血清钙(Ca)偶氮胂Ⅲ法测定

血清钙（Ca）偶氮胂Ⅲ法测定实验原理偶氮胂Ⅲ比色终点法。钙与偶氮胂Ⅲ在中性条件下形成蓝色复合物，显色强度与钙浓度成正比。加入8-羟基喹啉-5-磺酸掩蔽镁的扰乱。标本采集2.1病人准备：无特殊要求。2.2种类：血清、肝素血浆或尿液。标本寄存：血清/血浆稳定性：20～25℃保留可稳定7天；4～8℃保留可稳定3周；-20℃保留可稳定8个月。尿液稳定性：20～25℃保留可稳定2天；4～8℃保留可稳定4天；-20℃保留可稳定3个月；对24h尿液标本加浓盐酸10ml，并加热标本，使草酸钙溶解。标本运输：室温条件下运输标本拒收：细菌污染的不能做测定。实验材料：6.1上海申能钙测定试剂盒（货号：1111137170试剂：8×70ml）试剂组成磷酸盐缓冲液pH7.550mmol/L8-羟基喹啉-5-磺酸5mmol/L偶氮胂Ⅲ120mmol/L表面活性剂适量试剂准备：试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与贮存：试剂避光保留于2～8℃，若无污染，可稳定至无效期。试剂不可冰冻。开盖后应防止污染。变质指示：当试剂有浊度时，表示有细菌污染，不能持续使用。6.1.5：由于钙离子各处都有，必须严加注意采取防止污染。只使用一次性检测用品。微量螯合剂(如EDTA等)都会阻挡显色复合物的生成。须严加注意。试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！防止接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防举措使用试剂。6.2校准品：使用DiaSys企业提供的TruCalU校准品对自动剖析仪进行校准，详细参见生化查验校准品和质控品.SOP文件6.3质控品：详细参见生化查验校准品和质控品.SOP文件仪器：贝克曼AU680生化剖析仪操作步骤8.1项目基本参数：参见AU680生化剖析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见AU680生化剖析仪操作规程.SOP文件查验结果的判断与剖析10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警示限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。11.计算方法：以TruCalU复合校准品钙校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L报告。参照值范围血清/血浆：2.15～2.57mmol/L尿液：女性：<6.24mmol/24h男性：<7.49mmol/24h（注：各实验室应有自己的参照范围。）参照值因性别、年纪、饮食和地区的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应成立自己的参照值。临床意义：钙测量用于诊疗和治疗副甲状腺病，某些骨病，慢性肾病和手足抽搐（间歇性肌肉收缩或痉挛）等。只管体内超过99%的钙存在于骨骼和牙齿，临床上最关心血液里的钙。骨骼作为一个储藏器，经过释放钙防备低血钙和吸收钙防备血清钙水平过高，保持血清钙的相对稳定。饮食中钙的含量增加，吸收钙的百分比就减少，因此，吸收钙的数量可以保持相对稳定。在高钙饮食中钙吸收的轻微增加被反应在增加的肾排泄中。钙在很多细胞功能中起着重要作用，细胞内如肌肉收缩和糖原代谢，细胞外如骨钙化、凝血以及神经激动传达。血浆钙有三种不同的形式：游离离子、和蛋白联合以及与阴离子（如磷酸根、柠檬酸根和碳酸氢根等）形成复合物。总钙水平的降低与多种疾病相关，如骨病（尤其是骨质疏松症），肾病（特别是透析患者），肠道吸收不良以及甲状腺功能减退。总钙水平升高为甲状旁腺机能亢进，转移性恶性肿瘤及肉瘤样恶性病变。在预防骨质疏松进行钙的补充时，钙的检测有助于临床监控。操作性能14.1线性范围：0.01～6.25mmol/L。14.2精细度：重复性的评估是根据NCCLS介绍的标准方法，AU680批内重复性小于3%，总不精细度小于3%。用于剖析的质控血清和数据办理切合以上的NCCLS的规则。批内精细度xsCV批间精细度xsCVn=20(mmol/L)(mmol/L)(%)n=20(mmol/L)(mmol/L)(%)样品12.190.020.26样品12.200.040.50样品23.120.040.30样品23.070.030.22样品33.490.060.43样品33.420.060.4814.3方法学比较：本企业的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对70个样品进行Ca检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：；r=0.999。14.4敏捷度：本试剂的检测限为0.01mmol/L。14.5病人结果可报告范围0.01～6.25mmol/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1：1稀释，从头测定，结果乘以2。15.高出范围结果办理：本法线性上限为6.25mmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1：1稀释，从头测定，结果乘以2。16.病危报警值的办理当血清钙测定值>3.5mmol/L或<1.6mmol/L时，在经过复查等确认手段办理后应实时向临床主管医生。方法限制性17.1本法线性上限为6.25mmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1：1稀释，从头测定，结果乘以2。17.2扰乱物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度684mol/L，血红蛋白浓度5.00g/L，甘油三酯浓度22.6mmol/L，镁浓度6.2mmol/L时没有察看到扰乱。补救举措：当仪器发生故障时，快速联系仪器厂家进行维修。参照文件1.ThomasL.ClinicalLaboratoryDiagnostics.1sted.Frankfurt：TH-BooksVerlagsgesellschaft;1998.p.192-202.2.EndresDB,RudeRK.Mineralandbonemetabolism.In：BurtisCA,AshwoodER.rdSaundersCompany；1999.p.1395-1457.MichaylovaV,IlkovaP.PhotometricdeterminationofmicroamountsofcalciumwitharsenazoIII.AnalChimActa1971;53：194-8.BauerPJ.AffinityandstoichiometryofcalciumbindingbyarsenazoIII.AnalBiochem1981;110：61-72.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《查验科废物处理》履行。