百合多糖的抗疲劳作用

湖南师范大学学报(医学版) JHl哪nN咖al蒜(删玉)2009，6(3) 9 百合多糖的抗疲劳作用 何纯莲1，杨小红p，黄 浩2，杨球桢1 (1湖南师范大学医学院湖南长沙410006；2宜春学院化学与生物学院，宜春336000) 【摘要】目的：观察百合多糖对小鼠的抗疲劳作用。方法：用水提醇沉法提取百合粗多糖，通过seyag法去蛋 白，纯化多糖。将60只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、高、中、低剂量给药组。高、中、低剂量给药组分别按 2．259／kg／d、1．．59／kg／d、0．759／kg／d灌胃百合多糖，正常对照组以等体积生理盐水灌胃，连续灌胃10天后对小鼠进 行负重游泳实验及血清指标测定。结果：三个剂量组百合多糖均能延长小鼠游泳时间。增强d、鼠血清超氧化物歧化 酶(soD)活力，减少小鼠血清中丙二醛(MDA)的生成，提高小鼠抗疲劳能力。结论：百合多糖的抗疲劳、提高运动 能力与其抗氧化作用相关。 【关键词】百合；多糖；抗疲劳 【中图分类号】R2842 【文献标识码】A 【文章编号]1673-016x(2009)03—0009-03 Anti-wearyPharmacologicalActionofLilyPolysaccharide HEChun一．1ianl,YANGXiao一·hon91．,HUANGHa02，YANGQiu-zhenl] fLMediealcollege，HunanNormalUnizenity,c^硼gslIl口410006,China． 2．．SchoolofChemistryandBio--engineering，YichunUnivers咖Yichun336000,China) [Abstract]ObjectiveObservethe蛐ti—fatiguepharmacologicalactionof￡咖Pdysaccl删einmice．． MethodsExtractpolysaccharidefromlilypowderwithwaterandprecipitateitbyaddingingomealcoholande- liminatetheproteinUSeSevagmethod．AfterⅡIat．sixtymalemicewererandomlydividedintonormalcontrol group,，high-dosagegroup,，middle-dosagegroupandlow--dosagegroup,．Themiceintheabovegroupswerefedfor 10days．Thedruggroupswerefedwitll2．25，1．5，O．75班g／dl坶polysaceharide．Normalcontrolgroupwerefed 0．9％NaCIinthesSXllevolume．OnthelO击dayoffeeding,allofthemicewerecarriedonswimmingtest．．Mice restfor24hoursafterswimmingtotired，thentenofeachgroupwereexecutedtoadoptbloodfromeyesocke， thenmeasuredSODactivityandMDAcontentinmiceserum．ResultsThreedrugteamsoflilypolysaccharidecarl lengthenthemice'sswimmingtimeandenhancetheactivityofSODandreducetheamountofMDA,Solily polysaccharideCallenhancemice'santi-fatiguecapability．ConclusionLilypolysaccharideCallenhancemice sportabilityandpromottherestorationoffatiguemice，Perhapstheanti—wearyfunctionofl曲polysaccharide 啦relatedwithitsanti--oxoidationactivity 【Keywords]lily；polysaccharide；fatigueresistance 收稿日期：2009-06-13 基金项目：长沙市科技计划项目(k0901084—31)，湖南省科技厅资助科研项目(06珂31s2)． 作者衙介：4q'纯莲(1969-)。女，副教授，博士，从事天然产物功能活性成分分析及应用研究E—mm：cbllnlj柚hc68@163．corn。 ’通讯作者：杨小红(1966一)，女，Td：86—731—88912473 万方数据 10 湖南师范大学学报(医学版)，2009，6(3) 运动性疲劳是由多因素引起的，长时间以来人 们一直致力于对运动性疲劳的研究，虽然到目前为 止对于运动性疲劳产生的原因还没有一个完整的 定论。但大多认为运动性疲劳的产生与体内自由基 的累积有关。 在正常情况下。生物体内自由基浓度是极低 的，体内防御体系能有效的清除所产生的自由基． 使自由基处于平衡状态。保护机体组织细胞免受自 由基氧化。但在运动中有氧代谢增强．由此可以促 进氧自由基生成Il】，尤其在高强度的力竭性运动中 氧自由基的累积会引起脂质过氧化产物一丙二醛 含量的明显升高。导致肌纤维膜及线粒体膜等生物 膜完整性丧失及损伤，从而引发一系列细胞代谢机 能紊乱，使肌肉工作能力下降产生疲劳。因此长时 间的力竭运动使体内氧自由基累积是造成身体疲 劳的一个主要原因。SOD是细胞防御氧自由基的第 一道纺线，也是需氧生物体内数千种酶中底物。为 氧自由基的唯一的酶，该酶对底物具有专一性。其 作用是岐化超氧阴离子自由基，使生物体免受氧自 由基氧化。因此通过测定机体血液中SOD的活力 和脂质过氧化产物一丙二醛含量可以预测机体的 疲劳状况。 百合是传统药食兼用佳品．在现存的最早一部 本草专著《神农本草经》上就有对其防病治病的药 理性有记载，现代医学研究表明，百合具有抗癌、抗 疲劳、耐缺氧、止咳等作用口一，含有多种微量元素、 维生素B1、B2等营养物质、多糖、皂苷帅、生物碱 等抗癌和促进细胞免疫功能的生物功能活性成分 It-iol。其中百合多糖经研究证明具有多种药理药效 作用，研究者对于其抗肿瘤、降血糖、免疫调节作用 报道较多，对于其抗疲劳作用研究尚处于起步阶 段。本文通过小鼠负重游泳实验及血清指标测定。 对百合多糖抗疲劳作用进行了研究。 1材料与方法 1．1主要仪器与试剂 UV一2501PC分光光度计(日本岛津)，离心沉 淀机(上海医用分析仪器厂)。电热恒温水浴锅(天 津市泰斯特仪器有限公司)，电热恒温干燥箱(天津 市泰斯特仪器有限公司)，真空旋转蒸发器RE52— 99(上海亚荣生化仪器厂)，游泳箱(70emx50emx 40cm)，SHB—B95型循环水式多用真空泵(郑州长 城科工贸有限公司)。 超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒、丙二醛 (MDA)测定试剂盒购于南京建成生物工程研究所。 百合(卷丹百合，湖南省龙山县提供)，无水乙醇， 95％乙醇，乙醚，丙酮，氯仿，正丁醇等均为国产分 析纯。 1．2实验动物 昆明种雄性小鼠60只，体重(20±2)g，由长沙市 开福区实验动物科技服务部提供． 1．3原料预处理 将新鲜百合鳞茎洗净自然晾干，机械粉碎至 20目，取适量于圆底烧瓶中，加入3倍量95％乙 醇，回流1．5h，脱脂干燥，备用。 1．4百合多糖提取纯化 取脱脂百合粉末加入3倍量水于65℃水浴中 浸提2h，提取3次，合并所得提取液，离心。上清液 置真空旋转蒸发仪中浓缩。缓缓加入3倍量95％乙 醇，冷藏静置过夜，离心。沉淀加水复溶，用1％醋酸 调节pH至4：5，按样品液：氯仿：正丁醇=10：3：1移 至分液漏斗中，充分振摇，分离出水层，重复操作至 无白色絮状沉淀出现。水层中缓慢加入3倍量95％ 乙醇。冷藏静置过夜，离心，沉淀依次用无水乙醇、 丙酮、乙醚洗涤，各洗3次，沉淀恒温干燥，得到的 白色沉淀即百合多糖。 1．5百合多糖对小鼠游泳时间的影响 1．5．1动物分组及给药 取小鼠60只，体重(20±2)g，按体重随机分为4 组：正常对照组、高、中、低剂量给药组。高、中、低剂 量给药组分别按2．259／kg／d，1．59／krJd，0．759／kg／d灌 胃百合多糖，正常对照组以等体积生理盐水灌胃， 连续给药10天。 1．5．2实验过程， 于末次给药后30rain。将小鼠尾部负重体重的 4％的铅丝放人游泳箱(70emx50emx40em，水深为 30era，水温保持在25：t-0．5℃)中游泳，小鼠自入 水开始至头部全部没入水中8s不能浮出水面为止 的时间。作为小鼠游泳的时间。 1．6小鼠血清SOD、MDA值的测定 1．6．1血清的制备 小鼠在游泳结束后恢复24h后，每组随机取 10只．眼眶采血，分离血清，低温保存。 1．6．2血清SOD测定原理 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超 氧阴离子自由基(02：)，02了氧化羟胺形成亚硝酸 盐，在显色剂的作用下呈现紫红色。用可见分光光 万方数据 百合多糖的抗疲劳作用研究 何纯莲等 度计在550rim测其吸光度。当被测样品中含SOD 时，则对超氧阴离子自由基有专一的抑制作用，使 形成的亚硝酸盐减少，比色时测定管的吸光度值低 于对照管的吸光度，通过公式计算可求出被测样品 的SOD活力。 表1 百合多糖对小鼠游泳时间的影响 与正常对照组比较★P标准

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