实验室基础知识

实验室基础知识培训讲义主要内容1基本常识2实验室常用玻璃仪器3玻璃器皿清洗方法4容量玻璃仪器的规格和使用规则5常用玻璃仪器的容量校正6试剂的分类与保管7质量管理文件第一部分基本常识以下实验室分析及行业中有关概念及规定一、试验温度1.水浴温度除另有规定外，均指98～100℃；2.热水系指70～80℃；3.微温或温水系指40～50℃；4.室温系指10～30℃；5.冷水系指2～10℃；6.冰浴系指约0℃；7.放冷系指放冷至室温。第一部分基本常识以下实验室分析及行业标准中有关概念及规定二、取样量的准确度1.试验中供试品与试药等“称量”或“量取”的量，均以阿拉伯数码表示，其精确度可根据数值的有效数位来确定，如称取“0.1g”，系指称取重量可为0.06～0.14g；称取“2g”，系指称取重量可为1.5～2.5g；称取“2.0g”，系指称取重量可为1.95～2.05g；称取“2.00g”，系指称取重量可为1.995～2.005g。2.“精密称定”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。3.“称定”系指称取重量应准确至所取重量的百分之一。4.“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精密度要求。5.“量取”系指可用量筒或按照量取体积的有效位数选用量具。6.取用量为“约”若干时，系指取用量不得超过规定量的±10%。第一部分基本常识以下实验室分析及行业标准中有关概念及规定三、试验精密度1.恒重系指供试品连续两次干燥或炽灼后的重量差异在0.3mg以下的重量；干燥至恒重的第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1小时后进行；炽灼至恒重的第二次称重应在继续炽灼30分钟后进行。2.试验中规定“按干燥品（或无水物，或无溶剂）计算”时，除另有规定外，应取未经干燥（或未去水，或未去溶剂）的供试品进行试验，并将计算中的取用量按检查项下测得的干燥失重（或水分，或溶剂）扣除。3.试验中的“空白试验”，系指在不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下，按同法操作所得的结果；含量测定中的“并将滴定的结果用空白试验校正”，系指按供试品所耗滴定液的量（ml）与空白试验中所耗滴定液量（ml）之差进行计算。4.试验时的温度，未注明者，系指在室温下进行；温度高低对试验结果有显著影响者，除另有规定外，应以25℃±2℃为准。第一部分基本常识以下实验室分析及行业标准中有关概念及规定四、试验用水，除另有规定外，均系指纯化水。酸碱度检查所用的水，均系指新沸并放冷至室温的水。五、酸碱性试验时，如未指明用何种指示剂，均系指石蕊试纸。六、液体的滴，系在20℃时，以1.0ml水为20滴进行换算。七、本版药典使用的滴定液和试液的浓度，以mol/L（摩尔/升）表示者，其浓度要求精密标定的滴定液用“XXX滴定液（YYYmol/L）”表示；作其他用途不需精密标定其浓度时，用“YYYmol/LXXX溶液”表示，以示区别。第一部分基本常识以下实验室分析及行业标准中有关概念及规定八、限度1.标准中规定的各种纯度和限度数值以及制剂的重（装）量差异，系包括上限和下限两个数值本身及中间数值。规定的这些数值不论是百分数还是绝对数字，其最后一位数字都是有效位。试验结果在运算过程中，可比规定的有效数字多保留一位数，而后根据有效数字的修约规则进舍至规定有效位。计算所得的最后数值或测定读数值均可按修约规则进舍至规定的有效位，取此数值与标准中规定的限度数值比较，以判断是否符合规定的限度。2.原料药的含量（%），除另有注明者外，均按重量计。如规定上限为100%以上时，系指用本药典规定的分析方法测定时可能达到的数值，它为药典规定的限度或允许偏差，并非真实含有量；如未规定上限时，系指不超过101.0%。第一部分基本常识以下为药典、行业标准中有关概念及规定九、溶解度试验法：除另有规定外，称取研成细粉的供试品或量取液体供试品，置于25℃±2℃一定容量的溶剂中，每隔5分钟强力振摇30秒钟；观察30分钟内的溶解情况，如看不见溶质颗粒或液滴时，即视为完全溶解。十、含量测定必须平行测定两份，其结果应在允许相对偏差限度之内，以算术平均值为测定结果，如一份合格，另一份不合格，不得平均计算，应重新测定。第二部分实验室常用玻璃仪器烧杯锥形瓶碘量瓶圆（平）底烧瓶圆底蒸馏烧瓶凯氏烧瓶第二部分实验室常用玻璃仪器洗瓶量筒、量杯容量瓶酸式滴定管碱式滴定管微量滴定管第二部分实验室常用玻璃仪器自动滴定管移液管活塞式移液管抽吸移液管电动移液管器手动移液管器移液管的使用称量瓶细口瓶广口瓶广口瓶下口瓶第二部分实验室常用玻璃仪器滴瓶玻璃漏斗布什漏斗梨形分液漏斗筒形分液漏斗球型分液漏斗卷口试管普通试管具支试管平底试管离心试管第二部分实验室常用玻璃仪器比色管蛇形冷凝管直型球型空气冷凝管抽滤瓶表面皿玻璃研钵刚玉研钵磁研钵第二部分实验室常用玻璃仪器普通干燥器真空干燥器垂熔玻璃漏斗垂熔玻璃坩埚第三部分玻璃器皿清洗方法玻璃仪器的洗涤方法1.洁净剂及其使用范围最常用的洁净剂有肥皂、合成洗涤剂（如洗衣粉）、洗液（清液）、有机溶剂等。肥皂、合成洗涤剂等一般用于可以用毛刷直接刷洗的仪器，如烧瓶、烧杯、试剂瓶等非计量及非光学要求的玻璃仪器。肥皂、合成洗涤剂也可用于滴定管、移液管、量瓶等计量玻璃仪器的洗涤，但不能用毛刷刷洗。洗液多用于不能用毛刷刷洗的玻璃仪器，如滴定管、移液管、量瓶、比色管、玻璃垂熔漏斗、凯氏烧瓶等特殊要求与形状的玻璃仪器；也用于洗涤长久不用的玻璃仪器和毛刷刷不下的污垢。第三部分玻璃器皿清洗方法2.洗液的配制及说明铬酸清洁液的配制：处方1处方2重铬酸钾（钠）10g200g纯化水10ml100ml（或适量）浓硫酸100ml1500ml制法：称取处方量之重铬酸钾，于干燥研钵中研细，将此细粉加入盛有适量水的玻璃容器内，加热，搅拌使溶解，待冷后，将此玻璃容器放在冷水浴中，缓慢将浓硫酸断续加入，不断搅拌，勿使温度过高，容器内容物颜色渐变深，并注意冷却，直至加完混匀，即得。第三部分玻璃器皿清洗方法说明：（1）硫酸遇水能产生强烈放热反应，故须等重铬酸钾溶液冷却后，再将硫酸缓缓加入，边加边搅拌，不能相反操作，以防发生爆炸。（2）清洁液专供清洁玻璃器皿之用，它能去污去热原的作用的原因为本品具有强烈的氧化作用。重铬酸钾与浓硫酸相遇时产生具有强氧化作用的铬酐：（3）铬酸的清洁效力之大小，决定于反应中产生铬酐（CrO3）的多少及硫酸浓度之大小。铬酐越多，酸越浓，清洁效力越好。（4）用清洁液清洁玻璃仪器之前，最好先用水冲洗仪器，洗取大部分有机物，尽可能仪器空干，这样可减少清洁液消耗和避免稀释而降效。第三部分玻璃器皿清洗方法（5）本品可重复使用，但溶液呈绿色时已失去氧化效力，不可再用，但能更新再用。更新方法：取废液滤出杂质，不断搅拌缓慢加入高锰酸钾粉末，每升约6～8g，至反应完毕，溶液呈棕色为止。静置使沉淀，倾取上清液，在160℃以下加热，使水分蒸发，得浓稠状棕黑色液，放冷，再加入适量浓硫酸，混匀，使析出的重铬酸钾溶解，备用。（6）硫酸具有腐蚀性，配制时宜小心。（7）用铬酸清洁液洗涤仪器，是利用其与污物起化学反应的作用，将污物洗去，故要浸泡一定时间，一般放置过夜（根据情况）；有时可加热一下，使有充分作用的机会。第三部分玻璃器皿清洗方法3.洗涤玻璃仪器的方法与要求（1）一般的玻璃仪器（如烧瓶、烧杯等）：先用自来水冲洗一下，然后用肥皂、洗衣粉用毛刷刷洗，再用自来水清洗，最后用纯化水冲洗3次（应顺壁冲洗并充分震荡，以提高冲洗效果）。计量玻璃仪器（如滴定管、移液管、量瓶等）：也可用肥皂、洗衣粉的洗涤，但不能用毛刷刷洗。（2）精密或难洗的玻璃仪器（滴定管、移液管、量瓶、比色管、玻璃垂熔漏斗等）：先用自来水冲洗后，沥干，再用铬酸清洁液处理一段时间（一般放置过夜），然后用自来水清洗，最后用纯化水冲洗3次。（3）洗刷仪器时，应首先将手用肥皂洗净，免得手上的油污物沾附在仪器壁上，增加洗刷的困难。（4）一个洗净的玻璃仪器应该不挂水珠（洗净的仪器倒置时，水流出后器壁不挂水珠）。第三部分玻璃器皿清洗方法二、玻璃仪器的干燥（1）晾干不急等用的仪器，可放在仪器架上在无尘处自然干燥。（2）急等用的仪器可用玻璃仪器气流烘干器干燥（温度在60～70℃为宜）。（3）计量玻璃仪器应自然沥干，不能在烘箱中烘烤。三、玻璃仪器的保管要分门别类存放在试验柜中，要放置稳妥，高的、大的仪器放在里面。需长期保存的磨口仪器要在塞间垫一张纸片，以免日久粘住。第四部分容量玻璃仪器的规格和使用规则玻璃计量容器都以毫升为计量单位，在量器上用ml标出，计量的定条件以20℃为标准，故量器上都标有20℃字样。玻璃容器分量入式和量出式两种。量入式：用于测定注入量器中的液体，标有TC或E，定量标记，一般是由下往上递增。量出式：用于测定从容器中倾出的液体，标有TD或A，定量标记，一般是由上往下递增。通常量出式的计量容器使用时管尖（如移液管）残留液体不得吹出，而量入式的吸管则必须将管尖残留液体吹出。第四部分容量玻璃仪器的规格和使用规则1.量杯、量筒用于要求不甚精确的液体之测量，量杯是量出式的，量筒则有量入式和量出式的两种，规格10、25、50、100、200、250、500、1000ml。2.容量瓶是一种较准确的容量仪器，用容量瓶配制溶液时，应先将固体试剂在烧杯中用溶剂溶解后定量转入容量瓶中，然后加溶剂稀释至标线。10、25、50、100、250、500、1000ml。3.刻度吸管是生化检验中使用最广泛的计量仪器，其准确度较高，使用灵活方便，用橡皮球吸液，根据所需量正确选用不同容量规格的吸管。0.1、0.15、0.2、0.25、0.5、1、2、5、104.微量加样器第五部分常用玻璃仪器的容量校正容积的基本单位是升，升是在真空中水密度最大温度（3.98℃）时1000g水的体积。由于容器的容积随温度而变化，所以，必须确定温度，量器才有其意义。一般为20℃。容量玻璃仪器的计量精度校正包括检定和修正，检定符合等级要求者为合格，超过等级允许误差的可降级使用，特殊的可重新划线定量。第五部分常用玻璃仪器的容量校正校正方法：一般都采用称量法，检定时应考虑的三个因素1.温度对水（或水银）密度的影响2.温度对容量仪器（玻璃的热胀冷缩）的影响3.称量时，空气浮力对重量的影响其中影响最大的是1，故校正时的温度尽可能选择靠近20℃称量容器容纳的蒸馏水，然后根据在该温度时1ml水的重量dt，将称得的水重Wt换算成容积VtVt=Wt/dt（1）由于量器上标示的容积数是指在20℃时的体积，故须将此容积Vt换算为量器标示温度（20℃）的容积V20℃玻璃的膨胀系是0.000026。Vt=V20℃+V20℃（t—20）×0.000026（2）将式（2）代如式（1）得V20℃+V20℃（t—20）×0.000026=Wt/dt整理V20℃=Wt/dt[1+（t—20）×0.000026]（3）令dt[1+（t—20）×0.000026]=Wˊ得V20℃=Wt/Wˊ（4）Wˊ表示在不同温度下充满20℃时容积为1ml的玻璃容器中的水于空气中用黄铜砝码称得的重量。第五部分常用玻璃仪器的容量校正（一）刻度吸管的校正1.将欲校正的吸管洗净（铬酸洗液浸泡）至内壁不沾丝毫水珠烘干。2.取（清洗干燥处理过的）50ml锥型瓶或小烧杯置分析天平上，准确称出其重量W1。3.用欲校正的吸管吸取蒸馏水至刻度，然后防入锥型瓶（吸管使用按正规操作进行），再在分析天平上称量，得总重量W2，二次重量之差（W2—W1）即为水的重量Wt。4.根据吸管所量出水的重量及水的温度，然后以式（4）计算其容积。第五部分常用玻璃仪器的容量校正（二）容量瓶的校正将洗净、干燥、带塞的容量瓶准确称重（准确至0.01g即可），注入蒸馏水至水的弯月面底部与容量瓶颈上的标线相切。记录水温，用滤纸吸干瓶颈内水滴，盖上瓶塞准确称重两次称重之差即为容量瓶内容纳的水重。用实验温度时1毫升水的重量来除水重，即可算出容量瓶的实际毫升数（即20℃时的真是容积）。结果处理和周期：根据上述自校项目的自校数据，查表，判定其是否符合相应的标准等级。自校周期为三年，校正工作结束，记录于“仪器、设备自校记录”中。第六部分试剂的分类与保管一、化学试剂的等级标准（一）国产化学试剂一般分为四级特殊规格试剂，BR（生物试剂）BS（生物染色素）Ind（指示剂）按基本用途分，不分规格等级。FCP（层析）、US（光学分析）、SSS或SP（光谱纯）、FEA（元素分析）有的化学试剂还有同分异构体，如DL-α-氨基丙酸、L-α-氨基丙酸。（二）国外生产化学试剂常见国外试剂的厂牌和国家：E.Merck（德国）、B.D.H（英国）、Fluka（瑞士）、Jap（日本）、Sigma（美国）第六部分试剂的分类与保管二、化学试剂的保管（一）一般化学试剂的保管按固体、液体分类，并归类按序排列，并做好登记，贮存时应注1.密封所有试剂用后必须将瓶塞塞紧，以防潮解、风化或挥发。如CaCl2、Na2HPO4·12H2O、I22.避光光照可使一些试剂变质，产生氧化、分解、变色等现象。苯甲醛→苯甲酸、氯化汞→氯化亚汞邻甲苯胺遇光变成红棕色。3.阴凉试剂自身分解速度与空气反应速度都受温度的影响，这种影响通常是随温度升高而增加。（二）化学试剂危险品的保管化学试剂危险品包括：易燃、易爆、剧毒、腐蚀、氧化、放射等。1.易燃、易爆试剂远离火源，搬动时，防止剧烈摩擦和撞击，不能与强氧化剂混放在一起。2.腐蚀性试剂储存和搬动时应避免撞击或强力震动使容器破裂，储存时应选择耐腐蚀材料作架子。3.剧毒试剂半致死量在50mg/kg以下者，均为剧毒品，应专人专柜加锁保管，严格登记请领。致谢！感谢大家参加此次培训，谢谢！