Hz，8-H)，7．27(1H，t，J一7．9Hz，6-H)，7． 20(1H，dd，J— J一7．9，1．5Hz，7-H)，6．58(1H。?， 2一H )，4．02(3H ，s， 5-()CH3)，4．00(3H ． s。 4一 ()CH 3)， 3． 93 (3H， s， 3 OCH ) 。 C—NMR (CDCI )：181．O(C一1O)，159．9(C一3)，1 54．0(C 5)， 维普资讯 http://www.cqvip.com 一 42 — 153．1(C一1)，148．2(C一13)，146．2(C一12)，131．8(C一 4)，123．5(C一7)。121．0(C一11)，116．5(C一8)，115．4 (C一6)，1O4．2(C一9)，90．9(C一2)，60．8(C一3一oCH 3)， 56．4(C一4，5一OCH。)。上述光谱数据与文献报道 1一 羟基一3，4，5，一三 甲氧基 口山酮一致 ，故鉴定此化合物 为 1-hydroxy一3，5，8-trimethoxy xanthone。 化合物 xI 白色粉末(石油醚一乙酸乙酯)，加 热 易熔化 ，1H—NMR3ppm：2．35(2H，t，J一7．86)， 1．62(2H，m)，1．25(38H，S)，0．88(3 H，t)。上述光 谱数据与文献报道二十三烷酸一致，故鉴定此化合 物为 behenic acid。 此 外 ，从 淫 羊 藿 中 分 离 得 到 一谷 甾 醇 (j3一 sitostero1)和胡萝 卜苷(daucostero1)。 参考文献 r1] 李文魁，张如意，肖培根．朝鲜淫羊藿化学成分的研究[门．中 现代 中药研究与实践 2005年第 1 9卷第 2期 Research and Practice of Cbi ! ! ! 草药 ，1995，26(9)：453． [21 梁海锐 ，阎文玫 ，李 良，等．粗毛淫羊藿化学成分的研究[J]． 中国中药杂志，1993，18(11)：677． [3] 郭宝林，余竟光，肖培根．川鄂淫羊藿化学成分的研究[J]．中 国中药杂志，1996，21(6)：353． [4] Li w K，Zhang R Y，Xiao P G．Flavonoids from Eplmedum wanshanenseEJ]．Phytochemistry、1 996、43(2)：527． Es] 廖时宣，朱洪平，迟 强 ，等．心叶淫羊藿的化学成分研究[J]． 第二军医大学学报，1994，15(3)：268． [6] 郭宝林，余竟光，肖培根．淫羊藿化学成分的研究[J]．华西药 学杂志，1996，21(5)：290． [7] 郭宝林 ，余竟光 ，肖培根．淫羊藿化学成分的研究[J]．华西药 学杂志，1996，11(5)：201． Es] 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group．Based on the same treatment method，the control group is treated with Yuquan pil1 ． We observe UAE，O{1-MG NAG enzyme，82一MG，Ccr and other injury of kidney indexes，and observe FBG and GHB levels before and after the treatment respectively and then compare them．Result Manv injuries 收稿日期：2005—2—22 维普资讯 http://www.cqvip.com