HEPES配方

HEPES配方 缓冲液名称及常用浓度 缓冲pH范围 主要物质分子量 MES (2吗啉代乙磺酸) 5.5-6.7 195.2 Bis-Tris 5.8-7.2 209.2 HEPES 6.8-8.2 238.3 PIPES 6.1-7.5 302.4 MOPS 6.5-7.9 209.3 Tricine 7.4-8.8 179.2 TEA (三乙醇胺) 7.4-8.3 149.2 甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05mol/L) 2.2-5.0 甘氨酸Mr=75.07 邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(0.05mol/L) 2.2-3.8 邻苯二甲酸氢钾Mr=204.23 磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 2.2-8.0 磷酸氢二钠Mr=141.98 柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液 2.2-6.5 柠檬酸Mr=192.06 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1mol/L)3.0-6.6 柠檬酸Mr=192.06 柠檬酸钠Mr=257.96 乙酸-乙酸钠缓冲液(0.2mol/L) 3.6-5.8 乙酸钠Mr=81.76 乙酸Mr=60.05 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液4.1-5.9 邻苯二甲酸氢钾Mr=204.23 磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2mol/L) 5.8-8.0 磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液(1/15 molL) 4.92-8.18 磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L) 5.8-8.0 巴比妥钠-盐酸缓冲液(18?) 6.8-9.6 巴比妥钠Mr=206.18 Tris-盐酸缓冲液(0.05mol/L 25?) 7.10-9.00 三羟甲基氨基甲烷(Tris)Mr=121.14 甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L) 8.6-10.6 甘氨酸Mr=75.07 硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L) 9.3-10.1 硼砂Na2B4O7?10H2O Mr=381.43 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1mol/L) 9.16-10.83 碳酸钠Mr=286.2 碳酸氢钠Mr=84.0 碳酸钠-氢氧化钠缓冲液(0.025mol/L) 9.6-11.0 磷酸氢二钠-氢氧化钠缓冲液 10.9-12.0 氯化钾-盐酸缓冲液(0.2mol/L) 1.0-2.2 氯化钾Mr=74.55 氯化钾-氢氧化钠缓冲液(0.2mol/L) 12.0-13.0 氯化钾Mr=74.55 HEPES分子量为238.31，化学名:4-羟乙基哌嗪乙磺酸，分子式: C8H18N2O4S。 HEPES常用于生物缓冲剂，pH值缓冲范围:6.8-8.2，用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。 关于HEPES 缓冲溶液的配制，不同的文献资料有不同的说法。根据用途，一种是单纯的HEPES，NaOH，另一种是HEPES，盐。各种配制方法如下: 一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制 119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中，加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH 范围是6.8~8.2)，然后用蒸馏水定容至500ml，于4摄氏度保存。 二、加少量盐的HEPES Buffer配方(500ml) HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液调节pH值，最后定容。 三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制 将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水，用0.5M NaOH调节至所需pH值，再用蒸馏水定容至100ml即可。 HEPES缓冲液 化学名:2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid，中文名:羟乙基哌嗪乙硫磺酸，分子式:CHNOS，pKa (25 ?)为 7.5，pH范围6.8-8.2。 81824 HEPES是一种非离子两性缓冲液，被广泛应用于氧化磷酸化、无菌环境的蛋白质合成、光合磷酸化、CO固定等生物学研究中;由于HEPES对金属离子酶作用底物无影响，适用于2 透射电子显微技术(TEM)中;在细胞培养基中，其最大优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的PH值，HEPES(25 mM)可以作为碳酸氢盐缓冲液的替代品，或者作为碳酸氢盐缓冲液的添加物(10-15 mM)，以解除需要高浓度CO培养环境的限制。 2