尿液隐血研究5种方法对比

尿液隐血研究5种方法对比 关键词,隐血,单克隆抗体法,加热煮沸法,尿液 中图分类号,R446 文献标识码,B 文章编号,1004-7484(2012)06-0192-02 尿液仪的使用大大提高了尿液检测的准确性和灵敏度,为克服尿液隐血检测的“假阳性”、“假阴性”,本文联合应用免疫法、干化学法、加热煮沸法、UF-100沉渣计数法及显微镜镜检法分析尿液标本隐血,结果如下。 1 与方法 1.1 仪器与试剂 UF-100全自动尿液沉渣分析仪与配套试剂、质控物,日本Sysmex 公司,,尿液干化学分析仪及配套试纸带,德国宝灵曼公司M iditron Junior?,,隐血胶体金检测试条,万华普曼公司,,01ympus显微镜,日本欧林巴斯株式会社,。 1.2 尿液标本的收集 收集本院内科2010年1月至10月住院患者清晨中段尿标本263份,充分混匀后分成3管,第一管用全自动UF,100型尿沉渣分析仪测量尿液RBC数后,进行免疫法检测和干化学尿液分析仪检测。第二管煮沸冷却后进行干化学尿液分析仪分析。第三管用于显微镜尿沉 1 渣检查,取一份新鲜全血,用正常尿液稀释成不同浓度的红细胞悬液同上操作。 1.3 方法,1,尿液干化学分析仪测定法,每天开机后均用质控液进行室内质控或校准卡校准,严格按仪器操作程序操作。,2,UF-100尿沉渣分析,每天均用仪器配套的原装质控品进行质控分析,质控合格后开始当日的尿液标本沉渣分析。,3,免疫法,严格按照隐血胶体金检测试条说明书操作。尿液加热刚至沸点后立即冷却到室温并用同样方法进行干华学分析仪分析。,4,显微镜尿沉渣的检测严格按照《全国临床检验》离心沉淀后取尿沉渣镜检。 1.4 数据处理 UF,100尿沉渣分析结果以RBC?25/?1为cut off值,方法间比较采用配对资料的?2检验。 2 结果 2.1 检测尿液隐血5种方法灵敏度分析 结果见1。结果显示,免疫法灵敏度最高,加热煮沸后干化学法隐血阳性程度降低。对263例尿液标本隐血结果分析,各检测方法与显微镜检法经配对?2检验,结果见表2。免疫法、加热煮沸法与显微镜检法间差异无显著性,P,0.05,,干化学法、UF,100沉渣计数法差异显著,P,0.05,。免疫法、UF-100沉渣计数法、加热煮沸后干化学法、干化学法检测尿液隐血阴性预测值分别为99.4%、98.7%、97.8%、98.1%,阳性预测值分别为94.0%、68.8%、90.3%、71.0%。 2 3 讨论 干化学试纸法自动尿液分析仪是根据红细胞血红蛋白所含的血红素有类似边氧化物酶活性,能催化一种供氢,电子,体如苯胺或酚脱氢显色的原理检测隐血。由于尿液成份很复杂,常存在有类似过氧化物酶活性的物质,如热不稳定过氧化物酶,易热酶,、肌红蛋白、某些细菌代谢产物等造成隐血结果假阳性,其中影响最多的是易热酶的存在[ 1 ]。由于易酶不耐热,如热煮沸即可排除。263例尿液标本中干化学试纸法阳性而显微镜检法阴性的31例尿液标本经加热煮沸后验证有23例为阴性,经免疫法验证有26例阴性。加热使蛋白质变性,但应注意不能长时间煮沸,否则将使尿液pH及其他成份发生变化,亚铁血红素,铁离子,的过氧化物酶样活性下降而降低隐血阳性程度[2]。 表1 4种方法检测有不同RBC浓度的尿液隐血结果 表2 263例尿液标本4种方法与显微镜检法测隐血结果,例数, 注,与显微镜检法比较,* P,0.05,* * P,0.05。 UF,100型尿沉渣分析仪是对尿沉渣荧光染色,利用流式细胞原理识别计数尿液中的有形成份。其分析结果较易受尿液中结晶的影响,在稀释液中加入螯合剂,35加温处理来消除尿液中无定形结晶,磷酸盐、尿酸盐,,但不能消除草酸钙结晶对RBC分析的影响[3] 。而显微镜检测能很轻易地 3 将其区别,同时镜检还能发现确证尿液中的霉菌孢子、管型、精子、滴虫等有形成分。两法均不能检测溶解破碎的RBC。 单克隆抗体免疫胶体金法利用抗人血红蛋白单克隆抗体进行隐血检测。其检测灵敏度高,0.2 μg/m1,12个RBC/HP,且能检出溶解的红细胞,大大提高了隐血检测的阳性率[ 4 ] 。有文献报道长期高血糖患者,血红蛋白发生糖基化改变,导致血红蛋白的抗原性改变,而使免疫法隐血检测结果阳性程度减弱甚至出现假阴性[ 5 ]。 免疫法、加热煮沸法同时具有较高的阴性预测值和阳性预测值,可以作为尿液隐血检测的非常方便的验证方法。免疫法、UF,100、加热煮沸法、干化学试纸法联合显微镜检法的灵活运用可以提高尿液隐血检测的准确性。 参考文献 [1] 祁琳,朱雪明,单卫明.尿中念珠菌对尿液分析仪分析隐血项的影响[J].苏州大学学报(医学版),2003,23(3):291,292. [2] 王桂兰,李倩男,李智.对加热煮沸法排除干化学尿液隐血假阳性的初探[J].现代检验医学杂志,2002,17(2):8,9. [3] 武蓉珍,刘胜勇,徐丽珍.草酸钙结晶对UF-100沉渣分析仪测定红细胞的影响[J].临床检验杂志,2002,20(4):222,223. [4] 高茂馗,束国防.免疫法与化学法测定隐血的比较[J]. 4 临床检验杂志,2004,22(1):69. [5] 马金霞,刘秀华,潘世扬.糖化血红蛋白对金免疫隐血试验的干挠分析[J].临床检验杂志,2001,19(5):315,316. 5