茶渣中蛋白质酶法提取工艺

© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 　第 25 卷第 6 期2006 年 11 月 　 　 　　　　 　 食 品 与 生 物 技 术 学 报 Journal of Food Science and Biotechnology 　 　 　　　　 Vol. 25 　No. 6 Nov. 　2006 　文章编号 :167321689 (2006) 0620007206 　　收稿日期 :2006209201 ; 　修回日期 :2006209219. 　　基金项目 :浙江省科技计划项目 (2004C24007) . 作者简介 : 沈莲清 (19462) ,女 ,江苏苏州人 ,教授、博士研究生导师. 茶渣中蛋白质酶法提取工艺 沈莲清1 , 　黄光荣2 , 　王向阳1 , 　王忠英1 (1. 浙江工商大学 食品生物与环境学院 ,浙江 杭州 310035 ; 2. 浙江科技学院 生物与化学工 程学院 ,浙江 杭州 310023) 摘 　要 : 研究了蛋白酶法提取茶叶加工后茶渣中蛋白质的工艺。结果显示 ,碱性蛋白酶和复合蛋 白酶提取效果较好 ;碱性蛋白酶法提取的最佳工艺为酶加量 4 %、液固比 35 ∶1 (mL/ g) 、提取时间 4 h ,提取率可达 3412 % ;复合蛋白酶法提取的最佳提取工艺为酶加量 3 %、液固比 35 ∶1 (mL/ g) 、 提取时间 4 h ,提取率可达 1816 % ;双酶法提取中 ,采用先复合蛋白酶 ,后碱性蛋白酶 ,提取效果较 好 ,并且碱性蛋白酶占总酶加量比例对提取率的影响较大 ,当碱性蛋白酶占 25 %时 ,提取率达到最 大 ,为 4211 % ;双酶法提取的最佳提取工艺为 p H 810 ,温度 60 ℃,酶加量 4 % ,提取率可达 4718 %。 关键词 : 茶叶 ;蛋白质 ;蛋白酶 ;提取 ;正交 中图分类号 : TS 272. 4 文献标识码 : A Extraction of Protein from Tea Sullage by Protease SH EN Liang2qing1 , 　HUAN G Guang2rong2 , 　WAN G Xiang2yang1 , 　WAN G Zhong2ying1 (1. College of Food Science , Biotechnology and Environment Engineering , Zhejiang Gongshan University , Hang2 zhou 310035 ,China ; 2. School of Biological and Chemical Engineering , Zhejiang University of Science and Technol2 ogy , Hangzhou 310023 , China) Abstract :The ext raction process of p rotein f rom tea sullage by protease was investigated. The result s showed t hat alcalase and p rotamex were t he best p roteases. The highest ext raction rate of p rotein reached 3412 % at t he optimal ext raction conditions : 4 % alcalase , 35 ∶1 ration of water to solid and for 4 hours. And also the highest ext raction rate of p rotein reached 1816 % at optimal ext raction conditions :3 % protamex , 35 ∶1 ration of water to solid and for 4 hours. The best double p roteases ext raction process of p rotein f rom tea sullage was first ext racted by protamex , t hen by alcalase. The percent of cucalase on protamex plays key role on t he ext raction rate , and t he highest ext raction rate reached 4211 % when alcalase addition ratio was 25 %. The optimal ext raction conditions for double p roteases p rocess were p H 810 , 60o C and 4 % p roteases addition. Key words : tea ; p rotein ; p rotease ; ext raction ; ort hogonal design 　　中国是产茶大国 ,茶叶资源十分丰富 ,但在茶 叶生产过程中产生的大量茶末、修剪叶、甚至滞销 的粗老茶 ,大部分没有进一步加工而当作废料处 理 ;同时速溶茶、茶饮料、茶多酚等企业也产生大量 © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 的茶渣 ,若这些茶渣不被再利用 ,不仅造成资源浪 费 ,而且严重污染生态环境。因此深入研究茶叶及 其加工产生的茶渣的深加工和综合再利用 ,具有良 好的社会和经济效益。近年来 ,国内外比较注重对 茶叶水溶性成分的研究与应用 ,但对非水溶性茶叶 蛋白质的研究却少有报道[1 - 2 ] ,国内仅有几篇分别 采用碱法和 NaCl 溶液提取的初步研究报道[3 - 4 ] 。 另据初步研究报道 ,茶叶蛋白质和茶多酚一样具有 较强的保健功能[ 5 ] ,如茶叶蛋白质具有抵抗突变[628 ] 和降血脂效果 ,对动脉粥样硬化及冠心病可能有一 定的预防作用[3 ] 。目前 ,对茶渣的利用一般是作为 家禽用饲料[ 9 - 10 ] ,而对茶渣中含有约 20 %～30 % 的蛋白质却没有很好地研究。采用碱法提取茶叶 蛋白质已有文献报道[3 ,11 ] ,但碱法提取茶叶蛋白质 有其缺点 ,如会改变茶叶蛋白质的营养学特性 ,使 蛋白质的半胱氨酸和丝氨酸结合形成赖2丙氨酸 ,这 种物质不但有毒 ,而且还会引起营养物质的损失。 利用蛋白酶提取茶渣中的蛋白质 ,不仅能提高和改 善蛋白质的溶解性、乳化性、起泡性、粘度等 ,还能 避免碱法水解对氨基酸的破坏和变旋 ,从而保证蛋 白质的质量[12 ] 。文中将对利用蛋白酶提取茶叶蛋 白质的工艺进行探讨 ,为茶渣的综合利用提供理论 支持。 1 　与方法 1. 1 　实验材料 茶渣 (自制) :市售杭州绿茶 ,开水浸泡 3 次 ,每 次 15 min ,烘干 ,粉碎 ,过 60 目标准筛 ,得过筛茶 渣。 复合风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和 复合蛋白酶均购自丹麦诺和诺德生物制剂有限公 司。 1. 2 　主要实验仪器与设备 721 型分光光度计 ,上海第三分析仪器厂制造 ; FA1004 型电子分析天平 ,上海精科天平制造厂制 造 ; TDL240B 离心机 ,北京亚力恩科学器材公司制 造 ;SQ211 - 9B 多功能食品加工机 ,上海帅佳电子 科技有限公司制造 ; 101A - 2 型电热鼓风干燥箱 , 上海市实验仪器总厂制造 ; SHZ282 型恒温振荡器 , 苏州国华电器有限公司制造。 1. 3 　提取基本工艺 茶渣 →加水配成一定的液固比 (质量体积) → 调节适当的 p H、温度 →加酶提取 →加热钝化酶 → 离心分离 →蛋白质提取上清液 →测定蛋白质含量。 在调整 p H 后加入蛋白酶 ,并迅速搅匀 ,反应中 严格控制温度和 p H (公差 : 温度 ±1 ℃, p H ± 0105) 。终止时沸水浴灭酶 15 min , 然后离心 (10 000 r/ min , 10 min)分离 ,测上清液中蛋白质含 量 ,计算提取率。 114 　实验方法 11411 　不同种类的蛋白酶对茶渣中蛋白质提取率 的影响 　分别选用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合 蛋白酶和复合风味蛋白酶 ,在各自最适温度和 p H 条件下 ,以添加量 2 %、液固比 30 ∶1 ( mL/ g) ,提取 2 h ,测定蛋白质的提取率。 11412 　碱性蛋白酶对茶渣中蛋白质提取率的影响 　分别试验碱性蛋白酶添加量从 1 %～6 % (固定 p H 715 , 温度 55 ℃, 时间 2 h , 液固比 30 ∶1 (mL/ g) ) ,液固比从 20～45 ∶1 (固定 p H 715 ,温度 55 ℃,时间 2 h ,酶加量 2 %) 和提取时间从 1～6 h (固定 p H 715 ,温度 55 ℃,液固比 30 ∶1 ( mL/ g) , 酶加量 2 %) ,对茶渣中蛋白质提取率的影响。在单 因素实验基础上选择液固比、酶加量和提取时间作 3 因素 3 水平 L 9 (33 )正交实验 ,重复 3 次 ,优化提取 参数 (见 1) ,以蛋白质提取率为考核指标。 表 1 　碱性蛋白酶正交实验因素水平表 Tab. 1 　Factors and levels in the orthogonal array with alca2 lase 水 平 因 素 A 液固比/ (mL/ g) B 酶加量/ % C 提取时间/ h 1 30 3 3 2 35 4 4 3 40 5 5 11413 　复合蛋白酶对茶渣中蛋白质提取率的影响 　分别试验复合蛋白酶添加量从 1 %～6 % (固定 p H 615 , 温度 55 ℃, 时间 2 h , 液固比 30 ∶1 (mL/ g) ) ,液固比从 20～45 ∶1 (固定 p H 615 ,温度 55 ℃,时间 2 h ,酶加量 2 %) 和提取时间从 1～6 h (固定 p H 615 ,温度 55 ℃,液固比 30 ∶1 ( mL/ g) , 酶加量 2 %) ,对茶渣中蛋白质提取率的影响。在单 因素实验基础上选择液固比、酶加量和提取时间作 3 因素 3 水平 L 9 (33 )正交实验 ,重复 3 次 ,优化提取 参数 (见表 2) ,以蛋白质提取率为考核指标。 11414 　双酶法提取对茶渣中蛋白质提取率的影响 　选择碱性蛋白酶和复合蛋白酶为研究对象 ,采用 两种酶解工艺 ,即一种是茶渣先用复合蛋白酶提取 (加酶量 3 % ,液固比 35 ∶1 ( mL/ g) ,提取时间 4 h , p H 715 ,温度 55 ℃) ,后灭酶 ,然后继续用碱性蛋白 8 食 　品 　与 　生 　物 　技 　术　学 　报 　　　　　　　　　　　　第 25 卷 　 © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 酶提取 (酶加量 4 % ,液固比 35 ∶1 ( mL/ g) ,提取时 间 4 h , p H 715 ,温度 55 ℃) ,测定蛋白质的总提取 率 ;第二种工艺是茶渣先用碱性蛋白酶提取 ,然后 灭酶 ,继续用复合蛋白酶提取 ,测定蛋白质的总提 取率。在确定较优的双酶解步骤后 ,按碱性蛋白酶 占总蛋白酶加量比例从 20 %～80 % ,研究两者配比 对蛋白质总提取率的影响。在确定较优的双酶解 步骤和碱性蛋白酶占总酶加量的比例后 ,为优化其 它提取条件 ,固定反应体系液固比 35 ∶1 ( mL/ g) , 提取时间 4 h ,碱性蛋白酶与复合蛋白酶酶加量比 例 1 ∶3 ,采用 L 9 (33 ) 正交实验重复 3 次 ,研究双酶 复合提取条件中 p H 值、温度和酶加量对茶渣中总 蛋白质提取率的影响 ,实验设计见表 3。 表 2 复合蛋白酶正交实验因素水平表 Tab. 2 　Factors and levels in the orthogonal array with prota2 mex 水 平 因 素 A 液固比/ (mL/ g) B 酶加量/ % C 提取时间/ h 1 30 2 2 2 35 3 3 3 40 4 4 表 3 　双酶复合正交实验因素水平 Tab. 3 　Factors and levels in the orthoyonal array with double protenses 水 平 因 素 A p H 值 B 温度/ ℃ C 酶加量/ % 1 710 50 3 2 715 55 4 3 715 60 5 115 　测定方法 茶渣中蛋白质含量测定采用考马斯亮蓝染色 法[13 ] 。 2 　结果与讨论 211 　不同种类的蛋白酶对茶渣中蛋白质提取率的 影响 试验了中性蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶 和复合风味蛋白酶在各自最适水解条件下对茶渣中 蛋白质提取率的影响 ,结果见表 4。可知 ,碱性蛋白 酶效果最好 ,提取率达 1813 % ,其次是复合蛋白酶。 复合风味蛋白酶效果较差 ,可能是因为其对完整大分 子蛋白质的水解能力较差 ,水解产物粘稠 ,对原料的 利用率低 ,因此单独使用不利于蛋白质的提取。 表 4 　不同种类的蛋白酶对茶渣中蛋白质提取率的影响 Tab. 4 　Effect of different enzymes on the protein extraction rate 酶种类 提取条件 提取温度/ ℃ 提取 p H 添加量/ % 液固比/ (mL/ g) 时间/ h 蛋白质 提取率/ % 中性蛋白酶 50 710 2 30 ∶1 2 9148 碱性蛋白酶 60 810 2 30 ∶1 2 18131 复合蛋白酶 55 715 2 30 ∶1 2 10195 复合风味蛋白酶 50 610 2 30 ∶1 2 7175 212 　碱性蛋白酶对茶渣中蛋白质提取率的影响 21211 　单因素分析 　碱性蛋白酶酶加量、液固比 和提取时间对茶渣中蛋白质提取率的影响如图 1 所示。可知 ,在碱性蛋白酶酶加量较低时提取率随 加酶量的增加而提高 ,由最初 015 %酶加量时的 1019 %增加到 4 %时的 22141 % ,而当酶加量继续增 加时 ,提取率并未增加 ,这可能是由于酶加量增加 到一定的程度时 ,对不溶性茶叶蛋白质的水解能力 不再是提高蛋白质提取率的限制性因素。同时 ,随 着碱性蛋白酶添加量增加 ,水解度增大 ,把已水解 的蛋白质水解成更小的肽 ,而蛋白质含量并没有增 加 ,提取率反而降低。因此选择碱性蛋白酶的添加 量在 3 %～4 %左右。液固比会直接影响酶与蛋白 质互相作用几率及传质速度。由实验结果知 ,茶渣 中蛋白质提取率随液固比的增加而增大 ,当达到 40 ∶1 (mL/ g) 时 ,提取率可达 22145 %。但过高的液 固比时 ,提取率反而有所下降 ,这可能是因为液固 比过大 ,碱性蛋白酶的绝对浓度降低 ,从而降低了 碱性蛋白酶作用于不溶性茶叶蛋白质的机会。因 此 ,液固比以 35～40 ∶1 (mL/ g) 为宜。蛋白质提取 率随提取时间的延长而增加 ,当提取时间达到 4 h 后 ,趋于平缓 ,这可能是因为随着酶作用时间的延 长 ,酶的活力相对下降 ,同时酶有更多的机会作用 于已经溶出的蛋白质 ,因此选择提取时间以 3～4 h 为宜。 9　第 6 期 沈莲清等 :茶渣中蛋白质酶法提取工艺 © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 图 1 　碱性蛋白酶对茶渣中蛋白质提取率的影响 Fig. 1 　Effect of alcalase on the protein extraction rate 21212 　正交分析 　碱性蛋白酶正交实验优化结果 及其分析见表 5 和表 6。比较各因素的极差 R 值 , 酶加量的 R 值 41163 ,比液固比的 31643 和提取时 间的 11770 都大 ,说明对蛋白质提取率影响最大的 是酶加量 ,其次是液固比 ,并根据极差分析结果知 较优水平组合为 A 2 B2 C2 ,即酶加量 4 %、液固比 35 ∶1 (mL/ g) 、提取时间 4 h。从正交实验结果方差 分析表可知 ,酶加量的 F 值大于液固比的 F 值 ,且 二者的 F值都大于 F0105 ,说明这两个因素对蛋白质 提取率都有显著影响 ,这与表观分析结果相一致。 最优水平组合 (即酶加量为 4 %、液固比 35 ∶1 (mL/ g) 、提取时间 4 h) 及 p H 715 ,温度 55 ℃条件 下提取蛋白质 ,蛋白质提取率可达 3412 %。 213 　复合蛋白酶对茶渣中蛋白质提取率的影响 21311 　单因素分析 　复合蛋白酶酶加量、液固比 和提取时间对蛋白质提取率的影响如图 2 所示。 可知 ,在酶加量较低时提取率随加酶量的增加而提 高 ,由最初 1 %酶加量时的 9158 %增加到 4 %时的 12145 % ,但酶加量继续增大时 ,提取率并不增加。 因此选择碱性蛋白酶的添加量以 3 %～4 %为好。 蛋白质提取率随液固比的增加而增大 ,当达到 35 ∶ 1 (mL/ g)时 ,提取率为 1412 % ,液固比继续增大时 , 提取率并不增加。考虑到液固比过大时增加了后 处理的负担 ,故以液固比约为 35 ∶1 ( mL/ g) 为宜。 蛋白质提取率随着提取时间的延长而增加 ,当提取 时间为 5 h 达到最大提取率 12156 % ,超过 6 h 时 , 提取率几乎不变。 21312 　正交分析 　复合蛋白酶正交实验优化结果 及其分析见表 7 和表 8。从 R 值的大小可以看出 , 利用复合蛋白酶提取蛋白质影响最大的是液固比 , 其次是酶加量。根据极差分析结果 ,可以得到较优 水平组合 A 2 B2 C3 ,即酶加量 3 %、液固比 35 ∶1 (mL/ g) 、提取时间 4 h ,在该条件下提取茶叶蛋白 质 ,提取率可达 18163 %。从方差分析可知 ,3 因素 的 F值均大于 F0105 ,说明这 3 个因素对提取率都有 显著影响 ,其中液固比的 F 值最大 ,酶加量的 F 值 其次 ,这与表观分析结果相一致。 表 5 　碱性蛋白酶正交实验结果 Tab. 5 　The orthogonal experiment and results for the alcalase extraction 实验 号 因 素 A 液固比/ (mL/ g) B 酶加量/ % C 提取时间/ h 蛋白质 提取率/ % 1 30 3 3 24. 38 2 30 4 4 30. 57 3 30 5 5 28. 41 4 35 3 4 30. 56 5 35 4 5 33. 86 6 35 5 3 29. 87 7 40 3 5 27. 25 8 40 4 3 30. 25 9 40 5 4 28. 68 K1 83 . 36 82. 19 84. 50 K2 94 . 29 94. 68 89. 81 K3 86 . 18 86. 96 89. 52 k1 27. 787 27. 397 28 . 167 k2 31. 430 31. 560 29 . 937 k3 28. 727 28. 987 29 . 840 R 3. 643 4. 163 1. 770 01 食 　品 　与 　生 　物 　技 　术　学 　报 　　　　　　　　　　　　第 25 卷 　 © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 图 2 　复合蛋白酶对茶渣中蛋白质提取率的影响 Fig. 2 　Effect of protamex on the protein extraction rate 表 6 　碱性蛋白酶正交实验结果方差分析表 Tab. 6 　Analysis of variance for alcalase treatment 方差 来源 偏差平 方和 S 自由度 f 平均偏差 平方和 V F值 显著 性 液固比 21. 465 2 10. 733 23. 485 3 酶加量 26. 483 2 13. 242 28. 975 3 提取时间 5. 942 2 2. 971 6. 501 误差 e 0. 91 2 0. 455 总和 T 54. 8 8 　注 : (1) F0105 (2 ,2) = 19 , F0101 (2 ,2) = 99 ; (2) 3 显著水平 为 01 05。 表 7 　复合蛋白酶正交实验结果 Tab. 7 　Orthogonal experiment and results 实验 号 因 素 A 液固比/ (mL/ g) B 酶加量/ % C 提取时间/ h 茶叶 蛋白质 提取率/ % 1 30 2 2 10. 89 2 30 3 3 14. 34 3 30 4 4 15. 16 4 35 2 3 14. 76 5 35 3 4 18. 63 6 35 4 2 16. 34 7 40 2 4 14. 67 8 40 3 2 15. 55 9 40 4 3 16. 89 K1 40 . 39 40. 32 42. 78 K2 49 . 73 48. 52 45. 99 K3 47 . 11 48. 39 48. 46 k1 13. 463 13. 440 14 . 260 k2 16. 577 16. 173 15 . 330 k3 15. 703 16. 130 16 . 153 R 3. 114 2. 733 1. 893 表 8 　复合蛋白酶正交实验方差分析表 Tab. 8 　Analysis of variance for protamex treatment 方差 来源 偏差平 方和 S 自由度 f 平均偏差 平方和 V F值 显著 性 液固比 15. 473 2 7. 737 68. 769 3 酶加量 14. 709 2 7. 355 65. 373 3 提取时间 5. 407 2 2. 704 24. 031 3 误差 e 0. 23 2 0. 115 总和 T 35. 819 8 　注 : (1) F0105 (2 ,2) = 19 , F0101 (2 ,2) = 99 ; (2) 3 显著水平 为 0105。 214 　双酶法提取对茶渣中蛋白质提取率的影响 双酶提取步骤对茶渣中蛋白质提取率的影响 如图 3 所示。可知 ,采用先复合蛋白酶 ,后碱性蛋 白酶提取的分步提取方法效果较好 ,提取率可达 50125 %。 图 3 　双酶提取步骤对茶渣中蛋白质提取率的影响 Fig. 3 　Effect of the double proteases procedure on the protein extraction rate 　　碱性蛋白酶占双酶总量的比例对茶渣中蛋白 11　第 6 期 沈莲清等 :茶渣中蛋白质酶法提取工艺 © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 质提取率的影响如图 4 所示。可知 ,碱性蛋白酶和 复合蛋白酶的配合比例对提取率影响较大 ,当碱性 蛋白酶占总酶加量的 25 %时 ,茶叶蛋白质提取率达 到最大 ,为 42105 %。这说明在该加量比下 ,碱性蛋 白酶和复合蛋白酶的协同作用达到最佳 ,可以达到 较好的提取率。 图 4 　碱性蛋白酶占双酶总量的比例对茶渣中蛋白质 提取率的影响 Fig. 4 　Effect of the percent of alcalase on the protein extraction rate 　　双酶复合正交实验优化结果及其分析见表 9 和表 10。比较各因素的极差 R 值可知 ,对提取率影 响最大的是 p H 值 ,其次是温度。双酶复合提取的 最优水平组合为 A 3 B3 C2 ,即 p H 810、温度 60 ℃、酶 加量 4 %。在该条件下提取蛋白质 ,提取率可达 47176 %。由方差分析可知 ,p H、温度的 F 值均大 于 F0105 ,说明这两个因素对提取率有显著影响 ,这 与表观分析结果一致。 3 　结　论 1)在中性蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶和 复合风味蛋白酶等 4 种蛋白酶中 ,以碱性蛋白酶提 取效果最好 ,提取率达 1813 % ,其次是复合蛋白酶。 2)碱性蛋白酶法提取茶渣中蛋白质的最佳提 取工艺为酶加量 4 %、液固比 35 ∶1 (mL/ g) 、提取时 间 4 h ,提取率可达 3412 %。 3)复合蛋白酶法提取茶渣中蛋白质的最佳提 取工艺为酶加量 3 %、液固比 35 ∶1 (mL/ g) 、提取时 间 4 h ,提取率可达 18163 %。 4)双酶法提取中 ,采用先复合蛋白酶 ,后碱性 蛋白酶提取的分步提取方法效果较好。碱性蛋白 酶占总酶加量比例对提取率的影响明显 ,当碱性蛋 白酶占总酶加量的 25 %时 ,提取率达到最大 ,为 42105 %。双酶法提取茶渣中蛋白质的最佳提取工 艺为 p H 810、温度 60 ℃、酶加量 4 % ,提取率可达 47176 %。 表 9 　双酶复合正交实验及结果 Tab. 9 　Arrangement and results of orthogonal experiment of double proteases 实验 号 因 素 A p H 值 B 温度/ ℃ C 酶加量/ % 蛋白质 提取率/ % 1 7. 0 50 3 34. 53 2 7. 0 55 4 37 ,45 3 7. 0 60 5 39. 28 4 7. 5 50 4 40. 86 5 7. 5 55 5 41. 40 6 7. 5 60 3 42. 96 7 8. 0 50 5 41. 97 8 8. 0 55 3 44. 56 9 8. 0 60 4 47. 76 K1 111 . 26 117 . 36 122 . 05 K2 125 . 22 123 . 41 126 . 07 K3 134 . 29 130 . 00 122 . 65 k1 37. 087 39. 120 40 . 683 k2 41. 740 41. 137 42 . 023 k3 44. 763 43. 333 40 . 883 R 7. 676 4. 213 1. 340 表 10 　双酶复合正交实验结果方差分析表 Tab. 10 　Analysis of variance for double proteases 方差 来源 偏差平 方和 S 自由度 f 平均偏差 平方和 V F值 显著 性 p H 值 89. 725 2 44. 863 99. 473 3 温度 26. 644 2 13. 322 29. 539 3 酶加量 3. 135 2 1. 568 3. 476 误差 e 0. 90 2 0. 450 总和 T 120. 404 8 　注 : (1) F0105 (2 ,2) = 19 , F0101 (2 ,2) = 99 ; (2) 3 显著水平 为 0105。 参考文献 : [ 1 ] 王元凤 ,王登良 , 魏新林. 酶技术在茶叶深加工中的应用研究[J ] . 饮料工业 ,2000 ,3 (6) :18 - 22. [ 2 ] 杜继煜 ,白岚 ,白宝璋 . 茶叶的主要化学成分[J ] . 农业与技术 ,2003 ,23 (1) :53 - 55. (下转第 33 页) 21 食 　品 　与 　生 　物 　技 　术　学 　报 　　　　　　　　　　　　第 25 卷 　 © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 214 　综合评价值的响应面分析及等高线图 由回归方程得出响应曲面及其等高线显示 ,各 因素之间对模综合评价值的影响有协同作用 ,且 X2 、X4对模糊综合评价值的影响较大 ,表现为曲线 较陡 ,而 X1 、X3 对模糊综合评价值的影响较小 ,表 现为曲线较为平滑 ,等高线图可以直观地反映出两 因素的交互作用的大小 ,圆形表示两因素交互作用 不显著 ,而椭圆形则表示两因素的交互作用显著 , 可以得出 X1 X4 , X2 X4 , X3 X4的交互作用较强。 对回归方程求一阶偏导 ,得到 X1 = - 016311 , X2 = - 015188 , X3 = 015725 , X4 = - 016523。对编 码值按 X j = ( x i - X0 ) / ⊿ X j 进行回代 ,得到 x1 = 182 ℃, x2 = 82 ℃, x3 = 33 MPa , x4 = 27 MPa。 3 　结　论 以微胶囊化效率、产率和保留率为评价指标 , 用模糊数学的方法处理实验数据得到模糊综合评 价值 ;利用 SAS811 软件对模糊综合评价值进行回 归拟合 ,获得回归方程 ;对回归方程求一阶偏导 ,得 到制备维生素 A 微胶囊较优的工艺参数为进风温 度为 182 ℃, 出风温度为 82 ℃, 第一次均质压力 为 33 MPa , 第二次均质压力为 27 MPa。 因为微胶囊的评价品质涉及到多项指标 ,模糊 综合评价避免了只用单项指标评价的主观性 ,因此 是客观、科学、合理的评价方法 ,从而实现了模糊控 制 ,为微胶囊的品质评价提供了模型参考。 参考文献 : [ 1 ] Bertolini A C , Siani A C , Grosso C1 Stability of monoterpenes encap sulated in gum arabic by spray2drying[J ]1 J Agric Food Chem,2001 ,49 (2) : 780 - 785. [ 2 ] Hogan S A , McNamee B F , O’Riordan E D. 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