061 高锰酸钾的吸收曲线的绘制和含量测定

高锰酸钾的吸收曲线的绘制和含量测定［适用对象］药学、药物制剂、中药学、制药工程、中药学（国际交流方向、）生物工程专业［实验学时］3学时一、实验目的1.熟悉72型或721型分光光度计的使用方法熟悉光谱曲线的绘制方法,能从吸收光谱曲线中选择最大吸收波长九max掌握分光光度计比色法的操作和测定有色物质含量的方法.二、实验原理选择合适的波长间隔手工绘制KMnO4的吸收曲线并找出最大吸收波长九max.从吸收光谱选定的九max为测定波长用标准曲线法测定样品溶液的含量.三、仪器设备容量瓶25mL,50mL,1000mL吸耳球/洗瓶500mL滴管/坐标纸/镜头纸/移液管10mL、5mL、2mL、1mL分光光度计721型KMnO4（实验用）分析纯1.分光光度法的原理2.移液管的使用方法3.吸收定律比色测定方法标准曲线的绘制定量分析的原理最大吸收波长的选择依据标准溶液的配置方法五、实验步骤（一）标准溶液的制备准确称取基准物KMnO40.1250g,在小烧杯中溶解后全部转入1000ml容量瓶中，用蒸馏水稀释到刻度，摇匀，每ml含KMnO4为0.1250mg。（二）比色测定（用721型分光光度计）吸收曲线的绘制精密吸取上述KMnO4标准溶液20ml于50ml容量瓶中，加蒸馏水至标线，摇匀，以蒸馏水为空白，依次选择440，450，460，470，480，490，500，510，520，525，530，535，540，545，550，560，580，600，620，640，660，680，700nm波长为测定点，依法测出的各点的吸收度A。以测定波长为横坐标，以相应测出的吸光度Ai为纵坐标，绘制吸收曲线；从吸收曲线处找出最大吸收波长Xmax.标准曲线的绘制取6支25ml容量瓶，分别加入0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00KMnO4标准液，用蒸馏水稀释到刻度，摇匀。以第一管蒸馏水为空白，在最大吸收波长处，依次测定各溶液的吸光度A,然后以浓度C（mg/m1）为横坐标，相应的吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。SS样品的测定用一支25ml容量瓶，家样品溶液5ml（约含KMnO4为0.5mg），用蒸馏水稀释到刻度，摇匀，依上法操作，测出相应的A值。（三）计算C（KMnO4）（yg/ml）=Cxn样供C、为测样品中KMnO4的浓度（yg/ml）样C为标准曲线中查得的供试液的浓度（yg/ml）供n：样品溶液稀释为供试液的倍数六、实验报告要求要求有原始数据，实验时间，注意事项，并讨论误差的产生原因及以后在类似实验中要提高实验结果的准确度，需要采取那些方法七、思考题怎样选择测定波长比色测定的注意事项八、实验成绩评定办法实验成绩的评定包括实验操作（包括容量瓶的使用、移液管的使用、分光光度计的使用、工作曲线的绘制、天平的使用、数据的处理和卫生情况等7个小项）和实验结果（包括实验结果的准确性和相对标准偏差）。