RD血型鉴定操作规程

集团化工作小组#Q8QGGQT-GX8G08Q8-GNQGJ8-MHHGN#RD血型鉴定操作规程对象：全院职工医疗药事制度文件名称：Rh（D）血型鉴定编写日期：修订日期：执行日期：注：①本文件仅供本院人员使用，未经同意，不得翻印②本文件最终解释权归输血科Rh（D）血型鉴定【原理】Rh血型系统是输血医学中仅次于ABO系统的第二大血型系统。Rh血型系统常见的抗原有D和C、c、E、e五种，分别由RHD基因和RHCE基因编码，RhD和RhCE蛋白均是反复穿膜的蛋白质。使用相应的抗D、抗C、抗c、抗E、抗e五种血型试剂可以鉴定这些抗原。临床上，D抗原是Rh抗原中免疫原性最强的抗原，也是最具有临床意义的抗原，一般只做D抗原鉴定，凡带有D抗原者称为Rh阳性，不带D抗原者称为Rh阴性。试管法【样本】抗凝或不抗凝的样本均可用于Rh鉴定试验。红细胞可悬浮在自身血清、血浆或盐水中，也可以洗涤后悬浮于盐水中。【试剂】IgM抗D试剂Rh对照试剂【操作】加1滴抗D到一洁净试管，并做好标记加1滴Rh对照试剂到第二个洁净试管中，并做好标记分别加1滴2%～5%红细胞悬液到每支试管中轻轻混匀，通常（900～100）×g离心15秒轻轻重悬细胞扣，检查凝集评价反应强度，记录试验管和对照管得试验结果【结果判定】抗D管凝集，对照管不凝集表明红细胞是RhD阳性对照管和抗D管均阴性，说明待测红细胞是RhD阴性结果对照管凝集则试验无效2.玻片法【样本】用玻片法进行RhD定型时，待检红细胞悬液的浓度是40%～50%【试剂】适合用于玻片法的低蛋白抗D试剂【操作】加1滴抗D到一洁净的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好标记加1滴适合的对照试剂到另一洁净的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好标记向以上玻片或白瓷板凹孔中的每一种试剂中分别加1滴混匀的40%～50%待检红细胞悬液充分混合抗体试剂和细胞，用搅拌棒将混合物均匀分散不断地从一边到另一边轻轻倾斜转动玻片或白瓷板，持续大概2分钟读取，解释并记录所有玻片或白瓷板凹孔中的结果【结果判定】抗D试剂与红细胞反应表现凝集，而对照为阴性反应，表明待检红细胞为RhD阳性抗D试剂与对照均为阴性反应，表明待检红细胞为RhD阴性对照管凝集则试验无效【】玻片法可能存在感染性标本暴露的风险，需要注意防范；玻片法不适用于弱D表型柱凝集法【样本】同玻片法和试管法【试剂】已加入抗D试剂的柱凝集血型卡【操作】配制好的检测样本的红细胞悬液和试剂红细胞悬液.通常配制为%～%浓度。在专用微柱凝集卡的RhD检测管中加入样本红细胞悬液50ul在专用血型血清学用离心机内离心判读并记录凝集反应结果【结果判定】根据红细胞在凝胶柱内的反应情况解释凝集强度。出现凝集和（或）溶血为阳性，不凝集为阴性【参考文献】中华人民共和国卫生部医政司编，全国临床检验操作规程（第四版）