【doc】鸡胃的副交感节前神经元和感觉神经元的定位——HRP法研究

【doc】鸡胃的副交感节前神经元和感觉神经元的定位——HRP法研究 鸡胃的副交感节前神经元和感觉神经元的 定位——HRP法研究 f 畜牧兽医,1995,24(6),525—551 etae~erlnarlaelZootechnlcaS~nlea 鸡胃的副交感节前神经元和感觉 神经元的定位…一HRP法研究 重鲨j (南京农业大学兽医系) .型—喜, (甘肃农业大学兽医系) 摘要 州 本文用HRP法研究了鸡胃的副交感节前神经元和感觉神经元的定位,结果如下:1.将HRP 注入腺胃盎侧壁后,标记的感觉神经元位于双倒颈静脉神经节和远神经节,以颈静脉神经节占优 势(63.2);标记的运动神经元位于双侧迷走神经背侧运动核的大细胞亚核后部,中间小细胞 亚核和腹删小细胞亚核前部,在多形细胞亚核及疑核内也出现少数标记细胞.2.将HRP注入肌 胃左删壁后,标记的感觉神经元位于双侧颈静脉神经节和远神经节,以远神经节占优势(93.8), 标记的运动神经元位于双侧大细胞亚核,多形细胞亚核和腹侧小细胞亚拔后部.实验结果明, 鸡胃的副交摩节前神经元在迷走神经背侧运动核内的分布有局部定位关系,而感 觉神经元在密觉 引 , 酥 近十多年来,许多研究者通过给胃壁或神经干内注射HRP根过氧化物酶),分别 对猫,兔,大鼠[3--!,猪,鸽"和北京鸭u胃的神经支配作了研究.一些研究者认 为,胃除了受迷走神经背侧运动核(DMN)支配外,也受疑核支配,胃在DMN内的投影 .它在DMN内的投影弥散分布,有定位关系.另一些研究者认为胃只受DMN支配 无定 位关系.笔者尚未在文献中见到关于鸡胃副交感节前神经元和感觉神经元定位的研究,为此 特作这方面的工作,以便为禽类生理学等相关学科的研究提供形态学依据,丰富比较神经解 剖学的内容. 材料和 本实验选用成年健康母鸡(京白和依莎褐)11只,分为两组.第1组4只,给其腺胃左 侧壁内分点注入18~25#120%HRP水溶液.第2组7只,给其肌胃左侧壁内分Ai~.Aso ~ 100pli5%,20HRP水溶液.术后腺胃组动物存活2,3天,肌胃组动物存活3,5 天.探麻后经左心室灌注固定,取双侧颈静脉神经节,岩神经节,远神经节,延髓和C节 车文于1992年3月6日牧到. 一 ,\一, 526畜牧兽医24卷 段脊髓.上述材料浸入2o%蔗糖磷酸缓冲液中,置4.C冰箱过夜.翌日制作50#m厚 连续 冰冻横切片(每组各做一套纵切片),按Mesulam等"TMB(四甲基联苯胺)法作呈色 反应,1中性红复染,透明封片,明视野下观察,统计标记细胞并照像. 结果 一 ,关于DMN亚核的划分为了便于描述胃的运动神经元在DMN内的确切位置,本文 根据简便易行的原则,大致上将DMN分为三区九个亚核(图1).闩后为尾区,闩前分为 两区,位于闩紧前方的后隆起内者为中医,居于最前方的前隆起内者为前区.尾区分为两个 亚核:尾小细胞亚核(CPC)和尾中细胞亚核(cMc).中医细分为五个亚核:大细胞亚核 (Mc),多形细胞亚核(Hc),中间小细胞亚核(IPC),腹外侧亚核(VL)和腹侧小细胞 亚核(vPc)后部前区细分为三个亚核:前背侧中小细胞亚核(ADMPC),前小细胞亚核 (APC)和VPC前部. 圈1DMN亚桉结构(纵切面).图中束表示VL,缩写符号意义见正文3—1. Fig.ISubnuclearorganizationoftheDMN(1ongitudinalsection). SubnuclellAPCanteriorparvicelIular,ADMPCzt~teriordorsalm葩ioDnrvceIIular IPCintermodialparvlcellular.VYCventr丑|parvicellular. HCheterocelIular,MCmagnocellular. CMCcaudalmodiocellular.CPCcaudalparvicellu]ar. VLventrolateral(notshowninFig.1). =,DMN爰核内出现的标记细胞 1.将HRP注入腺胃壁后,标记的运动神经元主要位于双侧MC后部(占27.8%), IPC(33.g%)和VPC(35.3),少数也见于疑核和HC(表l和图2中照片l,2). 例子在MC内的标记细胞分布于闩部至闷前0.4ram的范围内,即MC的后部,个别MC的 前部偶见散在数个标记细胞,胞体为梭形和多边形.IPC内的标记细胞分布在闩前1.2,1.5 inm曲范围内,核前部内的标记细胞与VPC前部背侧份内的相延续狍体为卵圆形,梭形和 多边形,大多定向排列.VPC内的标记细胞分布于核的中前部,多位于背侧,其后端内的 标记细胞与IPC前部内的相延续,这一现象在纵切面上尤为明显胞体为梭形或多边形. 疑核内也出现少数标记细胞,多位于闩后部.胞依为卵圆形和多边形. 6期雷治海,鲥英鸡胃曲副交感苇莆种经元和感哉神经元的定位——HRp珐奇}竞527 ._【.?10:???;0口40一 水替S;;口矗暑口粹霉螭0口 言量芒苗.u暮智rl0吉B【1乱H毫拓燃1I ,u,0鼍?口ol10昌'II,武u'I,0dI,量,u掌..l嚣? 琶蛊H器三斌嚣蓝鞋.暑1昌3肆媒盲lL+1,啦lL _dI?Id案拳稃乏萝茜d..[?】嚣莓泓H?Iq.Jn羞.口苫.坦 :?f譬8蛊雷嚣三 L .『骂器 Hn … n『嚣;雷骂 n? ..???N? :I=磊昌器薹 NH?.q? .『n骂器霜= n ??h.?h n『嚣台篙口 .禽一霉昌嚣?n_n譬 Io 簧t-q薯鲁00Hn' .u一??n ?_N= ? ? N0H?々??0?h0??0 H?H0一h0 ???NH=矗? ? ?HH0?.誉葛兰呈嚣誊N0?Hh??苫HN n, …?H?? h0?0譬宝要薯苗葛?nI. 一砷 ?? 0?h??=竺器蹿?00n? …? Uh??h?n ……'nh?? …? _ ?? 0hn0??.=要星?nHH …… Hh??H H???L1N? NnH?H? N 竹h?竹竹曲 当?h??h''Hnnn 0' 嚣器嚣兽善翟HH… ?要是昌昌器.富N 2? _.N?嚣器苫暑言善尽量 ? 驾h?罱鐾=置 ? 00?一曲 ……?兰鲁曼兰兰善暑罾西NH口hhUH =n?n?口,00甘hH?? 昌2器翟三营暑…h Hhch?H =啦篇譬暑苫磊暑兰兰嚣;L0? ??三H一g 《.?N? ? N要? 骚HN?h?.三= 鞋趟鹫犯in1l…0J蓦瞻Pz10 晋日目0目?】I0.u苗II0q0I,00一目-?;日sI一??=0声日_?_0?_声日_一4. 翟l,日_?工_0一声日 群末蒜蕾器驻骣罢f翻一嚣,r燃苗II辣l_群 害牧兽医 图2显微摄影照片说明Fig.2Explanationsofthephotomierograptm 1.示MC内标记的腺胃运动神经元,横切面,100× ShewinthelabelledmotoneuronsoftheproventriculusintheMC,transverse secti~a100x 2.示IPC(t)和VPC前部(1t)内标记的腺胃运动神经元,纵切面,100x ShewingtheIahelledmotoneuronsoftheDroventriculu~intheIPC(t)and thecranialpartsoftheVPC(11),longitudinalsection,10O× g.示远神经节内标记的腺胃感觉神经元,示双级细胞,横切面,100x 3.Showingthelabelledsensoryneuronsoftheproventrle~lusinthedistalganglia ofthevagusnerYe,andtshowsabipolar,transversesection,1O0× 4.示MC内标记的肌胃运动神经元,横切面,100× ShowingthelabelledmotoneuronsofthegizzardintheMC,transversesection, 100 5.示HC内标记的肌胃运动神经元,横切面,100x ShowingthelabelledmotoneuronsofthegizzardintheHC.transverseBec— tlon.100× 6.t示VPC后部内标记的肌胃运动神经元,横切面,lOOx tShewingthelabeHedmotonouroR$ofthegizzardinthecaudalpartsofthe VPC,tranflyersesection,1O0× 2.将HRP注入肌胃侧壁后,标记的运动神经元位于双侧MC(占33.5),HC(49.1) 和VPC(17.4)(表l和图2中照片4,6).MC内的标记细胞分布于闩部至闩前0.7 mm的范围内,敞在于整核内,胞体为圆形,卵圆和多边形Hc内的标记细胞分布于 闩 前0.7,1.4mra的范围内,敞在于整个核内,内倒部似乎较多.胞体为卵圆形梭形和 多 边形.VPC内的标记细胞散在分布于核的中后部,背侧份分布较多,胞体为卵圆形, 梭形 和多边形.在一例疑核中也发现一个标记细胞. 6期雷治海,蜘英:鸡胃的副交感节前神经元和感觉神经元的定位——HRP法研究529 三,感觉神经节内出现的标记细胞 1.将HRP注入腺胃后,标记的感觉神经元位于颈静脉神经节和远神经节内.以颈静 脉神经节占优势(63.2).此二神经节内的标记细胞胞体为圆形,卵圆形和纺锤形,散在 分布于整个神经节内.但在远神经节内出现少数双极细胞,可见从胞体的两极各发出一条 突起,或从胞体的一侧发出二条突起(图2中照片3). 2.将HRP注入肌胃后,标记的感觉神经元出现于颈静脉神经节和远神经节内,以远 神经节占优势(占93_8).此二神经节内标记细胞的形态及分布情况同腺胃组. 讨论 一 ,关于胃运动神经元在DMN内的定位 据文献报道,有许多研究结果表明在DMN内存在"胃区",即胃的运动神经元定位于 DMN内某一较局限的区域内.Bell(190o)用染色质溶解法反刍动物(山羊)胃在 DMN内的投影范围很小,主要集中在闩前一段内.Watanabe(1908)认为鸡胃受DMN 前区和中区的腹侧和内侧部支配.Takayama等(1982)对大鼠的研究也支持胃趋向于定 位在闩部和闩前部DMN复合体的中部.Fox和Powley(1985)"用荧光法证实大鼠胃前, 后支的节前神经元分别位于左侧和右侧DMN的内侧2/3区.张雅莉(1987)用HRP法 证明北京鸭腺胃的运动神经元主要位于DMN前中区和前区的中间亚核和腹侧亚核,支配 肌胃背侧和腹侧厚肌的集中在DMN开张区的背侧亚核,而背,腹侧薄肌的主要集中在开张 区和前区.Katz和Karten(1985)认为鸽子腺胃代表区主要位于后背侧多形细胞亚核, 后中间中细胞亚核和尾背侧大细胞亚核.但也有不支持在DMN内存在"胃区"的报道, "".本文结果表明,鸡腺胃代表区集中在认为胃的运动神经元广泛分布于DMN内 DMN 的MC的后部,IPC和VPC的中前部,肌胃的位居MC,HC和VPC的中后部,与第一 种研究结果一致,即胃代表区主要集中在闩附近或闩前部DMN内(Fox和Powley的结果 例外),支持DMN内存在"胃区"的观点. =,关于胃是否受疑核支配的问题 以往认为,疑核发出的特殊内脏运动纤维支配咽喉和食管横纹肌.但近来有一些研究结 果表明,疑核也发出纤维支配胸腹腔内脏器官.因为迷走神经中的副交感纤维支配这些内畦 器官,既然疑核也支配这些畦器,就认为它具有副交感性质.罗政良,Coil和Norgren (1979)及Leslie等(1982)分别用费光法和HRP法证明大鼠胃受双例疑核支配. 本实验将HRP注入鸡腺胃后,在疑核内也见到少数标记细胞,支持前人胃受疑核支配及疑 核具有副交感性质的观点.Windle(1933)"也从猫的胚胎发生学方面提供了疑核与DMN 同源的证据,他发现在妊娠的早期,迷走神经节前神经元在神经管的紧下方形成一个致密的 核,在后来的发育过程中,大量的神经元向腹外侧迁移,迁移了的神经元构成疑核,留在原 位的组成DMN,而中间带的神经元可能是没有完垒迁移面离开正途的神经元.也 有胃只受 DMN支配的报道"".为何内畦器官既受DMN支配,也受疑核支配,以及DMN和疑棱 支配这些内脏器官中的何种结构,尚须明瞪. 三,关于胃的感觉神经元的定位爰形态 530害收兽睦24卷 关于鸟类胃传入神经元胞体的定位,张雅莉和路广会QgsT)B3已有报道,认为来自前 胃(腺胃)的迷走传入神经元胞体位于远神经节和颈静脉神经节内,其中前胃腹l畹4肌注入 HRP后,在颈静脉神经节出现的标记细胞数最多.来自肌胃的迷走传入神经元胞体主要位 于远神经节,在前背薄肌注射例,在颈静脉神经节内也出现标记细胞.本实验结果表明,腺 胃的感觉神经元位于双侧颈静脉神经节和远神经节,以颈静脉神经节占优势(63.2)}肌胃 的位于双侧颈静脉神经节和远神经节,以远神经节占优势(93.8).本文结果与张雅莉和 路广会的基本一致.有趣的是,腺胃和肌胃均位于腹腔中且顺次相连,但它们的传入神经元 在上述二神经节内的分布各有特点,腺胃的以颈静脉神经节占优势,肌胃的以远神经节为 主.这是否与其功能有关,有待深入探讨. 此外,本实验结果表明,远神经节内鸡胃的传入神经元大多数为假单极细胞,有少数为 双极细胞.关于远神经节内北京鸭胃的传入神经元是否也有双极细胞,张雅莉和路广会未作 报道.但王瑞忠和何飞鸿(1989)"分别报道远神经节内鸡睾丸和胸腺的感觉神经元 大 多数为双极细胞.远神经节内分布于内脏器官的这些双极细胞与假单极细胞在功 能上有无差 异,此二种神经元的比例与器官的功能有无关系,这些问题仍需深入研究. 参考文献 Yamamoto,T.eta1.Evidenceofthedualinnervationofthecatsto~chbythevagaldorsal motorandmedialsolitarynucleiasdemonstratedbythehorseradishperoxidasemethod.BrainRes., 1977.122:125. 李继硕等.家兔胃前壁的神经支配一HRP法研究.解剖,1982,13(4):389,3g 罗政良等.大鼠胃的神经支配一荧光双标记法研究.解剖,1987,18(4):370,385. 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Mesalam.MM.cta1.Additionalfactorsinfluencingthesendtlvityinthetetramethylbenzidin e :{{]]J—J ????… 6期雷治海,刘英:鸡胃的副交感节前神经元和感觉神经元的定位——HRP法研究 53l [13] [14] [15] [16] [17] [18] methodforhorseradishperoxidaseneurohistoehemistry.工 Histoeh.Cytoeh.,1980,28:l255,1259 Bell,FR.Thelocalizationwithinthedorsalmotornucleusofthevagusoftheefferentfibres totherumindntstomach.Anat.,1960,94:410~416. Watanabe,T.Astudyofretrogradedege=erationintheoagalnucleiofthefow1.1ap.Vet. Sei.,1968.80:331~340. Windle,WF.Neurofibrillardevelopmentinthecentralneryoussystemoftheeatembryos between8and12ramlong..Comp.Neuro1.,1933.58:643~723. 张雅莉,路广会.北京鸭再的传入神经元定位一HRP法研究.解 剖,1987,t8(2):16&~168. 王瑞忠.鸡睾丸的神经支配.cB—HRP珐研究.硕士学位论文,内蒙古农牧学 院,1989. 农牧学何飞鸿.鸡胸腺的神经支配一cB—HRP法研究.硕士学位论文,内蒙古 院,1989. L0CALIZAT10N0FTHEPARASYMPATHETICALPREGANGL10NIC NEUR0NSANDTHESENSoRYNEUR0NS0FCHICKENST0MACH BYMEANS0FRETR0GRADETRANSP0RT0FHRP LeiZhihai (NanlingAgriculturalUniversity) LiuYing (aans.AgriculturalUniversity) Abstract LocalizationoftheparasypatheticaIpreganglionleneuronsandthesensoryneurons ofchickenstomachwasinvestigatedinthisstudy.Theresultsareasfollows:1.Following injectionofHRP(horseradishperoxidase)intotheproventrieuhs,thelabelledsensory neuronswereseenbilaterallyinthejugularanddistalganglia,withthemajorityinthe jugularganglia(63.2),andthelabelledmotoneuronsbilaterallyinthecaudalparts ofthemagnoeellnlarsubnuclel(Mc),theintermedialparvlcellularsubnuclei0pc)and thecranialpartsoftheventralparvieellularsuhnuclei(vPc),withtheminorityinthe heterocellularsnbnuelei(Hc)andtbeamhiguousnucleus.2.Thelahelledsensoryneurons werefoundbilaterallyinthejugularanddistalganglia,withthemajorityinthedistal ganglia(93.8),andthelabelledmotoneuronsbilaterallyintheMC,theHCandthe caudalpartsoftheVPCafterinjectionofHRPintothegizzard.Theresultsshowthat thereisthetopographicaldistrihutionofthepraypatheticalpreganglionleneuronsof chickenstomachintheDMN(dorsalmotornucleusofthevagusnerve)andthescatte— reddistrlhutiouofthesensoryneuronsinthejugularanddistalganglia. KeywordsChicken,HRP,]nnervationofthestomach