一种含山苍子油护肤软膏及其制备方法

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112972331A(43)申请公布日2021.06.18(21)申请号202110231892.6A61K8/33(2006.01)(22)申请日2021.03.02A61K8/19(2006.01)A61Q19/00(2006.01)(71)申请人福建师范大学A61Q17/00(2006.01)地址350100福建省福州市福清市龙江街道校园新村一号福建师范大学研发中心(72)发明人卢玉栋　王梦茵　何建宇　王文荣　王浩楠　游瑞云　(74)专利代理机构福州科扬专利事务所(普通合伙)35001代理人李晓芬(51)Int.Cl.A61K8/9789(2017.01)A61K8/92(2006.01)A61K8/34(2006.01)权利要求书1页说明书8页(54)发明名称一种含山苍子油护肤软膏及其制备方法(57)摘要本发明涉及本发明公开了一种含山苍子油护肤软膏及其制备方法，该护肤软膏含以下成分：山苍子精油～纳米银复合抑菌剂、菊芋、紫草、甘草、黄芩、冰片、凡士林；本发明通过山苍子精油的主要成分柠檬醛还原硝酸银制成山苍子精油～纳米银复合抑菌剂，辅以菊芋创设有益菌生长环境，配合紫草、甘草、黄芩、冰片等性质温和的抗菌消炎的中药原料制成护肤软膏，能够保持长效、实现多效，保证使用安全性，适于孕妇婴儿等肌肤敏感人士。CN112972331ACN112972331A权　利　要　求　书1/1页1.一种含山苍子油护肤软膏及其制备方法，其特征在于，包括以下重量份的各原料：山苍子精油～纳米银复合抑菌剂15～35份、菊芋10～20份、紫草10～20份、甘草5～15份、黄芩5～15份、冰片10～20份、凡士林500～800份。2.如权利要求1所述的一种含山苍子油护肤软膏及其制备方法，其特征在于，包括以下重量份的各原料：山苍子精油～纳米银复合抑菌剂25份、菊芋15份、紫草15份、甘草8份、黄芩8份、冰片15份、凡士林600份。3.如权利要求1或2任一所述的一种含山苍子油护肤软膏及其制备方法，其特征在于，所述山苍子精油～纳米银复合抑菌剂的制备方法如下：A1、取山苍子鲜果剥皮除核，粉碎过90目筛，按照液料比3:1将山苍子粉末分散于蒸馏水中，充分搅拌得山苍子悬浊液；A2、将山苍子悬浊液置于超声波清洗机中进行超声浸取，设置超声功率100～110W，蒸馏温度75～80℃，超声时间35～50min；A3、将超声浸取结束的山苍子悬浊液进行减压过滤，所得滤液用旋转蒸发仪蒸发得山苍子提取物；A4、将山苍子提取物与丙二醇按1：14的比例稀释，得山苍子精油溶液。A5、向山苍子精油溶液中加入AgNO3溶液，用NaOH调节溶液pH为12～12.5，并加入EDTA作为络合剂，磁力搅拌使其反应混合均匀，得到山苍子精油～纳米银复合抗菌剂。4.如权利要求1所述的一种含山苍子油护肤软膏及其制备方法，其特征在于：所述步骤A1中山苍子鲜果剥皮除核后，浸泡在质量浓度为0.1％的NaCl溶液中。5.如权利要求2所述的一种含山苍子油护肤软膏的制备方法，其特征在于：所述步骤A5中AgNO3溶液的质量浓度为10～15％，NaOH的浓度为0.1～0.2mol/L。6.如权利要求1所述的含山苍子油护肤软膏的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：S1、将菊芋、紫草、甘草、黄芩、用粉碎机粉碎，过90目筛，按液料比为3:1加入蒸馏水，充分搅拌得中药悬浊液，在50～65℃下采用超声波辅助蒸馏法初步制得中药混合提取液，再减压过滤，用乙醇萃取回收制得中药浓缩液；S2、将凡士林加入洁净的锅中加热至50℃至完全融化；S3、在经过步骤S2融化的凡士林中加入经过步骤A1～A5制备好的山苍子精油～纳米银复合抗菌剂及经过步骤S1制得的中药浓缩液，继续加热至80～90℃，用磁力搅拌器搅拌均匀，搅拌速度为500～550r/min；S4、待经过步骤S3制得的均质混合液自然冷却至60～70℃，缓缓撒入研细的冰片，搅匀，制得含山苍子油护肤软膏。7.如权利要求5所述的一种含山苍子油护肤软膏的制备方法，其特征在于：所述步骤S1超声波辅助蒸馏法制中药混合提取液中超声时间为80～90min，超声功率为100～110W，蒸馏时间为2～2.5h。2CN112972331A说　明　书1/8页一种含山苍子油护肤软膏及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及一种含山苍子油护肤软膏及其制备方法，属于化妆品加工技术领域。背景技术[0002]山苍子，又名山鸡椒、山姜子属樟科。山苍子果实清香，纯正，风味独特且富含硒、锌等多种微量元素，对人体大有裨益。果实入药，称“毕澄茄”，可治胃寒痛和血吸虫病，同时具有健胃、散寒、理气之效，可治感冒及预防感冒。由山苍子提取的山苍子精油呈微黄色，有强烈、好闻的柠檬味，主要含柠檬醛、高级醇、有机酸等有效杀菌成分，使其具有广谱抑菌效果，在医药领域对念珠菌、黄曲霉等病菌有抑制作用，对肿瘤细胞和白细胞有诱导凋亡和抑制作用，临床被用作治疗妇科疾病，作为天然有机抗菌剂，有速效、强效的特点。[0003]我国山苍子油年产量有2000～2500吨，是世界上最大的山苍子油生产和输出国，但多以原油直接出口，产值低，是一项极大的经济损失，考虑将其高值化利用是将是山苍子行业未来发展的必然方向。[0004]目前，大多数山苍子精油主要用在日化行业，作为生产除菌剂的日常生活用品中，较少作为主要成分用于医药领域，主要是因为山苍子精油作为有机抗菌剂存在易挥发、不稳定的缺点，较易产生耐药性的问。发明[0005]为了解决现有技术中山苍子精油易挥发、不稳定和较易产生耐药性的问题，本发明提供了一种含山苍子油护肤软膏及其制备方法，利用山苍子精油的主要成分柠檬醛还原硝酸银制成山苍子精油～纳米银复合抑菌剂，再与菊芋、紫草、甘草、黄芩、冰片配佐制成护肤软膏，能够保持长效、实现多效，保证使用安全性，适于孕妇婴儿等肌肤敏感人士。[0006]本发明的技术如下：[0007]本发明公开一种含山苍子油护肤软膏，包括以下重量份的各原料：山苍子精油～纳米银复合抑菌剂15～35份、菊芋10～20份、紫草10～20份、甘草5～15份、黄芩5～15份、冰片10～20份、凡士林500～800份。[0008]进一步地，含山苍子油护肤软膏包括以下重量份的各原料：山苍子精油～纳米银复合抑菌剂25份、菊芋15份、紫草15份、甘草8份、黄芩8份、冰片15份、凡士林600份。[0009]进一步地，所述所述山苍子精油～纳米银复合抑菌剂的制备方法包括如下步骤：[0010]A1、取山苍子鲜果剥皮除核，粉碎过90目筛，按照液料比3:1将山苍子粉末分散于蒸馏水中，充分搅拌得山苍子悬浊液；[0011]A2、将山苍子悬浊液置于超声波清洗机中进行超声浸取，设置超声功率100～110W，蒸馏温度75～80℃，超声时间35～50min；[0012]A3、将超声浸取结束的山苍子悬浊液进行减压过滤，所得滤液用旋转蒸发仪蒸发得山苍子提取物；[0013]A4、将山苍子提取物与丙二醇按1：14的比例稀释，得山苍子精油溶液。3CN112972331A说　明　书2/8页[0014]A5、向山苍子精油溶液中加入AgNO3溶液，用NaOH调节溶液pH为12～12.5，并加入EDTA作为络合剂，磁力搅拌使其反应混合均匀，得到山苍子精油～纳米银复合抗菌剂。[0015]进一步地，所述步骤A5中AgNO3溶液的质量浓度为10～15％，NaOH的浓度为0.1～0.2mol/L。[0016]本发明还公开一种含山苍子油护肤软膏的制备方法，具体包括以下步骤：[0017]S1、将菊芋、紫草、甘草、黄芩、用粉碎机粉碎，过90目筛，按液料比为3:1加入蒸馏水，充分搅拌得中药悬浊液，在50～65℃下采用超声波辅助蒸馏法初步制得中药混合提取液，再减压过滤，用乙醇萃取回收制得中药浓缩液；[0018]S2、将凡士林加入洁净的锅中加热至50℃至完全融化；[0019]S3、在经过步骤S2融化的凡士林中加入经过步骤A1～A5制备好的山苍子精油～纳米银复合抗菌剂及经过步骤S1制得的中药浓缩液，继续加热至80～90℃，用磁力搅拌器搅拌均匀，搅拌速度为500～550r/min；[0020]S4、待经过步骤S3制得的均质混合液自然冷却至60～70℃，缓缓撒入研细的冰片，搅匀，制得含山苍子油护肤软膏。[0021]进一步地，所述步骤S1超声波辅助蒸馏法制中药混合提取液中超声时间为80～90min，超声功率为100～110W，蒸馏时间为2～2.5h。[0022]本发明的有益效果在于：[0023]1、本发明提供一种含山苍子油护肤软膏及制备方法，通过山苍子精油与硝酸银的还原反应制得纳米银～山苍子精油作为复合抗菌剂，实现了有机～无机复合抗菌；山苍子精油中柠檬醛部分还原制得的纳米银抗菌性能优于单独的硝酸银水溶液或山苍子精油，其中，纳米银有效浓度是纳摩尔水平，而硝酸银溶液中的银离子是在微摩尔水平，纳米银通过与细胞壁的肽聚糖和质膜作用损伤细胞膜，再与山苍子精油中的柠檬醛共同进入到细胞中作用于细胞关键酶、诱导活性氧自由基生成及损伤DNA等，山苍子精油与纳米银具有高效的协同作用，极大提高了抑菌效率，实现护肤功效。[0024]2、依据本发明制得的护肤软膏能够同时达到长效与多效的目的，纳米银直径在1～100nm间，由于具有小尺寸效应、面效应和量子效应等，使得其具有特殊的化学、物理和生物功能，抗菌能力增强，较一般粒子更加容易进入病原体并将其杀死，稳定性高实现长效抑菌，通过复配弥补了山苍子精油较易挥发而作用时间不长的缺陷；山苍子精油中柠檬醛对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌、蜡状芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、单增李斯特菌、变形杆菌、淋球菌均有显著的抑菌活性，同时山苍子精油中还有其他有抗菌活性的组分如6～甲基～5～庚烯～2～酮、芳樟醇等，而纳米银能杀死的细菌种类达650种之多，包括革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌、病毒等各种微生物，因此，本发明中纳米银～山苍子精油复合抗菌剂综合了以上的抗菌效果，通过作用于DNA、破坏细胞蛋白、中断细胞信号传导、影响线粒体等多种原理实现了多效和长效抑菌，保证肌肤健康。[0025]3、本发明的护肤软膏中加入中药材进行配伍，菊芋主要成分为菊糖、粗纤维及丰富的矿物质，有利于有益菌的生长，提高人体免疫力；紫草的紫草根含色素成分、主要含脂肪酸为软脂酸、油酸及亚油酸，有治疗婴儿皮炎、外阴湿疹、青年扁平疣及银屑病的功效；甘草有抗炎，抗过敏作用；甘草浸膏和甘草酸对某些毒物有类似葡萄糖醛酸的解毒作用；黄芩可治小儿秃疮、痈肿疮毒，且不产生抗药性，保证使用者的皮肤健康，是敏感肌肤人士的优4CN112972331A说　明　书3/8页先选择。具体实施方式[0026]下面结合较佳实施例对本发明做进一步的说明。[0027]实施例1[0028]一种含山苍子油护肤软膏，包括以下重量份的各原料：山苍子精油～复合抗菌剂23份、菊芋15份、紫草15份、甘草8份、黄芩8份、冰片15份、凡士林600份。[0029]进一步地，所述山苍子精油～纳米银复合抗菌剂的制备方法，包括如下步骤：[0030]A1、取山苍子鲜果剥皮除核后浸泡在质量浓度为0.1％的NaCl浓液中0.5h，粉碎过90目筛，按照液料比3:1将山苍子粉末分散于蒸馏水中，充分搅拌得山苍子悬浊液；[0031]A2、将山苍子悬浊液置于超声波清洗机中进行超声浸取，设置超声功率100W，蒸馏温度75℃，超声时间35min；[0032]A3、将超声浸取结束的山苍子悬浊液进行减压过滤，所得滤液用旋转蒸发仪蒸发得山苍子提取物；[0033]A4、将山苍子提取物与丙二醇按1:14的比例稀释，得山苍子精油溶液。[0034]A5、向15份山苍子精油中加入8份质量浓度为10％的AgNO3溶液，用浓度为0.1mol/L的NaOH调节溶液pH为12，并加入EDTA作为络合剂，磁力搅拌使其反应混合均匀，搅拌速度为500r/min，得到山苍子精油～纳米银复合抗菌剂；[0035]上述含山苍子油护肤软膏的制备方法，具体包括以下步骤：[0036]S1、将菊芋、紫草、甘草、黄芩、用粉碎机粉碎，过90目筛，按液料比为3:1加入蒸馏水，充分搅拌得中药悬浊液，在50℃下采用超声波辅助蒸馏法初步制得中药混合提取液，再减压过滤，用乙醇萃取回收制得中药浓缩液；[0037]S2、将凡士林加入洁净的锅中加热至50℃至完全融化；[0038]S3、在经过步骤S2融化的凡士林中加入经过步骤A1～A5制备好的山苍子精油～纳米银复合抗菌剂及经过步骤S1制得的中药浓缩液，继续加热至80℃，用磁力搅拌器搅拌均匀，搅拌速度为500r/min；[0039]S4、待经过步骤S3制得的均质混合液自然冷却至60℃，缓缓撒入研细的冰片，搅匀，制得含山苍子油护肤软膏。[0040]实施例2[0041]一种含山苍子油护肤软膏，包括以下重量份的各原料：山苍子精油～复合抗菌剂25份、菊芋20份、紫草20份、甘草5份、黄芩5份、冰片20份、凡士林500份。[0042]进一步地，所述山苍子精油～纳米银复合抗菌剂的制备方法，包括如下步骤：[0043]A1、取山苍子鲜果剥皮除核后浸泡在质量浓度为0.1％的NaCl浓液中0.5h，粉碎过90目筛，按照液料比3:1将山苍子粉末分散于蒸馏水中，充分搅拌得山苍子悬浊液；[0044]A2、将山苍子悬浊液置于超声波清洗机中进行超声浸取，设置超声功率100W，蒸馏温度75℃，超声时间35min；[0045]A3、将超声浸取结束的山苍子悬浊液进行减压过滤，所得滤液用旋转蒸发仪蒸发得山苍子提取物；[0046]A4、将山苍子提取物与丙二醇按1:14的比例稀释，得山苍子精油溶液。5CN112972331A说　明　书4/8页[0047]A5、向15份山苍子精油中加入10份质量浓度为10％的AgNO3溶液，用浓度为0.1mol/L的NaOH调节溶液pH为12，并加入EDTA作为络合剂，磁力搅拌使其反应混合均匀，搅拌速度为500r/min，得到山苍子精油～纳米银复合抗菌剂；[0048]上述含山苍子油护肤软膏的制备方法，具体包括以下步骤：[0049]S1、将菊芋、紫草、甘草、黄芩、用粉碎机粉碎，过90目筛，按液料比为3:1加入蒸馏水，充分搅拌得中药悬浊液，在50℃下采用超声波辅助蒸馏法初步制得中药混合提取液，再减压过滤，用乙醇萃取回收制得中药浓缩液；[0050]S2、将凡士林加入洁净的锅中加热至50℃至完全融化；[0051]S3、在经过步骤S2融化的凡士林中加入经过步骤A1～A5制备好的山苍子精油～纳米银复合抗菌剂及经过步骤S1制得的中药浓缩液，继续加热至80℃，用磁力搅拌器搅拌均匀，搅拌速度为500r/min；[0052]S4、待经过步骤S3制得的均质混合液自然冷却至60℃，缓缓撒入研细的冰片，搅匀，制得含山苍子油护肤软膏。[0053]实施例3[0054]一种含山苍子油护肤软膏，包括以下重量份的各原料：山苍子精油～复合抗菌剂35份、菊芋10份、紫草10份、甘草15份、黄芩15份、冰片10份、凡士林800份。[0055]进一步地，所述山苍子精油～纳米银复合抗菌剂的制备方法，包括如下步骤：[0056]A1、取山苍子鲜果剥皮除核后浸泡在质量浓度为0.1％的NaCl浓液中0.5h，粉碎过90目筛，按照液料比3:1将山苍子粉末分散于蒸馏水中，充分搅拌得山苍子悬浊液；[0057]A2、将山苍子悬浊液置于超声波清洗机中进行超声浸取，设置超声功率100W，蒸馏温度75℃，超声时间35min；[0058]A3、将超声浸取结束的山苍子悬浊液进行减压过滤，所得滤液用旋转蒸发仪蒸发得山苍子提取物；[0059]A4、将山苍子提取物与丙二醇按1:14的比例稀释，得山苍子精油溶液。[0060]A5、向20份山苍子精油中加入15份质量浓度为10％的AgNO3溶液，用浓度为0.1mol/L的NaOH调节溶液pH为12，并加入EDTA作为络合剂，磁力搅拌使其反应混合均匀，搅拌速度为500r/min，得到山苍子精油～纳米银复合抗菌剂；[0061]上述含山苍子油护肤软膏的制备方法，具体包括以下步骤：[0062]S1、将菊芋、紫草、甘草、黄芩、用粉碎机粉碎，过90目筛，按液料比为3:1加入蒸馏水，充分搅拌得中药悬浊液，在50℃下采用超声波辅助蒸馏法初步制得中药混合提取液，再减压过滤，用乙醇萃取回收制得中药浓缩液；[0063]S2、将凡士林加入洁净的锅中加热至50℃至完全融化；[0064]S3、在经过步骤S2融化的凡士林中加入经过步骤A1～A5制备好的山苍子精油～纳米银复合抗菌剂及经过步骤S1制得的中药浓缩液，继续加热至80℃，用磁力搅拌器搅拌均匀，搅拌速度为500r/min；[0065]S4、待经过步骤S3制得的均质混合液自然冷却至60℃，缓缓撒入研细的冰片，搅匀，制得含山苍子油护肤软膏。[0066]实施例4[0067]一种含山苍子油护肤软膏，包括以下重量份的各原料：山苍子精油～复合抗菌剂6CN112972331A说　明　书5/8页22份、菊芋15份、紫草18份、甘草10份、黄芩10份、冰片18份、凡士林700份。[0068]进一步地，所述山苍子精油～纳米银复合抗菌剂的制备方法，包括如下步骤：[0069]A1、取山苍子鲜果剥皮除核后浸泡在质量浓度为0.1％的NaCl浓液中0.5h，粉碎过90目筛，按照液料比3:1将山苍子粉末分散于蒸馏水中，充分搅拌得山苍子悬浊液；[0070]A2、将山苍子悬浊液置于超声波清洗机中进行超声浸取，设置超声功率100W，蒸馏温度75℃，超声时间35min；[0071]A3、将超声浸取结束的山苍子悬浊液进行减压过滤，所得滤液用旋转蒸发仪蒸发得山苍子提取物；[0072]A4、将山苍子提取物与丙二醇按1:14的比例稀释，得山苍子精油溶液。[0073]A5、向12份山苍子精油中加入10份质量浓度为10％的AgNO3溶液，用浓度为0.1mol/L的NaOH调节溶液pH为12，并加入EDTA作为络合剂，磁力搅拌使其反应混合均匀，搅拌速度为500r/min，得到山苍子精油～纳米银复合抗菌剂；[0074]上述含山苍子油护肤软膏的制备方法，具体包括以下步骤：[0075]S1、将菊芋、紫草、甘草、黄芩、用粉碎机粉碎，过90目筛，按液料比为3:1加入蒸馏水，充分搅拌得中药悬浊液，在50℃下采用超声波辅助蒸馏法初步制得中药混合提取液，再减压过滤，用乙醇萃取回收制得中药浓缩液；[0076]S2、将凡士林加入洁净的锅中加热至50℃至完全融化；[0077]S3、在经过步骤S2融化的凡士林中加入经过步骤A1～A5制备好的山苍子精油～纳米银复合抗菌剂及经过步骤S1制得的中药浓缩液，继续加热至80℃，用磁力搅拌器搅拌均匀，搅拌速度为500r/min；[0078]S4、待经过步骤S3制得的均质混合液自然冷却至60℃，缓缓撒入研细的冰片，搅匀，制得含山苍子油护肤软膏。[0079]根据上述实施例1～4制得的含山苍子油护肤软膏的抑菌功效评价采用抑菌圈法中的打孔法，采用实施例1至4制备的山苍子精油～纳米银复合抗菌剂作为实验组，具体评价方法如下：[0080](1)本实验采用LB固体培养基，培养基的制备方法：准确称取酵母粉5g、NaCl 10g、胰蛋白胨10g、琼脂20g，溶解于1000mL蒸馏水，用PBS缓冲溶液将PH调至7.5，分装于锥形瓶中，121℃高温下灭菌20min；[0081](2)将供试菌移入相对应的固体培养基进行活化，于37℃培养基中培养16～24h；活化后用接种环挑取少许菌体，放入装有无菌水的试管内，振动摇匀，制成菌悬液；采用SN/T 2098～2008标准所述方法计数，调整菌悬液浓度，使其菌体浓度约为105CFU/mL；[0082](3)将步骤(2)中的菌悬液倒入步骤(1)的琼脂中，摇晃使其混合均匀，所述菌悬液与琼脂的体积比为1:100；[0083](4)取步骤(3)所得的混有菌液的琼脂20ml倒入直径为90mm的无菌培养基中，待其凝固得含菌平板，用直径为6mm的无菌的打孔器对平板进行打孔；[0084](5)用无菌的移液枪移取200μl实施例1至4制得的山苍子精油～纳米银复合抗菌剂，注入步骤(4)所得待孔的平板的孔中，放入37℃培养箱中培养24h后，测定孔中周围抑菌圈直径大小(所得圈直径减去6mm的孔径)，观察抑菌效果，每种菌重复三次实验，最后取平均值；在上述实验条件下，使用同样浓度的苯甲酸钠进行对比实验，实验结果见表1；7CN112972331A说　明　书6/8页[0085]其中，抑菌圈直径>20mm，高度敏感；10～20mm，中度敏感；5～10mm，低度敏感。[0086]表1不同抗菌剂抗菌结果[0087][0088]表2不同浓度的山苍子精油制备的抗菌剂的抗菌实验[0089][0090]表3不同浓度的硝酸银制备的抗菌剂的抗菌实验[0091][0092]利用本申请中实施例1提供的方法进行含山苍子油护肤软膏的制备，其中不断调整山苍子精油浓度和硝酸银的浓度，制备得到的山苍子精油～纳米银复合抗菌剂的抗菌效果如表2和表3所示，从表2和表3中可知，当山苍子精油～纳米银复合抗菌剂中山苍子精油浓度为0.2％时，制得的山苍子精油～纳米银复合抗菌剂对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、痤疮丙酸杆菌和白色念珠菌的抗菌效果最显著，当硝酸银浓度为0.25％时，制得的山苍子精油～纳米银复合抗菌剂对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、痤疮丙酸杆菌和白色念珠菌的抗菌效果最显著，同时从表格中可知，本申请制得的山苍子精油～纳米银复合抗菌剂对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、痤疮丙酸杆菌和白8CN112972331A说　明　书7/8页色念珠菌的抗菌效果良好。[0093]根据上述实施例1制得的含山苍子油护肤软膏的皮肤刺激性评价采用《化妆品卫生规范》中第二部分毒理学试验方法的皮肤刺激性/腐蚀性试验方法，具体评价方法如下：[0094]皮肤刺激性是指皮肤涂敷受试物后局部产生的可逆性炎性变化。选用4只成年、健康、皮肤无损伤的白色雌性家兔，单笼饲养，试验前在实验动物房环境中适应3d时间。试验前将白色雌性家兔背部脊柱两侧被毛剪掉，去毛范围各为2cm×3cm，涂抹面积2.5cm×2.5cm。取实施例1～4制得的含山苍子油护肤软膏0.5g涂抹在一侧皮肤上，另一侧涂凡士林作为对照，每天涂抹1次，连续涂抹14d。从第二天开始，每次涂抹前应剪毛，用温水清除残留受试物。一小时后观察结果，按表4评分，对照区和试验区同样处理。[0095]结果评价：按下列公式计算每天每只动物平均积分，以表5判定皮肤刺激强度。[0096][0097]表4皮肤刺激反应评分[0098][0099]表5皮肤刺激强度分级[0100][0101]表6实施例1含山苍子油护肤软膏对家兔多次皮肤刺激性试验结果9CN112972331A说　明　书8/8页[0102][0103]表7实施例1～4含山苍子油护肤软膏对家兔多次皮肤刺激性试验结果[0104][0105]利用实施例1～4提供的方法制备含山苍子油护肤软膏对白色雌兔进行多次皮肤刺激性试验，以实施例1为代表记录14d实验结果得到表6，其他实施例与此相同。由表7结果可知实施例1～4每天每只动物积分均值为均小于0.5，对照表5表明该含山苍子油护肤软膏对皮肤无刺激性，适于孕妇婴儿等肌肤敏感人士。[0106]以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。10