柱色谱如何选择展开剂

。一般将柱层析用的吸附剂撒布到平面如玻璃片上,形成一薄层进行层析时一即称薄层层析。其原理与柱层析基本相似。 1.薄层层析的特点:薄层层析在应用与操作方面的特点与柱层析的比较。 2.吸附剂的选择:薄层层析用的吸附剂与其选择原则和柱层析相同。主要区别在于薄层层析要求吸附剂(支持剂)的粒度更细,一般应小于250目,并要求粒度均匀。用于薄层层析的吸附剂或预制薄层一般活度不宜过高,以Ⅱ~Ⅲ级为宜。而展开距离则随薄层的粒度粗细而定,薄层粒度越细,展开距离相应缩短,一般不超过10厘米,否则可引起色谱扩散影响分离效果。 3.展开剂的选择:薄层层析,当吸附剂活度为一定值时(如Ⅱ或Ⅲ级),对多组分的样品能否获得满意的分离,决定于展开剂的选择。中草药化学成分在脂溶性成分中,大致可按其极性不同而分为无极性、弱极性、中极性与强极性。 显色剂: 碘: 适用于不饱和或者芳香族化合物 配制方法:在100ml 广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。 或者在瓶中,加入10g 碘粒,30g 硅胶 高锰酸钾 适用于含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛 配制方法:1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3 个月 磷钼酸(PMA) 广谱 配制方法:10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇 紫外灯 适用于含共轭基团的化合物,芳香化合物 硫酸铈: 生物碱 配制方法:10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液 氯化铁 苯酚类化合物 配制方法:1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液. 桑色素(羟基黄酮) 广谱, 有荧光活性 配制方法:0.1% 桑色素+甲醇 茚三酮 适用于氨基酸 配制方法:1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸 二硝基苯肼(DNP) 适用于醛和酮 配制方法:12g 二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL 乙醇 香草醛(香兰素) 广谱 配制方法:15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸 溴甲酚绿 适用于羧酸,pKa<=5.0 配制方法:在100ml 乙醇中,加入0.04g 溴甲酚绿,缓慢滴加0.1M的NaOH 水溶液,刚好出现蓝色即至。 钼酸铈 广谱 配制方法:235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL 浓硫酸 茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1 广谱 配制方法:135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL 茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀. 茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2 适用于萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine) 配制方法:茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)经常需要利用溶剂的极性大小,对展开剂的极性予以调整