乳腺癌新的肿瘤标志物--CYFRA21-1

江西医药 2010 年 4 月 第 45 卷 第 4 期 Jiangxi Medical Journal，Apr 2010，Vol.45，No.4 作者单位：341100 赣州，江西省赣南医学院第一附属医院（刘志勇、欧阳忠）； 150086 哈尔滨，哈尔滨医科大学附属第二医院（邹小明） 乳腺癌新的肿瘤标志物—CYFRA21- 1 刘志勇 欧阳忠 邹小明 [摘要] 目的 探讨 CYFRA21-1 在乳腺癌中的达情况及其临床意义。方法 分别检测 86 例原发性乳腺癌，14 例复发性乳 腺癌，22 例良性乳腺肿瘤，25 例正常人群中血清 CYFRA21-1、CEA、CA153 的表达情况，并检测血清 CYFRA21-1 含量与临床病 理特征﹑预后及无病生存时间的关系。 结果 乳腺良性肿瘤人群与正常人群中 CYFRA21-1 的差别无统计学意义。 CYFRA21-1 在Ⅳ期乳腺癌及复发性乳腺癌中的阳性率分别为 60%和 64.2%，其阳性率高于 CA153 和 CEA。在血运性复发性乳腺癌病例中， 其灵敏度较高，为 89%。 随着 TNM 分期的增加 CYFRA21-1 的水平逐渐升高。 CYFRA21-1 与 CEA 无统计学关联，与 CA153 有 轻度统计学关联， 单因素及多因素均显示：CYFRA21-1 可作为判断乳腺癌预后的一个独立指标。 结论 检测 CYFRA21-1 察到各种组织学类型的普通型骨肿瘤预后无明显差 异的结果相一致。 p97 的抗凋亡作用及促肿瘤转移作用是通过激 活核转录因子 NF-kB 信号转导通路实现的 [8]。 NF- kB 可参与癌基因的活化及抑制肿瘤细胞的凋亡作 用，与肿瘤的浸润、转移、免疫应答、凋亡等生物学行 为关系密切[9]。 NF-kB通过激活 MMP-9和尿激酶纤 维蛋白原来促使肿瘤细胞在转移过程中的血管渗透 [10]。过去的实验还发现将导入了 p97载体的 Dunn细 胞株与空载体的 Dunn 细胞株进行鼠皮下注射，体 内检测肺癌的转移率， 发现导入了 p97载体的细胞 株显示了较高的肺癌转移巢的形成[8]。 P97的表达受 精确调控， 可在与获得性转移潜能相关的癌细胞中 高度表达 [11]。 国外 Yamamoto 等[3~ 7]用免疫组织化学 方法先后对食道癌、胃癌、结直肠癌、肝癌、胰腺癌进 行了 p97表达水平的研究，通过多变量分析显示：免 疫组织化学方法测定 p97水平， 对于肿瘤的转移和 复发是很好的预示因子， p97 高水平表达的患者易 于淋巴结转移及复发。 从本研究结果分析，p97 可能参与了骨肉瘤的 发生与远处转移， 这提示 p97检测可能成为判断骨 肉瘤发生远处转移的一项有价值的指标； 同时 p97 为骨肉瘤的诊疗提供一种新的可能分子靶标和途 径。 但本研究因为转移组的样本量只有 14 例，并且 目前判断骨肉瘤发生远处转移是根据影像学资料及 病理学检查， 对一些已经发生转移而无影像学表现 的病例无法证实， 况且肿瘤的发生与发展是非常复 杂的事件， 所以还不能完全肯定 p97参与骨肉瘤的 发生与远处转移， 还需要从体外及体内等大量实验 来证实。 参 考 文 献 [1] Yamamoto S,Tomita Y,Nakamori S,et al.Elevated expression of val- osin containing protein(p97)in hepatocellu－lar carcinoma is correlated with increased incidence of tumorrecurrence .J Clin Oncol,2003,21 (3):447 [2] Mori-Konya C, Kato N, Maeda R, et al. p97/valosin-containing pro- tein (VCP) is highly modulated by phosphorylation and acetylation . Genes Cells，2009，14(4):483 [3] Yamamoto S，Tomita Y，Hoshida Y，et al．Expression level of valosin- containing protein (p97)is associated with prognosis of esophageal carcinoma．Clinic Cancer Res，2004，10：5558 [4] Yamamoto S，Tomita Y，Hoshida Y，et al．Expression level of valosin- containing Protein is strong1y associated with progression and prog- nosis of gastric carcinoma．J Clin Oncol，2003，21：2537 [5] Katayama A，Bandoh N，Kishibe K，et al.Harabuchi Y．Expressions of matrix metalloproteinases in early-stage oral squamous ceIl carcino- ma as predictive indicators for tumor metastases and prognosis．Clin Cancer Res， 2004，10：634 [6] Yamamoto S，Tomita Y，Hoshida Y，et al．Increased expression of val- osin-containing Protein(p97)is associated with lymph node metastasis and prognosis of pancreatic ductal adenocarcinoma．Ann Surg Oncol， 2004，11：165 [7] Wang ZH，Shen D，Williams P，et al．Mutational analysis of the tyro- sine phosphatome in colorectal cancers．Science，2004，304：1164 [8] Asai T,Tomita Y,Nakatsuka S,et al.VCP(p97)regulates NF-KB sig- naling pathway, which is important formetastasis of Osteosarcoma cell line .Jpn J Cancer Res,2002,93(3):296 [9] Shen HM, Tergaonkar V. NFkappaB signaling in carcinogenesis and as a potential molecular target for cancer therapy.Apoptosis，2009，14 (4):348 [10] Andela V B,Schwarz E M,Puzas J E,et al.Tumor metastasis and the reciprocal regulation of prometastatic and antimetastatic factors by nuclear factor kappa. B Cancer Res,2000,60(23):6557 [11] Wang Y, Satoh A,Warren G,et al.VCIP135 acts as a deubiquitinat- ing enzyme during p97 -p47 -mediated reassembly of mitotic Golgi fragments.Cell Biol,2004,164(7):973 （收稿日期 2010-03-09） 299· · 江西医药 2010 年 4 月 第 45 卷 第 4 期 Jiangxi Medical Journal，Apr 2010，Vol.45，No.4 乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一， 全世界 每年大约有 120万妇女患有乳腺癌，有 50 万左右死 于乳腺癌[1]。近年来，随着人们对乳腺癌研究的深入， 手术、化疗、放疗等规范化治疗的实施，对乳腺癌的 诊治取得较好效果， 但对乳腺癌复发方面的研究甚 少。为了提高对复发性乳腺癌的早期诊断率，给临床 诊治该类病人提供实验依据， 我们采用放射免疫法 (RIA 法 ) 测定乳腺癌患者血清 CYFRA21-1、CEA、 CA15-3 水平， 以评价其在复发性乳腺癌及晚期乳 腺癌中的价值。 1 材料与方法 1.1 材料 选取赣南医学院第一附属医院 100 例乳 腺癌病人，其中 86 例为原发性乳腺癌，14 例为复发 性乳腺癌，平均年龄为 54.8±11.3 岁，这些病人都无 其他器官的原发性肿瘤。另选取 25例正常人群及 22 例良性乳腺肿瘤人群（16例乳腺腺病，5例纤维腺瘤， 1例叶状肿瘤）作为对照。 临床病理特征及肿瘤分期 参照国际抗癌联合会的 TNM 分期来划分。 1.2 方法 空腹抽取被检测者静脉血 4 ml 置普通试 管中，离心分离血清，－20℃保存备用。应用美国 CIS bio international 公司生产的 CYFRA21-1 试剂盒及 美国 DPC 公司生产的 CA15-3 试剂盒和 CEA 试剂 盒，采用 RIA 法测定患者血清 CYFRA21-1、CA15-3 水平。 1.3 结果判断 设定 CYFRA21-1 的阳性界值为 3.5 ng/ml，CA15-3 的阳性界值为 30u/ml，CEA 的阳性界 值为 6.5ng/mL。 1.4 统计学处理 所有数据均采用非参数检验。 M ann–Whitney U检验用于两组间的比较，用Kruskal– Wallis检验用于多组间的比较。 CYFRA21-1与其他 肿瘤标志物间的关系用线性回归分析检验。 用 Ka- plan–Meier 曲线及时序检验评估生存时间及无病 生存时间。 P＜0.05为统计学有意义。 2 结果 2.1 正常人群组与良性乳腺肿瘤组中血清CYFRA21- 1 的表达 在 25 例正常人群中 CYFRA21-1 的水平 为 0.5～1.7ng ／ml （中位值为 0.9ng ／ml），CYFRA21-1 在良性乳腺肿瘤与正常人群中的表达差异无统计学意 义（表 1）。任何良性肿瘤病人与正常人群其 CYFRA21- 1的水平都小于 3.5ng/ml。因此，CYFRA21-1在乳腺 癌中的特异性为 100%。 2.2 乳腺癌病人中血清 CYFRA21-1 的表达 在原 发性乳腺癌人群中， 其血清 CYFRA21-1 的水平都 明显高于正常人群（表 1，2）。 然而，在Ⅰ期和Ⅱ期乳 腺癌中其敏感性分别为 0%和 3.2%， 其中值小于临 界值 3.5ng/ml； 在Ⅳ期乳腺癌和复发性乳腺癌病例 中其敏感性分别为 60%和 64.2%。 在复发性乳腺癌 中 9例为血运性转移（6例有骨转移，3例有肝转移， 水平对检测乳腺癌复发及评估治疗效果有非常大的价值。 [关键词] CYFRA21-1；乳腺癌；预后；CEA；CA153 [中图分类号] R737.9 New tumor markers for breast carcinoma is serum CYFRA 21-1 Liu Zhiyong，Ouyang Zhong，Zou Xiaoming.The affiliated hos- pital of Gannan medical college,Ganzhou,341000,China [Abstract] Objective To study expression of serum CYFRA21-1 in breast cancers and its clinical significance.Methods The serum samples of 86 patients with primary breast carcinoma, 14 patients with recurrent breast carcinoma,22 patients with benign mammary disease,and 25 healthy controls were provided for measurements of CYFRA 21-1,carcinoembryonic antigen (CEA),and CA 15-3.The relation between clinicopathologic features, prognosis, and disease free survival with serum CYFRA 21-1 titers was studied. Results There was no difference between the serum CYFRA 21-1 titers from patients with benign mammary disease and those from healthy controls.The sensitivities of CYFRA 21-1 for patients with International Union Against Cancer Stage IV and recurrent tumors were 60% and 64.2%, respectively, which were as high as those for CA 15-3 and superior to those for CEA.The hematogenous recur- rence showed a very high sensitivity of 89%.According to the increments of T, N, and M factor numbers, the serum CYFRA 21-1 titers were elevated.No correlation between CYFRA 21-1 and CEA was observed and the correlation between CYFRA 21-1 and CA 15-3 was weak. The univariate and multivariate analyses for survival revealed that serum CYFRA 21-1 levels were an independent indicator of prognosis. Conclusion The measurement of the serum CYFRA 21-1 titer in patients with breast carcinoma may be useful in monitoring for recurrence and evaluating the therapeutic effect in patients with advanced disease. [Key words] CYFRA 21-1；breast carcinoma； prognosis；CEA；CA15-3 300· · 江西医药 2010 年 4 月 第 45 卷 第 4 期 Jiangxi Medical Journal，Apr 2010，Vol.45，No.4 人群 n 血清 CYEFA21-1 水平（ng/ml） P值 范围 中值 x±s 正常人群组 良性肿瘤组 Ⅰ期 Ⅱ期 Ⅲ期 肿瘤复发 25 22 25 38 13 10 14 0.5~ 1.7 0.4~ 2.6 0.5~ 2.7 0.3~ 11.0 0.5~ 15.1 1.4~ 45.0 0.5~ 3570.0 0.9 0.5 1.5 1.6 1.3 5.4 4.9 1.04±0.07 0.78±0.58 1.48±0.61 2.05±1.94 3.22±3.95 13.07±15.41 272.16±950.1 - 0.0870 0.0107 0.0033 0.0423 0.0001 0.0001 表 1 不同人群组间血清 CYFRA21- 1的表达 病理特征 n 血清 CYEFA21-1 水平（ng/ml） P值 范围 中值 x±s 年龄（岁） ＜50 ＞50 TNM 分期 T1 T2 T3 T4 N0 N1 N2 N3 M0 M1 ER 阴性 阳性 PgR 阴性 阳性 29 57 32 42 7 5 41 27 14 4 76 10 46 32 49 25 0.3~ 45.0 0.5~ 34.0 0.5~ 2.9 0.3~ 45.0 1.0~ 15.1 2.7~ 22.6 0.5~ 6.4 0.3~ 22.6 0.5~ 34.0 2.7~ 45.0 0.3~ 15.1 1.4~ 45.0 0.5~ 45.0 0.3~ 6.4 0.5~ 45.0 0.3~ 11.0 1.2 1.9 1.4 1.8 1.5 4.5 1.5 1.9 2.0 7.3 1.5 5.4 1.9 1.6 1.8 1.6 3.35±5.51 3.33±8.17 1.49±0.62 4.05±8.37 4.11±5.11 8.20±8.34 1.60±1.01 3.62±5.00 4.41±8.63 15.58±19.75 2.06±2.20 13.07±15.41 4.61±8.51 2.02±1.52 4.04±8.32 2.75±2.60 0.1279 0.0120 0.0103 0.0001 0.2484 0.7968 表 2 乳腺癌人群中血清 CYFRA21- 1的表达与临床病理 特征之间的关系 表 3 不同临床病理下乳腺癌的术后生存时间 病理特征 P值 年龄（岁）＜50vs＞50 T1，2 vsT3，4 N0，1 vs N2，3 M0 vs M1 ER PgR 血清 CYERA21-1（ng/ml）＜3.5vs≥3.5 血清 CEA（ng/ml）＜6.5vs≥6.5 血清 CA15-3（u/ml）＜30vs≥30 0.2722 0.0653 0.0023 0.0867 0.8550 0.9297 0.0024 0.2041 0.1249 3例有肺转移，1 例有卵巢转移，1 例有肾上腺转移， 部分病人为多器官转移），在 5例非血运性转移病人 中，2 例胸壁转移，2 例胸膜转移，1 例淋巴结转移。 在血源性转移中，CYFRA21-1 的阳性率为 89%(8 例/9 例)。 然而，在非血运性转移中，CYFRA21-1 的 阳性率为 20%（1 例/5 例）。 所以，血清 CYFRA21-1 在血运性转移组中的表达明显高于非血运性转移 组。 表 2 显示，随着 TNM 分期的增加，CYFRA21-1 的水平逐渐升高 。 有远处转移的病例其血清 CYFRA21-1 的水平明显高于无远处转移者。 然而， 不同年龄组 CYFRA21-1 的水平无明显差异。 血清 CYFRA21-1 水平在 ER 阴性病中明显高于 ER 阳性 者，但两组之间无统计学意义。PgR 阴性病例明显高 于 PgR 阳性者，这两组之间亦无统计学意义。 2.3 血清 CYFRA21-1 的表达与 CEA，CA15-3 表达 的关系 在Ⅳ期乳腺癌和复发性乳腺癌中 ， CYFRA21-1 比 CA153 更适合作乳腺癌肿瘤的标志 物。 CYFRA21-1 与 CEA 无统计学关联（r=0.058；P= 0.577）；CYFRA21-1 与 CA153 有轻微统计学关联 （r=0.255；P=0.021）。 在 24例 CYFRA21-1 阳性病例 中，13 例表现为 CEA 阴性 ，6 例表现为 CA153 阴 性； 在 76 例 CYFRA21-1 阴性病例中，5 例表现为 CEA 阳性，4例为 CA153阳性。 2.4 血清 CYFRA21-1 的表达与原发性乳腺癌预后 及复发的关系 血清 CYFRA21-1 水平大于 3.5ng/ ml 的病例中， 其生存时间与无病生存时间均短于 CYFRA21-1 阴性者。 单因素分析显示：有第 2 站或 第 3 站淋巴结转移并且 CYFRA21-1 水平高者，其 生存时间都较短，其他临床病理学因素（如年龄、肿 瘤大小、是否远处转移 ER 值、PgR 值、血清 CEA 水 平、血清 CA153 水平）均与预后无关。 因此，血清 CYFRA21-1 可作为判断预后的一个独立指标。 表 3。 3 讨论 乳腺癌严重威胁着女性的健康与生命， 如何提 高复发性乳腺癌的早期诊断率是目前国内外共同关 注的问。肿瘤标志物在协助临床对肿瘤的诊断、分 析病情、指导治疗、监测复发或转移、判断预后方面 有着重要意义[2]。 CYFRA21-1 即细胞角蛋白（cytokeratin，CK）19 片段，CY 和 FRA 分别取自 cytokeratin 和 fragment， 而 21-1则代表用于检测细胞角蛋白 19片段的两株 单克隆抗体 Bml9．21和 KS19．1。 细胞角蛋白是普遍 存在于上皮细胞中的细胞结构蛋白。 正常情况下， CYFRA21-1 以寡聚物形式存在，含量极低，当上皮 301· · 江西医药 2010 年 4 月 第 45 卷 第 4 期 Jiangxi Medical Journal，Apr 2010，Vol.45，No.4 作者单位：341000 赣州，江西省赣州市人民医院呼吸内科 过氧化物酶体增生物激活受体在人体不同癌 组织中的定量表达 乐永宏 [摘要] 目的 通过检测过氧化物酶体增生物激活受体在人体不同器官癌组织中的表达，探讨 PPARγ 在癌组织中的意义。 方法 采用免疫组化法检测 11 例膀胱癌，8 例胃癌，11 例宫颈癌，12 例甲状腺癌和 9 例肝癌组织中的 PPARγ 表达，并通过彩色 医学图文分析系统检测 PPARγ 平均吸光度值。 结果 PPARγ 在膀胱癌、胃癌、宫颈癌、甲状腺癌及肝癌中组织细胞的细胞核及 细胞浆均有表达，细胞核的表达高于细胞浆的表达，但均无统计学差异。 结论 PPARγ 表达与癌组织有关，PPARγ 在癌症中的作 用有待于进一步研究。 [关键词] 过氧化物酶体增生物激活受体；免疫组化；癌组织 [中图分类号] R730.21 Quantitative expression of peroxisome proliferator activated receptor -gamma in human different cancer tissues Le 细胞癌变时， 被激活的蛋白酶加速了细胞角蛋白的 降解，CK结构不变而含量升高。 当癌细胞溶解或坏 死脱落时，可释放大量 CYFRA21-1 人血，使其含量 异常升高并被释放出来， 使组织、 血液中的浓度上 升， 因此 CYFRA21-1 可作为一项上皮源性肿瘤标 志物[3]。 血清 CYFRA21-1 在多种肿瘤中有明显升高 [4~ 8]，但到目前为止，CYFRA21-1 在乳腺癌中的报道比 较少。 基于目前的研究，CYFRA21-1 不适于作为乳 腺 癌 的 早 期 筛 查 和 早 期 诊 断 的 指 标 ， 因 为 CYFRA21-1 在Ⅰ期和Ⅱ期乳腺癌中的敏感性非常 低，且 5mm以上的早期乳腺癌就已经可以通过超声 波及细针穿刺来诊断了， 无须再检测 CYFRA21-1 水平。然而对于复发性乳腺癌及判断乳腺癌手术﹑化 疗﹑放疗的效果，CYFRA21-1具有明显的优势。在我 们的研究中 ， 对于Ⅳ期乳腺癌及复发性乳腺癌 CYFRA21-1其敏感性高于 CA153， 更具临床意义。 且在良性乳腺肿瘤中 CYFRA21-1 的特异性非常 高。我们发现 CYFRA21-1可以比影像学检查早 2~ 6 个月发现复发性病例，且无一例假阳性，然而对于 非血运性复发病人 CYFRA21-1检测无临床意义。 到目前为止， 没有文献报道 CYFRA21-1 与乳 腺癌的预后之间是否有关系。 乳腺癌术后随访的目 的在于及早发现肿瘤的复发或转移，以便及时治疗。 肿瘤局部复发可通过体检较早发现， 而对远处转移 的病灶则很难及早发现。 我们研究表明，CYFRA21- 1 高表达者其预后较差，生存期较短，且单因素及多 因素生存分析均显示 CYFRA21-1 可以作为一个独 立的预测预后的指标， 然而 CEA 和 CA153 与预后 没有关系。 总之，本研究表明，血清 CYFRA21-1 可以作为 乳腺癌的一个可靠的肿瘤标志物， 特别是在Ⅳ期乳 腺癌及复发性乳腺癌中更具诊断价值。 参 考 文 献 [1] Olszewski WP, Szumera-Cieckiewicz A, Piechocki J,et al. 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