任务一水中菌落总数的测定习题(精)

任务一  水中菌落总数的测定习题 一、名词解释： 1.cfu: 2.无菌操作: 3.细菌总数: 二、填空题： 1.生活饮用水检验方法微生物指标是            （写出GB代号）。 2.生活饮用水菌落总数不得超过       个/ml，总大肠菌群MPN不得检出。 3.菌落总数测定时对水样进行   倍递增稀释，一般选择      个连续稀释度。 4.应选取菌落数在         之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数作为菌落计数标准。低于 30cfu的平板记录具体菌落数，大于300 cfu的可记录为多不可计。 5.灭菌的平板计数琼脂培养基应却至   ℃时倾注平皿。 6.菌落总数测定时培养温度       ℃，培养时间       h。 7.稀释倍数越高，平板上的菌落数应越      。 三、判断题： 1.琼脂在46℃以下会发生凝固，故常用于固体培养基的凝固剂和营养剂。（    ） 2.菌落计数时，菌落数小于 100 cfu 时，按"四舍五入"原则修约，以整数。（    ） 3.菌落计数时，当平板内的菌落数过多（所有稀释度均大于300），但分布很均匀，可取平板的1/4计数，再乘以4作为该平板的菌落数。（    ） 4.空白对照试验的平板上允许有菌落生长。（    ） 5.菌落总数测定时，样品如果有包装，应用无水乙醇在包装开口处擦拭后取样。（    ） 四、简答题 1.平皿计数法(GB5750.12-2006)测定的细菌数量是样品中的实际菌数吗？为什么？ 2.某样品菌落总数测定时，所有稀释度平板上都无菌落生长，试分析出现此结果的原因有哪些。 五、实验题： 某种鸡厂对生产用水井的水样进行菌落总数测定时，按国家标准将水样处理及培养后，培养皿上生长的菌落数量记录如下： 菌落数 稀释倍数 皿号 10-1 10-2 10-3 1号平皿 291 31 3 2号平皿 279 35 0         请回答下列问题： 1.对水样进行处理及培养条件是指什么？  2.本次实验选择的稀释度是多少？选择依据是什么？ 3.列式计算并正确地对测定结果进行报告。 4.该指标（菌落总数）的常规检验依据是什么？简要写出其检验程序。 任务一  水中菌落总数的测定习题答案 一、名词解释： 1.cfu:指水样经过处理，在一定条件下培养所得的1mL检样中细菌菌落的数量。 2.无菌操作:采取一切方法防止微生物进入实验操作范围的操作方法。 3.细菌总数:指一定数量或面积的食品检样经过处理，在显微镜下对细菌进行直接计数。 二、填空题： 1.生活饮用水标准检验方法微生物指标是GB/T5750.12-2006 （写出GB代号）。 2.生活饮用水菌落总数不得超过  100  个/ml，总大肠菌群MPN不得检出。 3.菌落总数测定时对水样进行 十 倍递增稀释，一般选择  3  个连续稀释度。 4.应选取菌落数在 30—300 之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数作为菌落计数标准。低于 30cfu的平板记录具体菌落数，大于300 cfu的可记录为多不可计。 5.灭菌的平板计数琼脂培养基应却至 46 ℃时倾注平皿。 6.菌落总数测定时培养温度 36±1 ℃，培养时间 48±2 h。 7.稀释倍数越高，平板上的菌落数应越  少  。 三、判断题： 1.琼脂在46℃以下会发生凝固，故常用于固体培养基的凝固剂和营养剂。（  ×  ） 2.菌落计数时，菌落数小于 100 cfu 时，按"四舍五入"原则修约，以整数报告。（  √  ） 3.菌落计数时，当平板内的菌落数过多（所有稀释度均大于300），但分布很均匀，可取平板的1/4计数，再乘以4作为该平板的菌落数。（  √  ） 4.空白对照试验的平板上允许有菌落生长。（  ×  ） 5.菌落总数测定时，样品如果有包装，应用无水乙醇在包装开口处擦拭后取样。（  ×  ） 四、简答题 1.平皿计数法(GB5750.12-2006)测定的细菌数量是样品中的实际菌数吗？为什么？ 答：不是。平板菌落计数法测定的细菌总数只是检样中部分活菌数，测定结果比检样中实际存在的活菌数值小，这主要是由于培养基的营养状况和培养条件不能满足某些细菌的要求，致使这些细菌不能正常的生长繁殖。首先，不同的细菌对营养物质的要求不同，而平板菌落计数法常选用的是一种培养基，其不可能满足检样中所有细菌的营养需求；其次，不同的细菌对环境条件的要求不同，在平板菌落计数中常选择中温（一般36℃±1℃）培养，于是嗜热细菌和嗜冷细菌的生长繁殖就要受到影响。 2.某样品菌落总数测定时，所有稀释度平板上都无菌落生长，试分析出现此结果的原因有哪些。 答：（1）稀释倍数选择不正确。 （2）营养琼脂培养基温度太高，烫死检样中的细菌。 （3）检样中没有细菌。 五、实验题： 1．水样进行处理是指无菌操作条件下进行十倍递增稀释，培养条件是36±1℃，48±2h。 2.本次检验选择的稀释度是10、100、1000倍，选择依据是对样品污染情况估计。 3.(291+279)÷2=285 (31+35)÷2=33 330÷291=1.13 (3100÷2910=1.13) ∵ 1.13〈2 ∴该水样菌落总数应为2850cfu/ mL。结果报告:2900 cfu/ mL 4.该指标的常规检验依据是GB5750.12-2006，其检验程序：检样  做成几个适当倍数的稀释液    选择3个适宜稀释度各取1 mL分别加入灭菌培养皿内    每皿加入适量平板计数琼脂培养基    培养（36℃、48h）  菌落计数 结果报告。