高效液相色谱法测定菠萝果实维生素 C含量
张秀梅 � 杜丽清 � 谢江辉 � 弓德强 � 陈佳瑛 � 李伟才
(中国热带农业科学院南亚热带作物研究所, 广东湛江 � 524091)
� � 收稿日期: 2007- 01- 23
� � 作者简介: 张秀梅 ( 1975- ) 女, 硕士, 助理研究员, 从事果树栽培与生理研究。
摘 � 要 � 本研究用高效液相色谱法测定菠萝果实的维生素 C含量。系统采用 V enusilXBP- C18柱
( 4�6 � 250mm, 5�m ), 柱温 35 , 以 0�2%偏磷酸水溶液作流动相, 流速 1m l! m in- 1,
波
长 240 nm, 维生素 C浓度在 0�1 ~ 1�0 mg! m l- 1范围内有良好的线性关系。该方法回收率
99�89%,
偏差 0�91, 变异系数 2�08%, 操作简便、灵敏、可靠, 适用于菠萝维生素 C含量
的测定。
关健词 � 高效液相色谱法; 菠萝; 维生素 C
Determ ination ofV itam in C in Pineapple by H igh Perform ance
Liquid Chromatography
ZHANG X iu- me i� DU L i- q ing� X IE Jiang- hu i� GONG D e- qiang� CHEN Jia- y ing� LIW e i- cai
( South Subtrop ical C rop Research Institute, Chinese A cademy of T rop ica lAgricultural S ciences,
Zhanj iang 524091, Guangdong Ch ina)
Abstract� A method for determ ination of V itam in C in p ineapple w as studied by high performance liqu id
chromatography (HPLC) . VenusilXBP- C18 co lumn ( 4�6 mm � 250 mm, 5�m ) was used and mobile
phasew as 0�2% HPO3 w ith f low rate of 1m l! m in- 1. The temperature o f the co lumnw as 35 . The e lu�
ant was mon itored at�max = 240nm . V itam in C ( range of 0�1 to1�0 mg! m l- 1 ) had good linearity ( r=
0�9998) . The average recovery of samp lew as 99. 89% w ith standard dev iation o f 0�91 and varia tion co�
effic ien t o f 2�08%. The method proved to be a simple, rapid and reliable w ay to determ ine the content of
V itam in C in pineapple.
Key words� HPLC; Pineapp le; V itam in C
� � 维生素 C具有很高的医用价值, 是维持机体
正常生命活动所必需的一类小分子有机化合物, 可
参与体内氧化还原反应, 具有解毒作用, 若严重缺
乏会引起坏血病。但人体自身不能合成维生素 C,
必须从食物中摄取 [ 1]。维生素 C广泛存在于新鲜
水果、蔬菜中, 一般采用比色法、荧光法等测
定 [ 2] , 操作繁琐, 近年来发展用高效液相色谱法
测定 [ 3- 5]。本文利用高效液相色谱法, 以低浓度的
偏磷酸作为流动相, 分析菠萝的维生素 C含量,
取得了理想的效果。
1� 材料与方法
1�1� 材料
菠萝样品采自中国热带农业科学院南亚热带作
物研究所菠萝种质圃。仪器采用 PE高效液相色谱
仪 (美国 PE公司制造 ), 配有 UV /V IS检测器,
试剂有维生素 C、偏磷酸 (国产分析纯 )。 Se�
ries200色谱柱为 Venusil XBP - C18柱 ( 4�6 � 250
mm, 5�m); 流动相为 0�2%偏磷酸水溶液; 流速
1m l! m in- 1, 柱温 35 , 进样量 10�0 � ,l 检测波
长 240 nm。
20
福建果树 !总第 140期 � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � Fu jian Fruits 2007�1!试验研究
1�2� 方法
1�2�1� 标准溶液的配制
称取维生素 C标准样品 0�1000 g, 转移至
100m l容量瓶 中, 用双 蒸水 定容, 得到 1�0
mg! m l- 1的维生素 C标准溶液。
1�2�2� 样品处理
参考 N isperos- Carriedo等的方法 [ 6]。准确称
取菠萝果肉 1�00 g, 用 5 m l 0�2%偏磷酸冰浴研
磨, 10000 g离心 15 m in, 残渣加入 4 m l 0�2%偏
磷酸再提取, 合并上清液, 定容至 10 m ,l 经 0�45
�m滤膜过滤后待测。每个样品重复 5次。
2� 结果与讨论
2�1� 色谱分析条件的选择
维生素 C在 240 nm波长时有最大吸收峰, 故
本实验以 240 nm作为检测波长。以 0�2%偏磷酸
为流动相, 在此条件下, 维生素 C能够得到很好
的分离。标样和菠萝样品的色谱见图 1和图 2。
图 1� 标样的色谱
图 2� 样品的色谱
2�2� 标准曲线的制作
分别吸取标准溶液 1m l、2 m l、 4m l、6 m l、 8
m ,l 各自定容至 10 m ,l 从中分别吸取 10�0 �l进
样分析, 以峰面积 ( mv ) 为纵坐标, 标样浓度
(mg! m l- 1 ) 为横坐标, 绘制标准溶液曲线, 计算
线性回归方程的回归系数和截距 [ 4 ]。见图 3。
图 3� 维生素 C的标准曲线
2�3� 精密度
待测的菠萝果肉提取液重复进样 5次, 测定维
生素 C含量并计算变异系数, 以考查其测定精密
度, 结果见
1。
表 1� 菠萝果肉维生素 C测定的精密度 ( n= 5)
样品号 测定值
(mg! ( 100g) - 1 )
平均值
(m g! ( 100g) - 1 ) 标准偏差
变异系数
(% )
1 42�7
2 45�2
3 43�6 43�8 0�91 2�08
4 44�0
5 43�5
2�4� 回收率
在已测的样品中准确加入标准品 0�1 mg, 根
据加入标准品的量与检出量计算回收率, 重复 3
次, 平均回收率为 99�89%。见表 2。
表 2� 维生素 C的回收率
加入量
( mg)
检出量
(m g)
回收率
(% )
平均回收率
(% )
0�1 0�1019 101�9
0�1 0�1018 101�8 99�89
0�1 0�0960 96�0
2�5� 样品的测定
表 3� 不同菠萝品种的维生素 C含量 ( n= 5)
品种 维生素 C (m g! ( 100g) - 1 )
无刺卡因 18�58
巴厘 26�35
台农 11号 10�82
� � 按照上述色谱条件, 将不同品种的菠萝样品溶
液分别进样 10�0 �l进行液相色谱分析, 测定维生
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福建果树!总第 140期 � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � Fujian Fru its 2007�1!试验研究
素 C的色谱峰面积, 代入标准曲线计算出维生素
C含量, 结果见表 3。
3� 结论
本方法无需特殊试剂, 样品简单, 操作简便,
可减少维生素 C的损失, 避免 2, 6-二氯靛酚法
需脱色的麻烦, 结果重现性好, 准确度及回收率
高。可用于菠萝及其制品中维生素 C含量的分析,
具有实用价值。
参考文献
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1127- 1130
绿色食品甜春桔柚产地环境质量评价
程文亮1 � 周晓音2 � 叶伟其 1 � 沈子才 3 � 朱志东 4
(
1浙江省丽水市农业科学研究所, 浙江丽水 323000; 2浙江省丽水市农业局;
3浙江省丽水市环保站; 4浙江省庆元县林业局 )
� � 收稿日期: 2006- 12- 07
� � 基金项目: 浙江省科技攻关项目 ( 2005C32042)
� � 作者简介: 程文亮 ( 1968- ) , 男, 高级农艺师, 从事果树科研与推广研究。
摘 � 要 � 监测了庆元县 ∀志东 # 牌甜春桔柚基地生产示范区灌溉水、土壤及大气的质量, 并对
其进行评价。结果表明, 产地的 8项灌溉水质量指标、 6项土壤质量指标及 4项大气质量指标均
未超过国家 《绿色食品产地环境技术条件》的限制标准, 完全符合绿色食品 ( A级 ) 甜春桔柚
生产的产地环境质量要求。
关键词 � 绿色食品; 甜春桔柚; 产地环境质量评价
Environm entalQuality Evaluation of Production Area
for Green Food Spring- sweet Tangelo
CHENGW en- liang
1 � ZHOU X iao- yin2 � YE W ei- q i1 � SHEN Zi- ca i3 � ZHU Zh i- dong4
( 1 L ishui Agr iculture Institute of Zhejiang, Lishu i 323000, Zhej iang China; 2 L ishui Agr iculture Bureau of Zhejiang;
3 L ishuiM onitoring S tation of Environm ental P ro tection of Zhejiang; 4 Q ingyuan F ores try Bureau of Zhejiang )
Abstract� The qua lity o f irrigation wa ter, so il and atmosphere w eremonitored and evaluated in Q ingyuan
County production demonstrat ion plot o f ∀ Zh idong# brand of spring- sw eet tange lo. The resu lts show ed
that e ight irrigat ion w ater quality indexes, six so il qua lity indexes and four atmosphere quality indexesw ere
in the rage of ∀ Environm enta l techn ical term s fo r green food product ion area#, w hich w as completely ac�
corded w ith the standard as green food spring- sw eet tange lo production base.
Key words� Green food; Spring- sw eet tangelo; Env ironmenta l quality eva luation o f production area
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