辣椒素单剂实验报告

农药室内生物活性测定试验 试验名称： 辣椒素用浸虫法对小菜蛾室内生物活性测定试验 试 验 依 据： 农药室内生物活性测定试验准则 杀虫剂NY/T1154.6-2006 试验委托单位： 联合国南通农药剂型开发中心 试 验 单 位： 扬州大学园艺与植物保护学院 技术负责人： 祝树德 试 验 地 点： 扬州大学农药生测室 报告完成日期： 2009年9月6日     辣椒素用浸虫法对小菜蛾室内生物活性测定试验 1 试验目的 小菜蛾Plutella xylostella ( Linnaeus)是十字花科蔬菜的主要害虫之一。　为探求新型生物农药对小菜蛾的控制，受联合国南通农药剂型开发中心委托将辣椒素对小菜蛾进行室内生物活性测定，为辣椒素的开发利用提供依据。本试验将辣椒素原药配制成不同浓度的制剂，用浸虫法对小菜蛾进行室内生物活性测定试验。 2 与方法 2.1试验条件 2.1.1供试昆虫 供试昆虫为小菜蛾Plutella xylostella ( Linnaeus) 2龄幼虫。 2.1.2培养条件 将小菜蛾接种在大白菜苗Brassica campestris L上饲养繁殖。温度25℃±1℃, 相对湿度70%,光照14 h, 黑暗10h。繁殖期间（6月－9月）未喷施任何农药，繁殖5～6代后，取2龄幼虫为供试虫源。 2.1.3仪器设备 广口瓶，吸虫器，镊子，光照培养箱，电子天平，滤纸，烧杯，培养皿，移液器，毛笔，浸虫网兜，秒表等。 2.2试剂 2.2.1试验药剂 辣椒素（Capsaicinoids）：95%原药由中国科学院理化所和九州环境材料高新技术公司提供 对照药剂：2%阿维菌素（Avermectins）乳油由上海农乐农化 有限公司提供 2.2.2其他试剂 丙酮（溶剂）、吐温80（表面活性剂） 2.3试验处理 2.3.1剂量设置 将辣椒素原药用丙酮溶解配制成浓度为1%的制剂100ml，其中辣椒素1g，丙酮96ml,吐温80适量（3ml）。 2.3.2试验处理及重复设计 在预备试验的基础上将配制的1%辣椒素制剂稀释成5个浓度，分别为20mg a.i./L、10 mg a.i./L、5mg a.i./L 、2.5mg a.i./L和1.25mg a.i./L；另设不含药剂的相应有机溶剂处理为对照，稀释成5个浓度，分别为0.99ml a.i./L、0.495ml a.i./L、0.2475ml a.i./L、0.12375ml a.i./L、0.061875 ml a.i./L；对照药剂为2％阿维菌素乳油，稀释成5个浓度，分别为20mg a.i./L、10 mg a.i./L、5mg a.i./L 、2.5mg a.i./L和1.25mg a.i./L；以上每个浓度处理供试小菜蛾120头，每个药剂浓度处理4次重复。 2.4试验方法 采用浸虫法，参照农业部农药室内生物活性测定试验准则杀虫剂NY/T1154.6-2006的规定进行试验。摘取新鲜青菜叶片放入10×2cm的培养皿内，将小菜蛾2龄幼虫置于浸虫网兜内在预先配好的处理药液内浸5s后转移至相应培养皿中的叶片上（每个培养皿30头），并用保鲜膜覆盖，放入25℃的恒温箱内饲养。于药后24小时检查死虫数，计算每个处理的平均死亡率，并计算校正死亡率。 2.5数据调查及统计分析 2.5.1校正死亡率计算 试验24小时后检查死亡虫数，计算死亡率并统计校正死亡率 死亡率（%）= 死亡虫数 ×100 供试总虫数（活虫数） 校正死亡率(%)= 药剂处理死亡率-对照死亡率 ×100 100-对照死亡率       2.5.2 LC50的计算 将各试验浓度转换成对数值（x）,校正死亡率转换成机率值（y），以最小二乘法算出毒力回归方程y=a+bx，然后计算各个药剂的LC50，并计算95%置信区间及b值和标准误。 3、结果与分析 将药剂辣椒素、阿维菌素不同浓度处理24小时后对小菜蛾的试验结果原始数据整理于附表。将附表中各药剂试验浓度转换为对数值x，校正死亡率转换成机率值y，于表1。根据表1结果计算其回归方程，并计算LC50，结果见表2。 从表2可以看出，24小时后辣椒素和阿维菌素对小菜蛾的致死中浓度LC50分别为4.29 mg a.i./L和2.44mg a.i./L。 表1  辣椒素对小菜蛾室内生物活性测定数据（24小时） 药剂 浓度（mg a.i./L） Log(浓度) （X） 校正平均死亡率 机率值（Y） 辣椒素原药 20 1.3010 0.8148 5.8958 10 1.0000 0.6296 5.3309 5 0.6990 0.6204 5.3065 2.5 0.3979 0.4907 4.9768 1.25 0.0969 0.1481 3.9556 对照药剂（2％阿维菌素乳油） 20 1.3010 0.8182 5.9085 10 1.0000 0.7091 5.5508 5 0.6990 0.6273 5.3247 2.5 0.3979 0.4455 4.8629 1.25 0.0969 0.1455 3.9440 溶剂对照 0.99 -0.0044 / / 0.495 -0.3054     0.2475 -0.6064     0.12375 -0.9075     0.061875 -1.2085               表2 2辣椒素对小菜蛾室内生物活性测定结果（24小时） 药剂 毒力回归式 LC50 95%置信限 b值 标准误 辣椒素原药 y =1.4067x +4.1099 4.29 3.59~5.13 1.4067 0.39 对照药剂%2阿维菌素和、 y =0.9698x +4.6249 2.44 1.66~3.57 0.9698 0.48             4、结论与评价 室内生物活性测定结果表明：辣椒素对小菜蛾的LC50为4.29mg a.i./L，对照药剂阿维菌素对小菜蛾的LC50为2.44mg a.i./L。结果表明辣椒素对小菜蛾具有明显的生物活性，可进一步开发为作防治小菜蛾的有效杀虫剂。 试验过程中未发现辣椒素对人体有异常反应。 （原始数据见附表1至附表2） 扬州大学园艺与植物保护学院 试验技术负责人：祝树德 参加人员：朱伟  张云霞  吴丽莉 2009年9月6日 附表1  辣椒素对小菜蛾生物活性测定原始数据表（24小时） 浓度（mg a.i./L） 重复 试虫数 死虫数 死亡率(%) 校正死亡率(%) 20 1 30 23 76.67 74.5455   2 30 22 73.33 70.9091   3 30 27 90.00 89.0909   4 30 28 93.33 92.7273   ∑ 120 100 83.33 81.8182 10 1 30 17 56.67 52.7273   2 30 21 70.00 67.2727   3 30 23 76.67 74.5455   4 30 19 63.33 60.0000   ∑ 120 80 66.67 63.6364 5 1 30 16 53.33 49.0909   2 30 20 66.67 63.6364   3 30 22 73.33 70.9091   4 30 21 70.00 67.2727   ∑ 120 79 65.83 62.7273 2.5 1 30 13 43.33 38.1818   2 30 17 56.67 52.7273   3 30 19 63.33 60.0000   4 30 16 53.33 49.0909   ∑ 120 65 54.17 50.0000 1.25 1 30 8 26.67 20.0000   2 30 8 26.67 20.0000   3 30 7 23.33 16.3636   4 30 5 16.67 9.0909   ∑ 120 28 23.33 16.3636 溶剂对照 / 120 10 8.33 /             附表2 2％阿维菌素乳油对小菜蛾生物活性测定原始数据表（24小时） 浓度（mg a.i./L） 重复 试虫数 死虫数 死亡率(%) 校正死亡率(%) 20 1 30 23 76.67 74.5455   2 30 30 100.00 100.0000   3 30 26 86.67 85.4545   4 30 21 70.00 67.2727   ∑ 120 100 83.33 81.8182 10 1 30 20 66.67 63.6364   2 30 22 73.33 70.9091   3 30 23 76.67 74.5455   4 30 23 76.67 74.5455   ∑ 120 88 73.33 70.9091 5 1 30 20 66.67 63.6364   2 30 22 73.33 70.9091   3 30 18 60.00 56.3636   4 30 19 63.33 60.0000   ∑ 120 79 65.83 62.7273 2.5 1 30 18 60.00 56.3636   2 30 13 43.33 38.1818   3 30 11 36.67 30.9091   4 30 17 56.67 52.7273   ∑ 120 59 49.17 44.5455 1.25 1 30 7 23.33 16.3636   2 30 4 13.33 5.4545   3 30 2 6.67 -1.8182   4 30 13 43.33 38.1818     120 26 21.67 14.5455 溶剂对照 / 120 10 8.33 /