示差折光检测器

示差折光检测器 WellChrom K-2301/2401示差折光检测器 用户手册 V7582, 11/2000 目录 如何使用本手册…………………………………………………………………………………………… 4 本手册中的约定…………………………………………………………………………………………… 4 本手册中的标准操作…………………………………………………………………………………. 4 WellChrom 示差折光检测器的特点…………………………………………………………………………… 5 测量原理及光路………………………………………………………………………………………………… 5 信号值的计算……………………………………………………………………………………………… 6 安装示差折光检测器…………………………………………………………………………………………… 6 拆箱………………………………………………………………………………………………………… 6 装箱单………………………………………………………………………………………………… 7 人身保护和仪器保护………………………………………………………………………………… 7 示差折光检测器的前视图及后视图………………………………………………………………… 7 按键功能……………………………………………………………………………………………… 8 信号电缆接………….………………………………………………………………………………… 8 与Knauer连接盒相连………………………………………………………………………………… 9 与个人计算机及数字量输入相连…………………………………………………………………… 9 示差折光检测器短子的用法………………………………………………………………………… 9 装配短子插条………………………………………………………………………………………… 10 控制连接的功能……………………………………………………………………………………… 10 与HPLC系统的液路连接…………………………………………………………………………… 10 示差折光检测器的操作………………………………………………………………………………………… 12 供电电源，开/关，自检…………………………………………………………………………………… 12 内部软件结构……………………………………………………………………………………………… 12 信号菜单SIGNAL Menu………………………………………………………………………………13 单位菜单UNIT Menu………………………………………………………………………………… 14 能量菜单 INT Menu………………………………………………………………………………… 14 SIG 菜单……………………………………………………………………………………………… 14 I1 + I2菜单…………………………………………………………………………………………… 15 自动调零和零平台调整.........................................…………………………………………………15 校正菜单The Menu CALIBRT.........................................................…………………………… 15 冲洗时间菜单The FLUSH time Menu ...............................................………………………… 16 模拟输出菜单The ANALOG OUT Menu .................................................…………………..… 16 GLP 菜单........................................................…………………………………………………… 16 出错信息和出错原因…………………………………………...............................................................…… 16 仪器清洁和保养…………………………………………………………………………………........………… 17 操作结束和关机…………………………………………………………………………………………… 17 取出测量池………………………………………………………………………………………………… 17 安装测量池………………………………………………………………………………………………… 19 检查校正数据……………………………………………………………………………………………… 21 配件及附件……………………………………………………………………………………………………… 21 技术参数………………………………………………………………………………………………………… 21 制造厂商声明…………………………………………………………………………………………………….. 22 质保条款………………………………………………………………………………………………………….. 23 4 如何使用本手册 如何使用本手册 该手册适用于WellChrom示差折光检测器K-2301和K-2401。 该手册的约定 为了便于阅读，提及示差折光检测器泛指型检测器K-2301和制备型检测器K-2401。只有在特 殊指定时，提及的内容才专指该检测器。 手形标志为重要提示 在页边的警告标志为特殊警告 灯形标志为有用的帮助信息 手册中的标准操作流程 该手册提供了标准操作流程(SOP)，标准操作流程为我们操作示差折光检测器中的复杂任务提供 方便的方法。流程包括一步一步的执行指令，引导用户完成所有的常规任务。同时，流程也可以用 于形成文档，可以供用户复制，形成标记，形成操作仪器的文档文件等。 警告:请严格按照手册中的指令和标准操作流程来操作仪器和所有的附件。这样做可以保 证正确的结果，保证仪器的使用寿命。 SOP 1 WAGO 插头带的装配 10 SOP 2 清空监测池 17 SOP 3 拆下K-2301的检测池 17 SOP 4 拆下K-2401的检测池 18 SOP 5 安装K-2301的检测池 19 SOP 6 安装K-2401的检测池 20 WellChrom示差折光检测器的特点 5 示差折光检测器的特点 WellChrom示差折光检测器K-2301是用于分析领域的高性能示差折光检测器;WellChrom K-2401 示差折光检测器是与之对应的，用于制备HPLC的示差折光检测器。 这两种仪器既可以由仪器内部的固化软件控制，也可以通过Knauer公司生产的连接盒连接到仪器的控制输入口得到控制。该设备适用于实验室的功能符合FDA GLP规则。 仪器的测量原理和光路 LED(发光二极管)发出的光穿过示差折光检测器的样品池和参比池两次，见图1。 当两个池子中充满纯净的溶液时，调节于平行零板的位置，从而调整光线照到检测二极管1和2上的光线强度相等，来使系统校正到零点。 当用品池中充满的为与溶剂折射率不同的溶液时，由于折射率的改变，光线发生几何偏转。(根据斯陧尔折射定律)。 这一结果导致了光强度I1和I2的变化，强度的变化正比与样品溶液的浓度和折射率。从这两个强度的改变中进而计算得出信号值，(正如第6页中“如何计算信号值”章节中所述的公式)，并把它送到显示上。 Fig. 1 Light Path in the RI Detectors K-2301示差折光检测器内置的测量池其测量角度为45?，K-2401示差折光检测器的测量角度为15?。 45?的流通池和15?的流通池可以互换，并且与之相比，45?的测量池测量灵敏度高于15?的流通池大约3倍左右。最大的流量不会受流通池的影响。它仅仅取决于仪器上所连接管路的内径。(K-2401应连接内径大于1.00mm的管路;K-2301应连接0.3mm或0.7mm内径的管路) 下表中列出了RI检测器的灵敏度和噪声: 表1 RI检测器的灵敏度 K-2301 K-2401 -8-7Sensitivity 8 x 10 RIU 8 x 10RIU -8-7Noise ??4 x 10 RIU ??44 x 10 RIU 6 WellChrom示差折光检测器的安装 这两种检测器的基线漂移在有效的测量范围内非常小: -3 对K-2301检测器为: 1×10RIU -3 对K-2401检测器为: 2×10RIU _ 1 x 10-3 RIU (K-2301) and _ 2 x 10-3 RIU (K-2401). 该仪器的测量是在950?30nm的波长上进行的。信号检测和处理允许在对样品组分无任 何吸收时得出折射率值。在仪器的主显示界面上控制检测光量也是允许的。 看过“如何计算信号值”章节后，你可以发现一个额外的信息。 该仪器的自动调零覆盖了整个的检测范围。 借助于RS-232连接，整个测量数据可以以数字量的形式读出。KNAUER公司的连接盒可 以用来对仪器进行模拟控制以及模拟数据传输。 ??如果使用KNAUER公司的软件包ChromGate或EuroChrom，RI检测器的控制可以全自 动的进行。 如何计算信号值 光束射在两个检测器光电管1和光电管2上(见第5页图1)，由于光线的偏转，在测量过 程中能够得到两个光电管上的光强度I1和I2。I1+I2 及I1-I2的数值连续的进行计算，并显 示在 SIGNAL菜单中。 用下述的公式，我们可以得出信号值的计算公式: 其中: I1-I2 光强度数值的差 I1+I2 光强度数值的和 a 常数因子，由自动调零 c 常数因子，由校正决定 在SIGNAL菜单中信号值的结果，给出仪器的信号输出。 示差折光检测器受温度影响极大。对纯水来讲，每1?的变化，其折射率的改变为1×-4-410RIU,对有机溶剂来讲，每1?的变化，其折射率的改变为5×10RIU。 安装示差折光检测器 拆箱 在拆箱之后，请详细检查设备和附件是否在运输过程中发生任何损坏。如果必要，请向有 关承运部门提出索赔声明。 按照标准运输装箱单检查RI检测器的物品是否完整。如果发现少什么东西或需要得到我们 的帮助，请与我们的服务部联系。 WellChrom示差折光检测器的安装 7 装箱单 示差折光检测器完整的装箱应包括: 1 WellChrom RI 检测器 K–2301 或 K–2401 1 欧标电源线 1 带有注射器的管理连接 1 操作手册 1 遥控终端的接线端子 1 RS-232 电缆 1 信号输出用同轴电缆 所有的订货号列在第21页的配件及附件中 如何保护您自身和您的仪器 KNAUER公司的K-2301示差折光检测器的使用由厂家确定，并囊括它在分析HPLC系统 的使用;K-2401的使用，囊括它在制备HPLC领域的使用。 RI检测器必须安装在远离震动源、有剧烈热交换和阳光直射的地方。 处于对人身安全的考虑，您应该遵守实验室工作的相关规则:确信电源的接地是否良好， 是否使用了三芯插头。如果将电源线插在不合适的电源座上，有可能导致伤害事故。 仪器的前视图和后视图 仪器的前面板见图2，后面板见图3。在图3中，标明了所有运行控制和仪器的连接。 图2 RI检测器的前视图 标准的仪器出厂设定可以令您马上使用仪器，而没有必要作任何调整。 RI检测器可以完全的由内部软件进行控制。操作仪器可以借助于仪器的前面板按键来完 成。 8 WellChrom示差折光检测器的安装 功能键 图2中所示的功能键区包括四个方向键和自动调零键。 方向键 使用左右黄色箭头键可以: 1移动显示屏中光标的位置 2确认选择的数值 使用上下黄色箭头键可以: 改变选定的参数或选择可选的项目 自动调零键有以下四个不同的功能: 1. 短暂的按下自动调零键，在SIGNAL菜单中的信号值将被调整到0。这个过程的 执行，确定了在第6页公式1中的常数因子a。 2. 如果按下自动调零键的时间大于3s，将进行零板平移调零，此时，将在显示屏中 出现响应的提示。 3. 在仪器电源打开后，如果I1-I2的差值超过预设极限值，将自动执行零板平移调零。 4. 按下此键后，如果光标位于其他菜单，此操作将使显示快速回到SIGNAL菜单。 图3 后面板视图和仪器的连接 将信号电缆接地 信号输出的接地可以通过两个输出接地插头或模拟输出的屏蔽壳。 信号接地一定要和积分输出的地有效连接。 要避免多重接地，如果这样的化将构成噪声回路，影响测量结果。 WellChrom示差折光检测器的安装 9 与KNAUER连接盒相连 KNAUER连接盒使用仪器后面的RS232数据传输与计算机相接。 数据从检测器到连接盒的传送通过检测器的积分输出口和连接盒的相应输入相连来 实现。RI检测器模拟控制的连接方式见图4和表2。 图4 RI检测器和KNAUER连接盒之间的连接方法 表 2 RI检测器和KNAUER连接盒之间的连接 RI 检测器上的插座 连接盒上的插座 INTEGRATOR 1V INTEGRATOR INPUTS, 1 AUTOZERO D.OUT3 FLUSH D.OUT1 ERROR OUT D.IN1 GROUND D.GND 连接个人计算机和数字输入 借助合适的软件，RI 检测器可以通过串口RS232与计算机相连，此时，检测器的数 据可以被计算机数字的读入。 使用RI检测器的端子连接 终端的短子条允许不通过连接盒，使仪器与外标设备相连。 在操作这些端子的时候，为了防止静电造成的设备损坏，你应该先释放身上的电荷。 如果你想与分光检测器K-2501相连，你需要用WAGO端子条。在标准的运输包装中 包括2、3或4点的短子。 10 WellChrom示差折光检测器的安装 装配终端端子条 按照下面的方法安装: 图5 装配端子条 SOP1 WAGO端子条的装配 1. 将圆的小杠杆插入端子的方形孔中 2. 按照箭头的指向用力向下压小杠杆 3. 将导线的裸露部分插进杠杆下部的开口 4. 释放小杠杆并移去小杠杆 现在导线被紧固在端子上。 控制连接的功能 当>250ms的信号输入加到相应的端子上时，其功能开始生效 自动调零 与地的短路连接导致一次自动调零功能的开始。在完成该功能之后，只有当屏幕上 重新出现闪动的光标时，测量才会重新开始。进一步的描述，请参考第15页有关自 动调零和零板调零的章节的描述。 冲洗 FLUSH端口与地的短接导致冲洗参比池的开始，冲洗的时间按照预设的时间。如果 该信号持续与地短接超过2s， RI检测器的输出 INTEGRATOR 1 V 分输出，最大1V，双极性，20位分辨率输出 ERR OUT 错误信号输出(TTL，集电极开路) 与HPLC系统的液路连接 HPLC液路连接时，见图2，上部的连接口位入口;下部的连接口位出 口。 一定要确信液路的输入口和输出口不能混淆，如若不然，将导致检测池的损坏 RI检测器的流路图请参考下图。both RI detectors are shown in the following figures. 为了减小液路的死体积，用小内径的管路(如内径0.3mm)把色谱柱的出口与RI检 测器的入口相连。 用内径位1mm的PTFE管或不锈钢管把检测器的出口连接到费液瓶。 WellChrom示差折光检测器的安装 11 图6 K-2301示差折光检测器的流路 图7 K-2401示差折光检测器的流路 一定要确信在出口不应建立反压，它会造成检测池的损坏。 K-2301最大的允许流速位5ml/min K-2401最大的允许流速位100ml/min 对于比较粘的溶剂(如2-propanol),不能工作在最大的流速上。 在溶剂流过仪器之前，一定要确认当前溶剂可以与上次应用的溶剂互溶，如若不然， 请用与前后溶剂均相容的中性溶剂进行过渡。 12 WellChrom示差折光检测器的操作 示差折光检测器的操作 电源，开/关，自检 示差折光检测器可以运行在115或230VAC，47,63Hz下。设置可以由厂家更改也可 以由用户自行更改，标准的出厂设置为230V。如果无论任何原因需要更改，请与厂 家联系。实际的设定指示在仪器的后面部上。(图8) 图8 输入电压指示 请确认供电电源是否正确，接地是否良好并且是否用3芯插头 将RI示差折光检测器与供电电源相接，并打开后面板上的电源开关。这时，在前面 板的显示屏中显示软件发行的版本号， 随后，仪器进行如下的功能自检: 检查功能正确的前提下的积分输出和正确的输出失调校正。 ? 零点平台的的总调整Automatic adjustment of the zeroplate. ?自动的零点调整(AUTOZERO) 请注意在自检过程中，显示屏中的提示信息。 一旦有出错信息出现，请参阅第16页中的出错信息。 在操作仪器进行检测之前，应用溶剂清洗检测池和参比池并让HPLC系统达到平衡。 仪器的稳定时间应至少在15分钟以上,随后才能开始使用您的检测器。 内部软件结构 软件分别显示若干不同的菜单中，每一个菜单允许部分的设定操作模式。您可以借 助于用上下箭头移动位于菱形标记处的光标来进入特定的一个菜单。见图9，菜单的 循环是无尽头的。 WellChrom示差折光检测器的安装 13 图9 RI检测器的菜单序列 现在详细的描述以下一个菜单。 在一个菜单的内部，靠用左右键移动，可以把光标移动到相应的下一个项目或上一个项目。 用上下键可以将相应项目中的参数变大或变小。在某些情况下，你可以通过上下键在整个可选范围内改变设置，再用左右键加以确认。 信号菜单(The SIGNAL menu) ? 信号菜单是RI检测器的主菜单。在该菜单中，显示如下信息: 测量的信号强度(信号值) ? 量光强度显示,如果光强度低于在I1，I2菜单中设定的极限值，它将被显示出 来，其他情况下，该位置是空的。 ? 秒为单位的时间常数 另外，您可以该菜单中控制以下功能: 选择时间常数 在时间常数 t的位置: 您可以通过此项来达到信号的平滑。时间常数的可选范围为:0.1, 0.2, 0.5, 1, 2, 5 和 10 秒。该值设定越大，信号被平滑的程度越大。最常用于分析中的时间常数设定值为1s。 14 WellChrom示差折光检测器的操作 清洗参比池 您可以用左右箭头键将光标移动到“Flush”上面，并按上下键确认后，执行参比池 的清洗。 冲洗的持续时间可在FLUSH菜单中，选中time项目进行设定。标准的冲洗时间设定 为30s。按下其他任何按键键导致清洗工作的结束。正常的清洗结束后，显示屏中的 光标为闪烁状态。 在冲洗过程中，检测池及参比池串连在一起，因此，两个池子都得到了溶剂的清洗。 在冲洗过程中，流速不能超过20ml/min.如果超过这个流速，将导致测量池和参比池 的损坏 信号反相 在信号菜单中，用左右键将光标移动到SIGNAL位置，按上下键选择SIGNAL或signal. 对于K-2301而言，SIGNAL表示正的信号输出，signal表示负的信号输出; 对于K-2401而言，SIGNAL表示负的信号输出，signal表示正的信号输出。 单位菜单(the UNITS-menu) 显示单位信息，折射率的单位(更精确的应为?RIU) 时间常数的单位:s 两路强度菜单(the INT-menu) 在该菜单中，分别的显示测量时得到的强度值I1和I2。但要注意I1+I2的数值并不能 够简单的把I1和I2相加，因为这些信号的强度仍然存在偏移。 如果这些数值连续的很低，标明在池子中有气泡或池子遭到了污染。此时，池子应 用冲洗“FLUSH”功能进行清洗。 两路和及两路差菜单(the SIG Menu) 在该菜单中，显示由I1和I2得出的I1+I2 和I1-I2的数值。最好的测量结果是两路的强 度值都接近0.5，并且I1，I2尽量接近1，I1-I2尽量接近0。 此外，零点平台的调整可以选择ZP来激活。 WellChrom示差折光检测器的安装 15 I1+I2菜单(The Menu I1+I2) 在菜单I1+I2中，您可以选择以下几个项目: :I1+I2在每一个数据点上不停的进行计算。这种方式使得在测量过程在线(online) 中得到的数值对测量结果没有任何影响，但是，测量信号中的噪声组分显得比较显著。 自动调零(AUTOZERO|):I1+I2在整个测量过程中保持一个常量。在每一次的自动调零之后，两路的能量和都被重新计算，然后保存。 Fixed?1:这种方式，在整个测量过程中I1+I2保持恒定为1。该方式对应于KNAUER公司先前的产品 RI9800等类型。 Limit(限制):用左右方向键光标并移动到limit，用上下键选择limit的数值。如果光强度值低于该数值，在显示器的主界面上将显示出来实际的能量。其他情况下，此区域为空。 自动调零和零平台调整 如果I1+I2接近1，I1-I2接近0，这时可以得到最好的测量结果。(此时对应被检测到的光能量和为100,)。最小的检测能量(I1+I2)应最好为80,以上。如果比80,低，检测器的基线噪声会很大。 能量值I1和I2在INT菜单中显示。 自动调零(AUTOZERO)的电器功能是校正由于极限漂移而致的零点偏移，这种偏移的产生原因有可能是热因素或溶剂因素。 如果这种偏移较大，此时就要用到零平台调整。首先，您应该检查一下I1和I2的偏移是否由于池子中含有气泡造成的。您可以通过观察I1，I2菜单的能量值加以确认，此时的能量值很低，另外情况，I1-I2值很大。气泡可以通过用FLASH功能以溶剂清洗流通池(参比池)来排除。 在正常操作的前提下，零板调整可以通过SIG 菜单中的ZP来执行，也可以按下自动调零键持续3s以上，唤起零板调整功能。 校正菜单(The Menu Calibrt) 在该菜单中，用于信号值计算的常量c(对应第6页公式1)将被确定。 对应固化软件发行版本号V1.4或以后的版本，该常量的设定范围为0.125~128.0×-3。10。当前版本的固化软件可以在仪器开关打开后读出该显示数据。 如果想改变设定值，可以用左右方向键移动到粗调和细调的相应位置(coarse & fine),用上下方向键改变数值，再按左右键确认。 对粗调来讲，数值是乘2或除2的关系;对细调来讲，可以改变3位十进制数值以4为步长。 所有KNAUER的检测器都是在出厂前预调好的，工厂调试是使用特定的校正溶液并保持恒定的温度20?。新的校正数值的选择将应用到测量时的信号值测量输出，并删除/覆盖原先的输入。 16 WellChrom示差折光检测器的操作 校正参数c的改变，并不影响信噪比～ 如果想重新输入此数值，您必须执行校正过 程。因此，一个绝对校正意味着您使用已知浓度的溶液，在特定温度下的操作。 冲洗时间菜单(the Flush time Menu) 您可以在该菜单中改变冲洗参比池的执行时间。 900s。 可选范围是:1, 用左右方向键将光标移动到时间域，按上下键改变数值，再按左右方向键确认。 如果将时间该变为0，则屏幕提示:No Vlave(阀关闭)，这时阀控制电路失效。 我们推荐的冲洗时间间隔为10,20s，流量为大约1ml/min，并且推荐小流量长时间 进行冲洗。 冲洗时的流量设定不能高于20ml/min.冲洗电磁阀或者参比池有可能损坏，如果使用 流量高于此值。 模拟输出菜单(The ANALOG OUT Menu) 在模拟输出菜单中选择模拟输出信号的缩放比例。 -51V的满量程输出被调整为从10到100RIU分16步。 GLP菜单(the GLP Menu) 在该菜单中，您可以得到该设备的序列号(S/N)，以及第二行上显示的仪器运 行总时间。 出错信息及造成出错的原因 出错信息之一对应设备的故障。 错误的零板移动 该信息对应于开机时或人为的进行的零板移动失效。 出错的原因可能为在测量池中有气泡或其他的故障。确认用纯溶剂清洗过测量池。 检查I1和I2的数值，从而确定气泡存在的可能性。参考第15页有关自动调零和零平台 调整的说明。 如果排除故障或反复关机后，该故障信息反复出现，请和我们的服务部联系。 信号溢出 1个或2个模数转换器溢出。请再冲洗检测池和参比池，之后按下自动调零键。 WellChrom示差折光检测器的清洁和保养 17 清洁和保养 如果在主菜单的显示屏中出现光强度的数值，标明光强度下降了。 实际的光强度值以百分数的形式显示。如果工作在在线(on line)模式下，光强度 并不影响测量数据。但是，随着光强度的下降，系统的噪声会增大。 光强度的下降可能的原因阐述如下: 问题 解决 溶液对IR吸收 更换溶液 测量池中有气泡 冲洗池子 测量池污染 清洗/更换测量池 管路渗液，池外湿润 拆下池子，在外部清洗 用新的密封圈重新安装 中止操作和关机 如果您的RI检测器要停止使用较长一段时间，您必须将池子排空，遵照下述标准操 作规程。 SOP2 排空测量池 1. 激活在信号菜单中的冲洗功能，并确保冲洗时间足够长，如果有必要，可以反复 执行冲洗。 10ml注射器将溶剂注入测量池。 2. 用 3. 用10ml注射器小心的向测量池中推入空气。 4. 用10ml注射器将检测池中充满丙酮。 5. 用10ml注射器小心的向测量池中推入空气。 6. 用死堵将仪器前面板上的入液口和出液口堵死。 缓冲溶液会在几个小时内造成检测器流通池的损坏。因此，一定要确信在关机前无 任何缓冲溶液留在流通缓池中，尤其是过夜情况。 拆下流通池 如果需要清洗或更换流通池时，可以将其拆下。 拆下和安装流通池，一定要经过授权人来执行，尽管培训过的用户也可以作这个工 作。 在打开机箱盖之前，一定要将仪器后部的电源线拔下～仪器内部有高压，会对人身 安全构成伤害～ SOP3 拆下K-2301RI检测器的测量池 1. 安装SOP2所述，排空流通池。 2. 用螺丝刀松开面板侧面的四个螺钉及面板上部的两个螺钉。 3. 向上提开机箱盖 18 WellChrom示差折光检测器的操作 4. 找到机箱内部的测量池。测量池位于光绪部件的前上方并且固定。参考图10和 12。 图 图10 K-2301RI检测器中流通池的位置 5. 松开紧固螺帽 6. 将螺帽、锁紧垫片和池壳体一同取出 7. 将测量单元在壳体中取出 此时，您可以对流通池进行清洗，如用合适的溶剂超声清洗或更换一个新的流通池。 SOP4 拆下K-2401RI检测器的测量池 1. 按照标准操作规程2清空流通池 2. 用螺丝刀松开面板侧面的四个螺钉及面板上部的两个螺钉。 3. 向上提开机箱盖 4. 找到机箱内部的测量池。测量池位于光绪部件的前上方并且固定。参考图11 WellChrom示差折光检测器的清洁和保养 19 图11K-2401示差折光检测器流通池的位置 5. 用十字头螺丝刀松开带弹簧的4个内六角螺钉 6. 将螺钉连同弹簧和池盖一起提起 7. 将测量单元从壳体中取出 此时，您可以对流通池进行清洗，如用合适的溶剂超声清洗或更换一个新的流通池。 SOP5 安装K-2301RI检测器的测量池 确认安装之前，所有零件完好无损 当安装流通池时，建议使用新的密封套件 1. 将下面的密封圈至于池座的液路管端口处，注意角度 2. 插入测量池到池腔中(如图12)，有KNAUER标记的一面朝上。 3. 将上面的密封圈置于池座的液路管端口处，注意角度。插入池盖，有平面的一方 朝向仪器的前面板端。将螺钉和弹垫拧紧。 4. 用手将手拧螺钉紧固。 手拧螺钉的力度要恰好合适:拧的太松会导致渗漏;拧的太紧，会导致液路管与 池子直接接触，进而使池子破裂。 20 WellChrom示差折光检测器的操作 图12 45?流通池的设计图(左)和其在光路座中的位置 5. 将光学仓放入仪器，并拧紧4个紧固螺钉。 SOP6 安装K-2401RI检测器的测量池 1. 将下面的密封圈至于池座的液路管端口处，注意角度 2. 插入测量池到池腔中(如图12)，有KNAUER标记的一面朝上。 3. 将上面的的密封圈置于池座的液路管端口处，注意角度。插入池盖，有平面的一 方朝向仪器的前面板端。将螺钉和弹垫拧紧。 4. 将弹簧和四个螺钉放入，并将他们紧固在光具座上 5. 将4个内六角螺钉旋紧 手拧螺钉的力度要恰好合适:拧的太松会导致渗漏;拧的太紧，会导致液路管与 池子直接接触，进而使池子破裂。 6. 将光学仓放入仪器，并拧紧4个紧固螺钉。 WellChrom示差折光检测器的附件和配件 21 校准的检查 RI检测器出厂检查使用柠檬酸溶液(10mg/ml)对纯净的去离子水，得到的结果应为1.147,3×10RIU，在室温23?的条件下。8.28mg/ml的glucose monohydrate也常用来作校正,3液，这时得到的相关测量结果为1×10|RIU，在20?条件下。 附件和备件 15?测量流通池 A0287 45?测量流通池 A0294 密封圈套件 A0277 电源线 230V M1642 电源线115V M1651 RS-232 数据电缆 (孔对孔) A0895 接头，端子带，信号线 A1402, A1404 积分仪电缆 A1589 积分仪电缆(香蕉插头) G1023 手册 技术参数 测量角度 45? 15? 池体积 9 µl 12 µl ,3,3测量范围 ?1 x 10 RIU ?2 x 10 RIU ,8-7灵敏度 8 x 10RIU 8 x 10RIU ,8,7噪声 ??4 x 10 RIU ??4 x 10RIU 波长 950?30nm 液路管直径 测量池 0.3mm 参比池 0.7mm 液路出口 1.0mm 最大流量 5ml/min 100ml/min 时间常数 0.1 0.2 0.5 1.0 2.0 5.0 和 10 s 数据输出 + 1.0 V 16步可调 自动调零 满量程 显示 2 x 16 字符 特点 内部集成电磁阀，进行参比池充满及清 洗 重量 8 kg 外型尺寸 105x185x340 mm(宽×高×深) 22 符合性声明 符合性声明 生产厂商名称: Wissenschaftliche Gerätebau Dr. Ing. Herbert KNAUER GmbH 生产厂商地址: Hegauer Weg 38 14163 Berlin, Germany WellChrom RI 检测器 K–2301, 订货号A2110 WellChrom RI 检测器 K–2401, 订货号A2111 符合下列要求和产品指标: ? Low Voltage Ordinance (73/23/EWG); EN 61010 – 1 (1993) ? Engineering Guidelines (89/392/EWG) ? EMV- Ordinance (89/336/EWG) EN 50081 – 1 (1992) EN 55011 (1991) Class B EN 55022 (1987) Class B EN 50082 – 1 (1992) IEC 801 – 2 (1984), includes IEC 41 B (sec) 81 (1992) IEC 801 – 3 (1984) IEC 801 – 4 (1988) 产品经过标准配置测试 Berlin April, 10th 2002 Bernward Rittgerodt (Managing Director) 仪器后面附有CE认证标志 包修条款 23 WellChrom示差折光检测器的保修期为从柏林包装起算12个月。 与厂家的规范不一致的使用或未经授权的维修而导致的损坏，不在保修范围内。 由于液路堵塞，磨损如保险丝或密封圈等部件不在保修范围内。 保修期内的索赔要求用户收到仪器后的14日内，将保修卡按照下面地址寄给我 们。 故障仪器应该寄到生产厂家进行维修。 Wissenschaftliche Gerätebau Dr. Ing. Herbert Knauer GmbH Hegauer Weg 38 D-14163 Berlin Tel: 030 – 809 727 – 0 Fax: 030 – 801 50 10 e-mail: info@knauer.net www.knauer.net 我们收到保修期内需要维修或更换的产品，经过鉴定后，履行免费维修。 包装和运费由购买方支付。 紫外检测器与示差检测器原理，用途，优缺点详细比较 2008-11-08 23:41 ?紫外检测器与示差检测器原理是什么, 紫外吸收检测器 ultraviolet absorption detector 简称紫外检测器(UV)，是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器。因为大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外吸收性质，所以该检测器是液相色谱中应用最广泛的检测器，几乎所有液相色谱仪都配置了这种检测器。示差检测:是通用型检测器，凡具有与流动相折光率不同的样品组分，均可使用示差折光检测器检测。目前，糖类化合物的检测大多使用此检测系统(当然现在糖类elsd很普遍)。 紫外:只要具有光吸收的都可以.示差: 存在光的对比差或折射率 任意一束光有一种介质射入另一种介质时，由于两种截至的折射率不同而发生折射现象。折射率的大小表明了截至光学密度的高低。介质的折射率随温度升高而降低。一般选用20度时两纳线的平均值589.3nm为检测波长测定溶剂的折射率。示差折光检测器是通过连续测定色谱柱流出液体折射率的变化而对样品浓度进行检测的。检测器的灵敏度与溶剂和溶质的性质都有关系，溶有样品的流动相和流动相本身之间折射率之差反映了样品在流动相中的浓度。 紫外检测器的工作原理是Lambert-Beer定律，即当一束单色光透过流动池时， 若流动相不吸收光，则吸收度A与吸光组分的浓度C和流动池的光径长度L成正比. 示差检测器是连续检测样品流路与参比流路间液体折光指数差值的检测器，是根据折射原理设计的，属偏转式类型。光源通过聚光镜和夹缝在光栏前成像，并作为检测池的入射光，出射光照在反射镜上，光被反射，又入射到检测池上，出射光在经过透射镜照到双光敏电阻上形成夹缝像。双光敏电阻是测量电桥的两个桥臂，当参比池和测量池流过相同的溶剂时，使照在双光敏电阻的光量相同，此时桥路平衡，输出为零。当测量池中流过被测样品时，引起折射率变化使照在双光电阻上的光束发生偏转，使双光敏电阻阻值发生变化，此时由电桥输出讯号，即反映了样品浓度的变化情况。 示差检测器主要是依据不同溶液的折光率来鉴定的，当浓度不紫外检测器:基于Lambert-Beer定律，即被测组分对紫外光或可见光具有吸收，且吸收强度与组分浓度成正比。 很多有机分子都具紫外或可见光吸收基团，有较强的紫外或可见光吸收能力，因此UV-VIS检测器既有较高的灵敏度，也有很广泛的应用范围。由于UV-VIS对环境温度、流速、流动相组成等的变化不是很敏感，所以还能用于梯度淋洗。一般的液相色谱仪都配置有UV-VIS检测器。用UV-VIS检测时，为了得到高的灵敏度，常选择被测物质能产生最大吸收的波长作检测波长，但为了选择性或其它目的也可适当牺牲灵敏度而选择吸收稍弱的波长，另外，应尽可能选择在检测波长下没有背景吸收的流动相。 示差检测器:对于偏转式示差折光检测器，光路在通过两个装有不同液体的检测池时发生偏转，偏转的大小与两种液体之间折光率的差异成比例。光路的偏转由光敏元件上的位移测得，显示了折光率的不同。 在光学系统中采用了多种精密装置，提高了运行的稳定性，也使检测器更加精致。从钨灯发射出的光束经过聚光透镜，狭缝1，准直镜和狭缝2检测池，然后光被检测池后的反光镜反射，再通过检.在光学系统中采用了多种精密装置，提高了运行的稳定性，也使检测器加精致。从钨灯发射出的光束经过聚光透镜，狭缝1，准直镜和狭缝2检测池，然后光被检测池后的反光镜反射，再通过检测池、狭缝2、准和零位玻璃调节器后在光敏元件上显示出狭缝1的影象 光敏元件上有两个并排的光敏接收元件。 当检测池中的样品和参比的折光率变化时，光敏元件上的影象水平移动。光敏接收元件各自发出的电信号的变化与影象的位例。因此，与折射率的差异相对应的信号可由两信号输出的差异获得。 紫外检测器的原理:被检测物质具有特定的吸收波长，在该波长下，响应值与浓度成正比。示差检测器原理:被测物质具有一定的折光系数。 ?各自的用途, 紫外检测器使用于大部分常见具有紫外吸收有机物质和部分无机物质.示差检测是凡具有与流动相折光率不同的样品组分，均可使用示差折光检测器检测. 示差折光检测器对没有紫外吸收的物质，如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等都能够检测。在凝胶色谱中示差折光检测器是必不可少的，尤其对聚合物，如聚乙烯、聚乙二醇、丁苯橡胶等的分子量分布的测定。另外在制备色谱中也经常用到。 还适用于流动相紫外吸收本地大，不适于紫外吸收检测的体系。 示差折光检测器与紫外可见检测器相比，灵敏度较低，一般不适用于痕量分析，也不适用于梯度洗脱。 紫外检测器对占物质总数约80%的有紫外吸收的物质均可检测，既可测190--350 nm范围的光吸收变化，也可向可见光范围350---700 nm延伸。 示差检测器属于通用性检测器，如果选择合适的溶剂，几乎所有的物质都可以进行检测。 紫外检测器适用于有机分子具紫外或可见光吸收基团，有较强的紫外或可见光吸收能力的物质检测. 示差检测器属于通用性检测器，可以分析绝大多数的物质. 用途:一般当物质在200-400nm有紫外吸收时，考虑用紫外检测器。无吸收或吸收弱时可以考虑示差检测器。 ?它们有什么各自优点, 紫外吸收检测器它不仅有较好的选择性和较高的灵敏度，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱。示差折光检测器这一系统通用性强、操作简单. 示差检测器属于总体性能浓度型检测器，其响应值取决于柱后流出液折射率的变化，采用含有样品的流出液和不含样品的流出液的同一物理量的示差测量。其响应信号与溶质的浓度成正比。属于中等灵敏度检测器，检测限可达1mg/ml,0.1mg/ml。 紫外检测器灵敏度高，噪音低，线性范围宽，对流速和温度均不敏感，可于制备色谱。由于灵敏高，因此既使是那些光吸收小、消光系数低的物质也可用UV检测器进行微量分析。 示差折光检测器是目前液相色谱中常用的一种检测器，它可与输液泵，色谱柱，进样器等组成凝胶渗透色谱仪或高速液相色谱仪系统，也可以配置适当的进样系统作为单独的分析仪器使用。对所有溶质都有响应，某些不能用选择性检测器检测的组分，如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等，可用示差检测器检测。由于不同的液体折光不同，因此本检测器通用性强，可广泛地应用于化工、石油、医药、食品等领域为科研、生产服务。 紫外检测器有较好的选择性和较高的灵敏度，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱，示差检测器几乎对所有溶质都有响应. 紫外优点:常用、方便。示差检测器:弱吸收物质定量准确。 ?它们之间的区别, 示差折光检测器这一系统灵敏度低(检测下限为10-7g,ml)，流动相的变化会引起折光率的变化，因此，它既不适用于痕量分析，也不适用于梯度洗脱样品的检测。UV检测的主要缺点在于紫外不吸收的化合物灵敏度很低。 1.紫外是选择性检测器，示差是通用性检测器; 2.紫外检测器灵敏度高，示差检测器灵敏度低; 3.紫外检测器可进行梯度洗脱，示差检测器不能进行梯度洗脱; 4.紫外检测器对压力和温度不敏感，示差检测器很敏感。 示差检测在原理上虽然是通用型检测器，但是它的灵敏度低，和梯度脱洗不相容，因此它对于HPLC来说不是理想的检测器。 而紫外检测器既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱. ?紫外检测器的波长范围是根据什么来的, 连续光源(氘灯)发出的光，通过狭缝、透镜、光栅、反射镜等光路组件形成单一波长的平行光束。通过光栅的调节可得到不同波长。 波长范围应该是根据光源来确定的，不同光源波长范围也不一样。 光波根据光的传播频率不一样而划分的。 ?紫外的范围是什么,,,表示的是什么意思,范围的大小的好坏之处(越大越好还是越小越好), 紫外的测量范围一般为0.0003---5.12(AUFS),常用为0.005---2.0(AUFS)。 AU就是吸收度单位(absorbance unit)，通过公式换算: Absorbance is a logarithmic scale, so that an absorbance unit (AU) of 1.0 is equal to 90% absorbance (that is, 10% transmission), an AU of 2.0 is equal to 99%, an AU of 3.0 is equal to 99.9%, and so on. 物理上测得物质的透光率，然后取负对数得到吸收度。1.0对应90%的吸收，即透过了0.1，取10为底数的负对数值得到1.0,2.0对应99%的吸收，即透过了0.01，取10为底数的负对数值得到2.0。 (marxinfy):紫外的范围:一般指200-400nm，AU:相应值的表示单位，相当于多少伏的电压。范围的大小应该适中较好，实际工作中一般就需要1AU左右。 ?示差检测器的折射率范围大小如何计算,是怎么来计算的,范围越大越好还是越小越好,理由是什么, 根据稀溶液中相加和定律，溶液的折射率等于溶剂和溶质各自的折射率乘以各自的摩尔浓度之和。n,c0n0+cini 式中ni为溶质的折射率，ci为溶质的摩尔百分数，c0为溶剂的摩尔百分数。因为ci，c0,1，n越大，可测量的浓度范围也越大。 ?示差检测器的温控范围是怎么来的,范围的大小对仪器的性能和检测有什么好坏之处, 折光物质由于温度变化引起该物质密度变化，进而导致折射率的改变。常用有机溶剂折射率的温度系数(dn/dT)在,1.05×10,4/度(水)和,6.4×10,4/度(苯)之间变化，平均值为,4.9×10,4/度。当温度变化10,4度时，折光率变化约在10,7RIU，这就意味着对于目前可接受的噪声水平10,7RIU，需要将温度控制在,10,4,，10,4范围之内。温度控制范围越小，噪声越低，信噪比就越大，越有利于检测。 注:该中文说明书的翻译稿如与原英文说明书有差异，以后者为准。 此中文说明书的版权为北京创新通恒科技有限公司所有。