轮虫的培养技术

轮虫的培养技术 集美大学水产学院陈学豪教授 番禺梅山马利酵母有限公司 (联合编写) 1、形态特征 1)、轮虫为雌雄异体，雄性个体小，结构简单，仅有纤毛环和精巢，也不摄食，专为有性生殖交配。雌性个体大，被甲长196-250μ，宽150-202μ，前沿背面有棘刺6个，而腹面仅4个。轮虫有一个尾足，其内有粘液分泌于足趾，可粘于池壁等物体上作休息。 2)、轮虫三大特征 a、轮盘:由纤毛环、棒状突和触毛组成，具运动和摄食作用。 b、咀嚼器:接口后端，将食物磨碎。 c、原肾管:为一原始的肾，内有焰细胞。 2、生殖习性 1)、孤雌生殖:在适宜的生态条件下，轮虫均进行孤雌生殖，即由雌性成体产生夏卵，然后孵化出雌性小轮虫。其产卵间隔小于4小时，每只雌性成体平均产卵21个，产卵持续6-7天。产出的卵挂在成体尾足基部，待发育成小轮虫后才破卵壳。 2)、两性生殖:在环境不良的条件下，如饥饿、密度过高(>200个/毫升)、水温低、缺氧、水质(盐度、PH、水温)突变等，雄性个体出现，然后雌雄交配产生休眠卵(也称冬卵)，休眠卵比夏卵大，卵壳厚，一端有个空隙，可长期保存。 3)、生活史: 3、生态条件 1)、温度:适温25-35?，繁殖临界水温10?，低于5?和高于40?不能存活。日本把在不同温度下培养的轮虫分为S型和L型轮虫。 S型轮虫:个体小，适宜较高水温下培养(30-35?)，但不耐低温。 L型轮虫:个体大，适宜较低水温下培养(20-25?)。 2)、盐度:生活为2-50‰，适宜盐度10-30‰，最适盐度15-25‰(18‰，比重1.016)，不适应盐度的突然变化。 3)、光照:有光照下培养比黑暗好，适宜光照4400-10000LX。因为光照能抑制原生动物繁殖，并促进单胞藻和光合细菌生长。 4)、溶氧:保持1.5mg/l以上即可，耐力强。 5)、种群密度:密度大，则卵少、繁殖慢;密度小，则卵多、繁殖快。但密度太小易被敌害侵入，一般密度达200个/毫升即要间疏采收。 4、轮虫食性:为滤食性动物，靠轮盘上纤毛摆动造成水流而滤食水中食物颗粒。轮虫饵料为φ25μ以下(最好φ15μ以下)，包括细菌、酵母类、单胞藻、小型原生动物、有机碎屑等。 5、发育生长:夏卵小轮虫(离开母体)成虫，怀卵持续6-7天。轮虫寿命约10天。 培养管理 大量培养轮虫的成功条件必须是培养环境与轮虫的生理要求完全一致，否则轮虫将会增殖不良或逐渐死亡。为了稳定培养并供应优质的轮虫, 应从以下几个方面加强管理。 3.1 水温 水温是与轮虫繁殖关系最密切的环境因素。轮虫适温范围为5-40?，最适温度为25-35?。在适宜的温度范围内，随着温度的升高，轮虫的世代时间缩短，产量也随之增加。水温对轮虫繁殖影响有两个方面:一是水温过高或过低，二是水温急剧波动。 过高的温度对轮虫的种群增长有抑制作用。温度过高会使轮虫的蛋白质、碳量及热值急剧下降，从而降低轮虫的品质。温度过低同样 会影响轮虫的繁殖。厦门地区野生轮虫的数量在11月份开始减少，12月上旬全无踪影，室内培养的轮虫活力降低，深入容器底部，寒潮来临大量死亡。在天气不稳定、气温变化较大的季节，尤其是大量使用轮虫的4-5月梅雨时期，轮虫数量也会急剧变动。所以在轮虫培养过程中，要密切注意水温变化，及时采取有效应对措施，避免轮虫大量死亡。 3.2 盐度 王堉等报道，褶皱臂尾轮虫适宜的繁殖盐度为10-30，而尤以15-25为宜。何进金等的试验明，在1.000-1.040 的相对密度范围内，轮虫都能繁殖，培养轮虫的适宜相对密度在1.000-1.015之间;相对密度在1.020以上时，相对密度越高，轮虫的增殖量越少。 高盐度对轮虫增殖不利，如果仅从轮虫培养来考虑，适宜的盐度范围是15-25，但低盐度培养的轮虫投入育苗池后活力差或死亡，饵料价值会降低，可以在适当的范围内降低比重促进轮虫的增殖。在培养过程中注意维持水位，保持正常的水深。在炎热的夏天，太阳曝晒，水分蒸发量大，造成水位下降，池水盐度增大，对轮虫生长繁殖很不利，必须进行调节。最理想的方法就是把淡水引入培养池，如果不能引入淡水也可灌入新鲜海水调节。另外，在轮虫接种或采收时，盐度的升降差不能超过5‰，否则轮虫会因盐度突变而大量死亡。 3.3 合理投喂 目前用于轮虫培养的饵料主要为单细胞藻类和酵母，Caric等的研究表明，浮游植物的单种培养物是褶皱臂尾轮虫的最合适的饵料， 也有人用发酵面粉、农业加工下脚料(如米糠) 培养轮虫。如果投喂单细胞藻类(如小球藻、扁藻等) ,则投喂量不受限制。小球藻、扁藻等单胞藻培育轮虫营养全面，饵料效果好，但是，由于受单胞藻培育场地的限制，在进行大规模轮虫培育时，单胞藻的量很难做到足量供给。 由于轮虫食量大，轮虫摄食单胞藻的速度远远大于单胞藻的增殖速度，一般情况下，单独用单胞藻培育轮虫，轮虫密度很难达到200个/毫升以上。虽然采用特有的培育装置，以浓缩小球藻为饵料，培育的轮虫密度可达1.0×l04-2.0×104个,毫升以上，但这种轮虫培育的成本过高，不易于推广。用酵母作饵料培育的轮虫，经短时间的单胞藻或鱼肝油营养强化，也能达到很好的饵料效果。 一般用酵母培育轮虫，由于受低轮虫接种密度、酵母投喂量不易掌握的影响，培育密度常在200个/毫升以下，很难超过500个/毫升。关于酵母的投喂量，有很多学者做过相关研究。据张道南等研究表明，投喂啤酒酵母研究褶皱臂尾轮虫培养结果，投喂量为300 %为宜。董娟认为，酵母细胞的投喂量一般为一百万个轮虫投1-1.5 g。李元广等进行研究试验时酵母投喂量每百万轮虫投喂0.6 g。兰国宝等认为，投喂酵母菌，每一百万轮虫最佳投喂量为0.3-0.35 g ，最多不要超过0.4g。 轮虫是滤食性动物，能滤食到多少食物，与水体中饵料的密度密切相关。所以为了保证轮虫能滤食到足够的食物，总的原则是早期的投饵量要适当高些，随着轮虫密度逐渐增大，应适当降低投喂量。王鸿鹄等用面包酵母室内高密度培养褶皱臂尾轮虫，结果发现: 1.5 g/(106•d)的较高投饵量，适合于接种密度约为50个/毫升的褶皱臂尾轮虫培养，而投饵量为1.0-1.2 g/(106•d)时，适合于200个/毫升以上较高密度的培养。若褶皱臂尾轮虫密度达1000个/毫升以上，投喂量则需进一步降低至1.0 g/(106•d)以下。而当褶皱臂尾轮虫接种密度低至30个/毫升以下时，除酵母外，适当添加一定量(1/3以上体积)的单胞藻，可提高褶皱臂尾轮虫的增殖速度，降低褶皱臂尾轮虫培育的风险。 3.4 水质 除了水温及盐度外，水体pH、溶氧及氨氮含量对褶皱臂尾轮虫的增殖也有较大影响。随着轮虫的生长繁殖，密度越来越大，投饵量也随之增加，残饵和粪便的积累越来越多，除了pH值下降外，耗氧量及水中氨氮量也增加，这对轮虫的生长有抑制作用。于建平等人在轮虫的氨氮慢性中毒实验中发现氨氮浓度超过2.1μmol/dm3时对增殖有不良影响, 超过7.8μmol/ dm3时轮虫数量相对减少50%。同时，毛洪顺等人研究发现，在溶氧多时有效氮以硝酸态氮为主，在缺氧状态下则以氨态氮为主，因而改善水体的溶氧状况在一定程度上可降低氨含量和氨的危害。因此,培养过程一方面需要连续充气，这不但可以稳定和提高溶解氧，保障轮虫的呼吸需要，同时还起到搅拌的作用，防止褶皱臂尾轮虫聚群，避免局部缺氧，也使饵料分布均匀; 另一方面要根据轮虫的生长情况和密度变化调整投饵量,这样可以稳定水质，使培养顺利进行。 在更高的条件下可以用机械的方法清除污染物，即建造能及时排 除死亡酵母及残渣的过滤设施与及时清除氨氮等污染物的设备，或者多投喂单细胞藻类，并适当地使用光合细菌，有利于改善培育水质，对降低氨氮也有一定的辅助作用，对轮虫生长有促进作用。 3.5 敌害生物 在轮虫培养过程中，常见的原生动物主要是无色鞭毛虫类和纤毛虫类，其中与轮虫争食饵料的多是纤毛虫类的(Uronena)、盾纤虫(Aspidisca)和游仆虫(Euplotes)，有时还混有桡足类、水蚤类、丰年虫等浮游动物。这些生物不仅与轮虫争食饵科，也争夺栖息场所和生活空间，有些桡足类还会摄食轮虫，是影响轮虫繁殖的主要负面因素之一。这些敌害生物多半是海水过滤不干净或是从饵料中带进来的。另外，当投喂过多的酵母或者换水量不足时,容易引起敌害生物的大量繁殖,轮虫大量沉底死亡导致培养失败。因此,在轮虫培养生产过程中,一要保证轮虫种健壮和纯净,二要防止水质污染,三要保证投喂酵母不过量,以免留饵时间过长而败坏水质。 4 采收 轮虫的密度超过100个/毫升时，即可采收。用面包酵母培养的轮虫缺少高度不饱和脂肪酸，这种轮虫在采收前必须用海水小球藻或鱼肝油营养强化6-12h。采收轮虫时，轮虫的死亡量因密度、落差、收集容器中有无海水而有很大差异。 采收中轮虫遭受猛烈冲击后，或死亡或活力降低，结团浮于水面上。直径2.5mm的尼龙管从1m高落下, 收集到容器内的死亡率是6.1%，若经导管进入水中则可降低死亡率。收获时，可用250-300目 筛绢网制成约40L容量的网箱，网箱高40cm，外有一方不锈钢架支撑，网箱捆紧于不锈钢架内，张开。把网箱连同不锈钢架放在一个高为20cm的大塑料盆中(盆中盛入新鲜海水)，用潜水泵把池水抽出，经塑料软管导入网箱内过滤。塑料软管应尽量避免用阀门和异径接头, 管口应没入水面以下，避免水流太大和突然改变对它的冲击。待网箱内轮虫密度大时，用塑料勺舀取作为饵料投喂或作为种轮虫继续培养。 为了避免将致病菌带入育苗池，必须用过滤海水将轮虫冲洗干净或经药浴消毒后再投喂。池中轮虫也可只采收一部分，采收后立即在轮虫培养池中加入新鲜海水补回采收的水量，并继续投喂酵母，充气培养。由于轮虫培养池中的残饵、轮虫粪便等物质会随着培养天数的增加而增多，使水质逐渐恶化，因此每次培养时间一般维持15-25天，最多30天，然后全部采收，清池，开始新一轮的培养。