2008级中药学本一班中成药分析实验报告(李敏老师)

实验一  中药制剂的理化定性鉴别 实验学时：2学时            实验类型：验证性试验 一、目的 掌握中成药分析的理化定性方法。 二、实验仪器及材料 实验人数共48人，分8组，每组6人 试剂：1%香草醛的硫酸、盐酸、5%氢氧化钠、30%过氧化氢、5%二氯氧化锆、5%硝酸钠、10%硝酸铝（以上溶液各用1滴瓶125mL）、乙醇及甲醇（各一瓶）、茚三酮（10mL）、 药品：牛黄解毒片（5盒或者5袋）、银黄口服液（1盒）、板蓝根颗粒剂（1盒） 器材：研钵（8个）、漏斗（8个）、烧杯（100mL、24个）、移液管（各量程若干）、水浴锅、紫外灯、滤纸、PH试纸 三、实验 1、牛黄解毒片： （1）鉴别方法 ①取本品1片，研细，进行微量升华，所得的白色升华物，加新制的1％香草醛的硫酸溶液1～2滴，液滴边缘渐显玫瑰红色。 ②取本品6片（包衣者除去包衣），研细，加乙醇10ml，温热10分钟，滤过，取滤液5ml，加镁粉少量与盐酸0.5ml，加热，即显红色；另取滤液4ml，加氢氧化钠试液，即显红色，再加30％过氧化氢溶液，红色不消失，加酸成酸性时，则红色变为黄色。 （2）思考题          试述①②法的化学定性原理。 2、板蓝根颗粒剂 （1）本品为板蓝根制成的颗粒剂。 （2）鉴别方法 ①取本品0.5g，加5ml甲醇使溶解，静置，取上清液点于滤纸上，晾干，置紫外光灯（365nm）下观察，显蓝紫色。 ②取本品0.5g，加10ml甲醇使溶解，滤过，取滤液1ml，加茚三酮试液0.5ml，置水浴中加热数分钟，显蓝紫色。 实验二 牛黄解毒片的薄层鉴别 实验学时：4学时            实验类型：验证性试验 一、实验目的 1 了解中药制剂的薄层鉴别方法 2 掌握薄层色谱法的原理及操作方法 二、实验仪器和材料 实验人数共48人，分8组，每组6人 器材：100mL三角瓶(16个)、50mL或100mL烧杯（16个）、薄层展开缸（8个）、分液漏斗（1个）、 薄层用玻璃版10块、研钵（8个）、漏斗（8个）、100mL量筒（1个）大黄粉末、 烘箱、毛细管、超声提取器、玻璃棒、紫外灯 试剂：甲醇、石油醚（30～60℃）、甲酸乙酯及甲酸（以上试剂各1瓶） 羧甲基纤维素钠（0.5%的水溶液200mL）、牛黄解毒片（1盒）、薄层层析用硅胶G、 三、实验内容 【薄层鉴别】 1 供试品制备：取该品1片，研细，加甲醇20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。 2 对照品制备：另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。 3 照薄层色谱法试验：吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15:5:1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。 4 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上有荧光斑点出现。 实验三 不同厂家六味地黄丸中水分含量比较 实验学时：4学时            实验类型：综合性实验 一、实验原理 中药制剂水分测定的常用方法有烘干法和甲苯法，烘干法适用于不含或少含挥发性成分的药品，甲苯法用于含挥发性成分的药品。六味地黄丸是由牡丹皮、山药、熟地黄、山茱萸等六味中药制成的水丸，其中有多味中药中含挥发性成分，应选用甲苯法测定该制剂中水分的含量。 二、实验目的 1 了解药典中规定水丸的水分要求 2 掌握甲苯法测定水分的原理及操作方法 三、实验仪器和材料 实验人数共48人，分8组，每组6人 仪器：甲苯法水分测定装置（8套）、六味地黄丸（1盒）、铜丝（8根）、 研钵（8个）、加热套（8个）、沸石、电子天平 试剂：甲苯（5瓶）、亚甲蓝粉末 四、实验内容 1将六味地黄丸研碎，取约30g，精密称定，置A瓶中，加甲苯约200ml，加入干燥、洁净的玻璃珠或沸石数粒，将仪器各部分连接。 2 自冷凝管顶端加入甲苯，至充满B管的狭细部分。将A瓶置加热套中缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒馏出2滴。 3 待水分完全馏出，即测定管刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用适宜的方法，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏5min,放冷至室温。 4 拆卸装置，如有水黏附在B管的管壁上，用蘸有甲苯的铜丝推下，放置，使水分和甲苯完全分离（可加亚甲蓝粉末少量，使水染成蓝色，以便分离观察），检读水量，并计算供试品中的含水量。本品为水丸，水分含量不得超过9% 。 计算： 水分=V/W V —— 刻度管中水层的容量ml W —— 样品的重量（g） 【注意事项】 1、用化学纯甲苯直接测定，必要时甲苯可先加水少量，充分振摇后，将水层分离弃去，经蒸馏后使用。 2、样品应先粉碎成直径不超过3mm的颗粒。 实验四  不同厂家的大山楂丸中总黄酮的含量的比较研究 实验学时：4学时            实验类型：综合性实验 一、目的要求 1、掌握用分光光度法测定中药制剂中总黄酮含量。 2、掌握可见分光光度计的使用方法。 二、基本原理 大山楂丸由山楂、神曲和麦芽组成，主要功能为开胃消食，其中山楂主要成分为有机酸、黄酮类及多种维生素。 黄酮类化合物具有 、 、 结构，可与铝盐、铅盐、镁盐等金属盐类试剂反应，生成有色配合物，可用可见分光光度法测定其含量。本实验利用黄酮类化合物在亚硝酸钠的碱性溶液中，与Al3+产生高灵敏度的橙红色配合物（λmax=510nm），从而用可见分光光度法（比色法）测定大山楂丸中总黄酮的含量。 三、仪器与材料 实验人数共48人，分8组，每组6人 索氏提取器（8套）、容量瓶（10mL-24个、250mL-8个、100mL-1个）、 大山楂丸（4不同厂家各1盒）、 乙醇（50%-100mL、95%-1500mL）、芦丁（30mg） 5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶液、1%氢氧化钠溶液（各100mL） 可见分光光度计、移液管、电子天平、蒸馏水、水浴锅、烘箱 四、实验内容 1、标准液的配制：精密称取芦丁对照品20mg，置100ml容量瓶中，加95%乙醇50ml使溶解，然后加50%乙醇稀释至刻度，即得0.2mg/ml的对照品溶液。 2、标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于10ml容量瓶中，各加50%乙醇溶液使成5ml，精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀，放置6分钟，加入10%硝酸铝溶液0.3ml，摇匀，再放置6分钟，加入1%氢氧化钠溶液4ml，分别用50%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15分钟。以第一瓶作空白，用可见分光光度计在510nm处测其吸收度，作A-C标准曲线（或计算其回归方程）。 3、样品液的制备：精密称取120℃干燥2小时的大山楂丸6.5g，置索氏提取器中，用95%乙醇125ml回流提取1.5小时，将提取液移至250ml容量瓶中，补加蒸馏水至刻度，摇匀即得。 4、含量测定：精密量取提取液1ml，按上述标准曲线制备方法进行测定，并由标准曲线或回归方程计算样品中总黄酮的含量。 【注意事项】 1、实验证明，提取时间为1.5小时，基本能提尽样品中黄酮。 2、实验证明，样品显色后，在30分钟内测定总黄酮含量，无明显改变，超过30分钟，含量有所改变。 实验五  重量法测定不同厂家西瓜霜润喉片中西瓜霜含量比较 一 教学目的 （一） 了解重量法测定苦参生物碱的原理。 （二） 掌握重量法测定中药制剂含量的基本方法。 二 教学要求 （一） 了解重量法测定苦参生物碱的原理。 （二） 掌握重量法测定中药制剂含量的基本方法。 三 教学内容 取本品60片，精密称定，研细，取约18g，精密称定，加水150ml，振摇10min，离心，过滤，沉淀物用水50ml分3次洗涤，离心，过滤，合并滤液，加盐酸1ml，煮沸，不断搅拌，并缓缓加入热氯化钡试液使沉淀完全，置水浴上加热30分钟，静置1h，用无灰滤纸或已炽灼至恒重的古氏坩埚过滤，沉淀用水分次洗涤，至洗液不再显氯化物的反应，干燥，并炽灼至恒重，精密称定，与0.6086相乘，计算，即得。 本品每片含西瓜霜以硫酸钠计，小片应为11.5—13.5mg，大片应为23-27mg。 实验九  片剂的质量检查 实验学时：4学时            实验类型：验证性试验 一、实验目的 1 了解中药片剂及颗粒剂质量的一般要求 2 掌握片剂硬度、颗粒剂的粒度、水分及装量差异等检测方法 二、实验仪器和材料 实验人数共48人，分8组，每组6人 牛黄上清片（20袋）、板蓝根颗粒（120小袋）、 电子天平、硬度测定仪、各型号筛子、恒温箱、蒸发皿（8个） 三、实验内容 【片剂】 1 性状      片剂外观应完整光洁、色泽均匀，有适宜的硬度，以免在包装、贮存过程中发生破碎。 2 重量差异检查法 取供试品20片，精密称定总重量，求得平均片重后，再分别精密称定每片的重量，每片重量与标示片重相比较（无标示片重的片剂，与平均片重比较）、按中的规定，超出重量差异限度的不得多于2片，并不得有1片超出限度1倍。 3 硬度检测 片剂应有适宜的硬度，以免在包装、运输等过程中破碎或磨损。硬度还与片剂的崩解和溶出也有关系。常用的测定仪有孟山都硬度计，通过螺旋对弹簧加压，由弹簧推动压板并对片剂加压，由弹簧的长度变化反映压力的大小。