皱叶酸模的化学成分研究(Ⅱ)

皱叶酸模的化学成分研究(Ⅱ) word格式论文 皱叶酸模的化学成分研究(?) 【摘要】 目的 研究皱叶酸模(Rumex crispus L.)的化学成分。 采用 硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析和ODS C18柱层析法分离纯化,根据理化性质 和波谱数据进行结构鉴定。结果 从皱叶酸模的石油醚和乙酸乙酯萃取部位分离 纯化得到8个化合物,分别鉴定为β 谷甾醇(1)、二十六烷酸(2)、大黄素(3)、 大黄素 8 O β D 吡喃葡萄糖苷(4)、山萘酚(5)、山萘酚 3 O α L 吡喃鼠李糖苷(6)、(+) 儿茶素(7)和(-) 表儿茶素(8)。结论 化合物2,4 , 8 为首次从皱叶酸模中分离得到。 【关键词】 皱叶酸模;化学成分;提取分离;结构鉴定 Abstract:Objective To study on the chemical constituents from Rumex crispus L..Methods Compounds were isolated and purified repeatedly by silica gel,Sephadex gel and ODS C18 column,and thEir structures of compounds word格式论文 were identified by physical,chemical methods and spectral data.Results EIght compounds were obtained form the petroleum ether and ethyl acetate fractions from R. crispus, and were identified as β sitosterol(1),hexacosoic acid (2),emodin(3),emodin 8 O β D glucopyranoside(4),kaempferol (5),kaempferol 3 O α L rhamnopyranoside(6),(+) catechin (7) and (-) epicatechin (8). Conclusion Compounds 2,4 , 8 are obtained from Rumes crispusL. for the first time. Key words:Rumex crispus L.; chemical constituent; extraction and isolation; structural identification 皱叶酸模Rumex crispus L.为蓼科(Polygonaceae)酸模属植物,俗名土 大黄,为多年生草本植物,根、根茎、叶及全草入药,性味苦、寒,具有清热解 毒、泻火通便、止血、杀虫等功效,维吾尔民间主要用于 治疗 鼻出血、子宫出 血、血小板减少性紫癜、肠道积滞、大便秘结等症[1]。目前对皱叶酸模化学成 分的研究 文献 报道的主要为蒽醌类、黄酮类及多糖类成分[2-6]。为了进一步深 入开发利用皱叶酸模这一药用资源,本实验系统地研究了皱叶酸模的化学成分, 采用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析和ODS C18柱层析法从皱叶酸模80%乙醇 提取物的石油醚和乙酸乙醌萃取部位分离得到了8个化合物,分别为β 谷甾醇 (1)、二十六烷酸(2)、大黄素(3)、大黄素 8 O β D 吡喃葡萄糖苷(4)、山 word格式论文 萘酚(5)、山萘酚 3 O α L 吡喃鼠李糖苷(6)、(+) 儿茶素(7)、(-) 表儿茶素(8)。其中,化合物2,4 , 8均为首次从皱叶酸模中分离得到。 1 仪器与材料 ZMD83 1型电热熔点测定仪(温度计未校正);Hitachi 275 50P型红外分光光谱仪;Varian MAT 212型质谱仪;Bruker speckospin AC 600P型核磁共振仪; Sephadex LH 20(20,80 μm),Pharmacia公司生产;ODS C18反相硅胶柱(日本DAISO公司);薄层层析硅胶板、柱层析硅胶(100,XXXX年10月采自新疆维吾尔自治区石河子市,由第二军医大学生药学教研室孙连娜副教授鉴定为蓼科酸模属植物皱叶酸模Rumex crispus L.的干燥全草,标本存于第二军医大学药学院生药学教研室标本室。 2 提取与分离 取皱叶酸模干燥全草药材20 kg,粉碎,用体积分数为80%乙醇溶液浸泡48 h后,20倍体积渗漉。渗漉液经减压浓缩后得流浸膏3.2 kg,流浸膏加水混悬,依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇进行萃取,回收各萃取溶剂得萃 word格式论文 取部位。取石油醚萃取部位200 g,等量硅胶拌样后,采用硅胶(100,200目)柱层析法,以石油醚 乙酸乙酯(体积比50?1?1?1)系统进行梯度洗脱,得粗分片段,再反复经硅胶柱层析(200,300目)、葡聚糖凝胶柱层析进行分离和纯化,得到化合物1(450 mg)、2(20 mg)。取乙酸乙酯萃取部位300 g,等量硅胶拌样后,采用硅胶(100,200目)柱层析法,以三氯甲烷 甲醇(10?1?1?1)系统进行梯度洗脱,得粗分片段,再反复经硅胶柱层析(200,300目)、葡聚糖凝胶柱层析、ODS C18反相硅胶柱层析进行分离和纯化,得到化合物3(450 mg)、4(100 mg)、5(120 mg)、6(60 mg)、7(70 mg)、8(50 mg)。 3 结构鉴定 化合物1,无色针状结晶(乙酸乙酯),mp 138,140 ?。Liebermann Burchard反应呈甾体化合物特有的蓝紫色,推测其为甾体化合物。ESI MS, m/z 415.2[M+H]+,437.2[M+Na]+,453.2[M+K]+。1H NMR(CDCl3,600 MHz)谱中存在以下质子信号,δ 5.35(1H,d,J=3.6 Hz,H 6),3.52(1H,m,H 3),2.30,1.01(29H,m),0.94,0.69(3H×6,H 18,H 19,H 21,H 26,H 27,H 29)。13C NMR(CDCl3,150 MHz)谱中存在以下碳信号,δ 140.8(C 5),121.4(C 6),71.4(C 3),56.7(C 14),56.0(C 17),50.0(C 9),45.4(C 4),42.2(C 13),40.0(C 12),38.2(C 1),36.8(C 10),36.1(C 20),33.9(C 7),33.1(C 8),31.9(C 24),31.8(C 22), word格式论文 31.6(C 2),29.1(C 25),26.0(C 28),24.7(C 15),21.0(C 11),19.7(C 26),19.3(C 19),19.0(C 27),18.8(C 21),11.9(C 29),11.6(C 18)。在高效薄层层析硅胶板上展开,其Rf值、显色过程与β 谷甾醇标准品均一致,混合后测定熔点不下降。以上数据与文献[7]报道一致,确定化合物1为β 谷甾醇(β sitosterol)。 化合物2,白色粉末,mp 80,82 ?。ESI MS,m/z 395.4[M-H]-。1H NMR(CDCl3,CDCl3)谱中存在以下信号,δ 2.35(2H,t,J=7.2 Hz,H 2),1.64(2H,p,J=7.2 Hz,H 3),1.27(2H×20,br s,H 4,H 25),0.89(3H,t,J=7.2 Hz,H 26)。13C NMR(CDCl3,150 MHz)谱中存在以下信号,δ 179.4(C 1),34.1(C 2),31.7(C 24),29.7,29.2(C 4,C 23),24.6(C 3),22.6(C 25),14.2(C 26)。以上数据与文献[8]报道一致,确定化合物2为二十六烷酸(hexacosoic acid)。 化合物3,橙红色针晶(乙酸乙酯),mp 256,258 ?。Borntr ger’s反应呈阳性,醋酸镁反应呈阳性,推测其为蒽醌类化合物。ESI MS,m/z 269.1[M-H]-。1H NMR(CD3OD,600 MHz)谱中存在以下信号,δ 7.54(1H,d,J=1.8 Hz,H 4),7.17(1H,d,J=2.4 Hz,H 5),7.07(1H,d,J=1.8 Hz,H 2),6.58(1H, d, J=2.4 Hz ,H 7), 2.48(3H, s, H 3)。 word格式论文 13C NMR(CD3OD,150 MHz)谱中存在以下信号,δ 189.6(C 9),181.1(C 10),165.2(C 6),164.4(C 8),161.3(C 1),148.4(C 3),135.2(C 5a),132.7(C 4a),124.2(C 2),120.6(C 4),113.3(C 1a),108.8(C 5),108.3(C 8a),107.8(C 7),21.7(3 CH3)。以上数据与文献[9]报道一致,确定化合物3为大黄素(emodin)。 化合物4,黄色粉末,mp 186,188 ?。Borntr ger’s反应呈阳性,NaOH溶液反应显红色,Molish反应呈阳性,推测其为蒽醌苷类化合物。ESI MS,m/z 431.1[M-H]-。1H NMR(CD3OD,600 MHz)谱中存在以下信号,δ 7.50(1H,d,J=1.8 Hz,H 4),7.41(1H,d,J=2.4 Hz,H 5),7.12(1H,d,J=1.8 Hz,H 2),6.82(1H,d,J=2.4 Hz,H 7),5.06(1H,d,J=8.4 Hz,H 1′),3.65,3.31,3.22,3.21(1H×4,m,H 2′,H 3′,H 4′,H 5′),3.13(2H,m,H 6″),2.45(3H,s,H 3)。13C NMR(CD3OD,150 MHz)谱中存在以下信号,δ 183.2(C 9),183.1(C 10),164.3(C 6),161.9(C 8),161.8(C 1),147.7(C 3),136.0(C 5a),132.3(C 4a),124.2(C 2),120.2(C 4),114.3(C 1a),112.8(C 8a),108.4(C 5),108.1(C 7),101.1(C 1′),77.5(C 5′),76.8(C 3′),73.9(C 2′),69.8(C 4′),60.9(C 6′),21.6(3 CH3)。以上数据与 文献 [10]报道一致,确定化合物4为大黄素 8 O β D 吡喃葡萄糖苷(emodin 8 O β D glucopyranoside)。 word格式论文 化合物5,黄色针状结晶(三氯甲烷 甲醇=20,1),mp 275,277 ?。盐酸 镁粉反应呈红色,推测其为黄酮类化合物。ESI MS,m/z 287.1[M+H]+,309.1[M+Na]+,285.1[M-H]-。1H NMR(DMSO d6,600 MHz)谱中存在以下信号,δ 8.10(2H,d,J=7.8 Hz,H 2′,H 6′),6.87(2H,d,J=7.8 Hz,H 3′,H 5′),6.36(1H,d,J=2.4 Hz,H 8),6.18(1H,d,J=2.4 Hz,H 6)。13C NMR(DMSO d6,150 MHz)谱中存在以下信号,δ 177.3(C 4),165.3(C 7),161.9(C 9),160.7(C 4′),157.6(C 5),147.6(C 2),136.8(C 3),130.5(C 2′,C 6′),123.6(C 1′),116.5(C 3′,C 5′),105.0(C 10),98.9(C 6),94.0(C 8)。以上数据与文献[11]报道一致,确定化合物5为山萘酚(kaempferol)。 化合物6,深黄色粉末,mp 252,254 ?。盐酸 镁粉反应呈红色,推测其为黄酮类化合物;Molish反应呈阳性,推测为苷类化合物;锆盐 枸橼酸反应黄色减退,加水稀释后转为无色,说明分子中有5 OH而无3 OH或3 OH被苷化。ESI MS,m/z 433.1[M+H]+,455.1[M+Na]+,431.1[M-H]-。1H NMR(DMSO d6,600 MHz)谱中存在以下信号,δ 7.67(2H,d,J=8.4 Hz,H 2′,H 6′),6.89(2H,d,J=8.4 Hz,H 3′,H 5′),6.40(1H,d,J=1.8 Hz,H 8),6.23(1H,d,J=1.2 Hz,H 6),5.40(1H,d,J=1.8 Hz,H 1″),3.96(1H,s,H 2″),3.45,3.14,3.05(1H×3,m,H 3″,H 4″,H 5″),0.82(3H, word格式论文 d,J=6.0 Hz,H 6″)。13C NMR(DMSO d6,150 MHz)谱中存在以下信号,δ 178.4(C 4),164.8(C 7),161.5(C 5),160.6(C 4′),158.0(C 9),157.0(C 2),134.4(C 3),131.0(C 2′,C 6′),121.0(C 1′),115.8(C 3′,C 5′),105.1(C 10),102.2(C 1″),100.0(C 6),94.2(C 8),71.8(C 4″),71.2(C 3″),70.8(C 2″),70.4(C 5″),18.0(C 6″)。以上数据与文献[12]报道一致,确定化合物6为山萘酚 3 O α L 吡喃鼠李糖苷(kaempferol 3 O α L rhamnopyranoside)。 化合物7,无色针状结晶(甲醇),mp 254,256 ?。三氯化铁试剂反应呈蓝色,推测分子中含有酚羟基;盐酸 镁粉反应呈阴性。ESI MS, m/z 289.1[M-H]-。1H NMR(CD3OD,600 MHz)谱中存在以下信号,δ 6.84(1H,d,J=1.8 Hz,H 2′),6.78(1H,d,J=8.4 Hz,H 5′),6.71(1H,dd,J=1.8,8.4 Hz,H 6′),5.92(1H,d,J=2.4 Hz,H 8),5.89(1H,d,J=2.4 Hz,H 6),4.55(1H,d,J=7.2 Hz,H 2β),3.96(1H,ddd,J=5.4,7.2,8.4 Hz,H 3α),2.84(1H,dd,J=5.4,16.8 Hz,H 4α),2.54(1H,dd,J=8.4,16.8 Hz,H 4β)。13C NMR(CD3OD,150 MHz)谱中存在以下信号,δ 156.3(C 5),156.0(C 7),155.5(C 9),144.8(C 3′,C 4′),130.6(C 1′),118.5(C 6′),114.8(C 2′),113.9(C 5′),99.7(C 10),95.0(C 6),94.2(C 8),81.2(C 2),67.4(C 3),27.2(C 4)。以上数据与文献[13]报道一致,确定化合物7为(+) 儿茶素 [(+) catechin]。 word格式论文 化合物8,白色粉末,mp 248,250 ?。三氯化铁试剂反应呈蓝色,推测分子中含有酚羟基;盐酸 镁粉反应呈阴性。ESI MS, m/z 291.1[M+H]+,289.2[M-H]-。1H NMR(CD3OD,600 MHz)谱中存在以下信号,δ 6.97(1H,d,J=1.8 Hz,H 2′),6.79(1H,dd,J=1.8, 7.8 Hz, H 6′), 6.75(1H,d, J=7.8 Hz,H 5′),5.94(1H,d,J=2.4 Hz,H 8),5.91(1H,d,J=2.4 Hz,H 6),4.56(1H,s,H 2β),4.17(1H,m,H 3β),2.85(1H,dd,J=4.8,16.8 Hz,H 4α),2.73(1H,dd,J=3.0,16.8 Hz,H 4β)。13C NMR(CD3OD,150 MHz)谱中存在以下信号,δ 157.6(C 5),157.3(C 7),157.0(C 9),145.5(C 4′),145.4(C 3′),131.9(C 1′),119.0(C 6′),115.5(C 2′),115.0(C 5′),99.7(C 10),96.1(C 6),95.5(C 8),79.5(C 2),67.1(C 3),28.8(C 4)。以上数据与文献[14]报道一致,确定化合物8为(-) 表儿茶素[(-) epicatechin]。 【 参考 文献】 [1] 《新疆中草药》编委会.新疆中草药[M].乌鲁木齐,新疆人民出版社,1976,123-124. [2] 赵文彬,刘金荣,成玉怀,等.新疆皱叶酸模根中总蒽醌的含量测 word格式论文 定[J]. 中国 民族医药杂志,2005,11(1),29. [3] 秦冬梅,许玉华.皱叶酸模总黄酮和多糖的超声提取及含量测定[J]. 中国民族医药杂志,2004,10(3),34-35. [4] mür Demirezer L.Quantitative determination of some Rumex species with regards of anthraquinone derivatives[J].Pharmazie,1994,49(12), 936-937. [5] CHOI G J,LEE S W,JANG K S,et al.Effects of chrysophanol,parietin,and nepodin of Rumex crispus on barley and cucumber powdery mildews[J].Crop Protection,2004,23(12),1215-1221. [6] Ba kan S,Daut zdemir A,Günaydln K,et al.Analysis of anthraquinones in Rumex crispus by micellar electrokinetic chromatography[J].Talanta,2007,71(2),747-750. [7] 孟泽彬,国兴明,张素英.直葶石豆兰化学成分的研究[J].贵州 教 育 学院学报, 自然 科学 ,2008,19(6),20-22. [8] 魏玉辉,武新安,张承忠,等.光茎大黄化学成分研究[J].中药材, 2005,28(8),658-660. word格式论文 [9] 张新凤,李翠环,裴基焕.大虎杖花蒽醌类化学成分的鉴定[J].浙江林学院学报,2005,22(2),185-187. [10] 王文静,张维明,董小玲,等.滇产何首乌药材的化学成分研究[J].云南中医学院学报,2005,28(1),10-12. [11] 张卫东,陈万生,王永红,等.灯盏细辛化学成分的研究?[J].中国药学杂志,2001,36(4),233-235. [12] 李建北,丁怡.云南肉豆蔻化学成分的研究[J].中国中药杂志,2001,26(7),479-481. [13] 张倩,热娜?卡斯木,王晓梅,等.锁阳花序中黄酮类化学成分的研究[J].新疆医科大学学报,2007,30(5),466-468. [14] 吕洁,孔令义.田基黄的化学成分研究[J].中国 现代 中药,2007,9(11),12-14.广东药学院学报