不同产地铁苋菜和绒毛龙芽草中没食子酸的含量测定

不同产地铁苋菜和绒毛龙芽草中没食子酸的含量测定 不同产地铁苋菜和绒毛龙芽草中没食子酸 的含量测定 中国药师2004年第7卷第10期783 国大容量注射液细菌内毒素限值原则为0.5EU?ml-.,因 此,每毫升胞磷胆碱钠氯化钠注射液细菌内毒素限值不得过 0.5EU. 2.2鲎试剂自凝试验 从2批鲎试剂中各取出4支,分别加入0.5ml的细菌内 毒素检查用水溶解后各取0.1ml置鲎试剂反应管中,再分别 加入0.1ml细菌内毒素检查用水轻轻混匀,在(37?1)?水 浴中放置8h,8支管均未形成凝胶. 2.3鲎试剂灵敏度复核l2l2 按照中国药典(2000年版)二部方法进行,结果与标示 灵敏度相符,2批鲎试剂灵敏度均符合. 2.4干扰试验最大有效稀释倍数 最大有效稀释倍数MVD=L?,本试验采用为 0.25EU?ml的鲎试剂,因此,胞磷胆碱钠氯化钠注射液 MVD=2. 2.5干扰试验的预试验 用细菌内毒素检查用水将供试品按胞磷胆碱钠浓度配 制成1—1,1—2,1—4,1—8系列浓度溶液,记为NPC,另制 备同样系列浓度的供试液,并使每一浓度供试液均含有2 的内毒素,记为PPC,选择不同厂家的鲎试剂,每一浓度分别 取0.1ml,加入盛有0.1ml的鲎试剂的试管中,每一浓度作2 管,同时作阴性(NC)和阳性(PC)对照管,轻轻混匀封口,(37 ?1)?保温(60?2)min,结果表明,胞磷胆碱钠氯化钠注射 液用不同厂家的鲎试剂在不同浓度均无干扰作用.见表1. 表1胞磷胆碱钠氯化钠注射液干扰试验预试验 2.6干扰试验 2.6.1细菌内毒素标准对照(Es)溶液的制备[]按中国药 典(2000年版)二部附录细菌内毒素检查法进行. 2.6.2含供试品内毒素(Et)溶液的制备用稀释2倍供试 品溶液将细菌内毒素制成0.5X,0.25,0.125X,0.0625X,用 不同厂家鲎试剂进行干扰试验,结果见表2. 表2胞磷胆碱钠氯化钠注射液干扰试验 由表2知Et在0.5,2.0Es(包括0.5Es和2.0)之 间,说明供试品在该条件下不干扰试验. 2.7供试品的细菌内毒素检测 用灵敏度为0.25EU?ml(批号:020703)的鲎试剂,对 3批供试品(供试品均在原浓度的基础上用细菌内毒素检查 用水稀释2倍)进行细菌内毒素检测,结果供试品管,阴性管 均为阴性,供试品阳性管,阳性管均为阳性.其结果表明,本 品用细菌内毒素检查法是可行的. 3’讨论 从试验结果可以看出,胞磷胆碱钠氯化钠注射液对 BET法检查其细菌内毒素不存在干扰,可以替代热原法用 于该品种细菌内毒素的检测.但为了确保试验结果的准确 性,可靠性,检测时使用灵敏度为0.25EU?ml的鲎试剂, 将检品2倍稀释后进行检测为佳. 参考文献 1中国药典[S].2000年版二部附录XIXF.204 2中国药典[s].2O0o年版二部附录xI-86 (2003.10.08收稿2004—02—05修回) 不同产地铁苋菜和绒毛龙芽草中没食子酸的含量测定 】冻树和(湖北中医学院附属医院药事部武汉430061)方进波刘焱文(湖北中医学院药学系) 摘要目的:测定不同产地铁苋菜和绒毛龙芽草中没食子酸的含量,并考察不同提取溶剂对没食子酸含量测定结果的影 响.方法:采用HPLC法,AttimaC18柱(5m,4.6ITlIn×250ITIFf1),流动相为乙腈一0.1%三乙胺(稀磷酸调pH值至3.5)(1.5: 98.5),流速1.0m卜min,检测波长212FIFfl.结果:线性回归方程为Y=5.09×10+1.77×106X,r=0,9998.线性范围 为0.8304,4.1520fig6个不同产地药材,以江西产铁苋菜和绒毛龙芽草中没食子酸含量最高,分别为0.545%和0.062%. 不同提取溶剂比较,以水为提取溶剂所测铁苋菜和绒毛龙芽草中没 食子酸含量最高,分别为0.465%和0,036%.结论:不同 产地铁苋菜和绒毛龙芽草中没食子酸含量存在差异. 关键词铁苋菜绒毛龙芽草没食子酸HPLC 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编 号:1008—049X(2004)10—0783—03 DeterminationofGallicacidinAcalyphaaustralislL.andAgrimoniapilosaLedeb.Var.nepalensis(D.Don) 784ChinaPharmacist2004,Vo1.7No.10 NakaifromDifferentPlacesofProduction ChenShuhe(AffiliatedHospitalofHubeiTraditionalChineseMedicalCollege,Wuhan430061,P.R.China);FangJinbo,LiuYan— wen(HubeiTraditionalChineseMedicalCollege) ABSlIIACr0bjective:TodetermineGallicacidinAcalyphaaustralislLandAgrimoniapilosaLedeb.Var.nepalensis(D. Don)Nakaifromdifferentplaceofproduction,andinspecttheinfluenceofdifferentsolventonthedeterminingresultofGallicacid. Method:ThecolumnAttimaCl8wasusedmobilephase:acetonitrilurn-0.1%triethylaminum(1.5:98.5),0.1%triethylamium whichwasregulatedtopH3.5withphosphoricacid.Theflowratewas1.0ml?min一,thewavelengthwasat212nn1.Result:The regressionequationwasY=5.09x10+1.77x10.X(r:0.9998),alinearrangewaswithin0.8304-4.1520/xg.Thehighest contentsofGallicacidinAcalyphaaustralislLandA? imoniapilosaLedeb.Var.nepalensis(D.Don)NakaifromJiangxiwere 0.545%and0.036%.respectively.Inthedifferentsolvents.waterwasthebestsolventwiththatthehighestdeterminationofGallic aciddeteminedinAcalyphaaustralislLandAgrimoniapilosa.Var.nepalensis(D.Don)Nakaiwas0.465%and0.036%, respertively.Conclusion:ThecontentsofgallicacidinAcalyphaaustralislLandAimonia0般Ledeb.Vat.neDalensis(D. Don)Nakaiwhichcomefromdifferentplaceoforiginweredifferent.WaterwasthebestsolventwiththatthedeterminedGallicacid hadthehighestcontent. KEYWORDSAcalyphaaustralislL;AgrimoniapilosaLed&.Vat.neDalensis(D.Don)Nakai;Gallicacid;HPLC 铁苋菜为大戟科植物铁苋菜(AcalyphaaustralislL)的 干燥全草,具有清热解毒,利湿,收敛,止血之功效,主要含有 生物碱,鞣质,铁苋菜素(australisin),没食子酸(Gallicacid), 胡萝卜苷(Daucostero1),谷甾醇(~sitostem1)等成分l卜. 绒毛龙芽草为蔷薇科植物绒毛龙芽草AgrimoniaNlosa Led&.Var.nepalensis(D.Don)Nakai的干燥全草,具有收 敛,止血,消炎,止痢之功效,其化学成分研究报道较少,根据 化学成分预试,主要含有鞣质,有机酸(包括没食子酸),苷 类,黄酮,氨基酸,多糖等成分.其中没食子酸为铁苋菜和绒 毛龙芽草止血的有效成分,能促进血小板的粘附和聚积,有 利于血栓的形成,并使抗凝血酶(AT?)活力降低,增加a2一 巨球蛋白(电.MG)的含量,降低纤溶活性而促进血液凝 固l4J.为了了解没食子酸在铁苋菜和绒毛龙芽草中的含量, 本文采用HPLC,对不同产地铁苋菜和绒毛龙芽草中没食子 酸的含量进行了测定,并考察了不同提取溶剂对没食子酸含 量测定结果的影响. 1仪器与试药 日本SHIMADZULC一10AVP液相色谱系统(LC一 10AVP泵,SPD一10A紫外检测器,CI’O一10AVP柱温箱); N2000色谱工作站(浙江大学智能信息研究所);日本SHI— MADZUCIV一240IPC紫外分光光度计;BP211D电子分析 天平(西德Sartorious). 铁苋菜,绒毛龙芽草购自湖北省药材公司,经湖北中医 学院鉴定教研室吴和珍博士鉴定.没食子酸对照品购自中 国药品生物制品检定所,纯度为98.87%.所用试剂均为分 析纯,水为双蒸水. 2方法与结果 2.1色谱条件与系统适用性试验 色谱柱AttimaCl8柱(5pan,4.6FllIn×250Fnin);流动 相:乙腈一0.1%三乙胺(稀磷酸调pH至3.5)(1.5:98.5);流 速:1.0ml?min;检测波长:212nnl.理论塔板数按没食子 酸峰计算应不低于3000_5J. 2.2对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥至恒重的没食子酸对 照品适量,加50%甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液,即得. 2.3供试品溶液的制备 2.3.1铁苋菜供试品溶液的制备取铁苋菜粉末0.5g,精 密称定,精密加入50ml蒸馏水,精密称定,加热回流2h,放 冷,精密称定,补加水至原重量,滤过,弃去初滤液,残渣中再 精密加入25ml蒸馏水,重复上述操作,合并两次续滤液,精 密移取25ml,于水浴上蒸干,残渣加50%甲醇适量溶解,转 移至5ml量瓶中,加50%甲醇至刻度,摇匀,即得. 2.3.2绒毛龙芽草供试品溶液的制备取绒毛龙芽草粉末 5g,精密称定,照铁苋菜供试品溶液制备方法,同法制备,即 得. 2.4标准曲线的绘制 分别精密吸取对照品溶液2,4,6,8,10l,注入液相色 谱仪进行测定,以进样量为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标 准曲线,结果表明没食子酸在0.8304,4.1520/xg范围内 与峰面积呈良好线性关系.回归方程为Y=5.09x10+ 1.77x10X,r=0.9998. 2.5不同产地铁苋菜和绒毛龙芽草中没食子酸的含量测定 取不同产地铁苋菜和绒毛龙芽草,按2.3项下方法制 备,分别精密吸取铁苋菜供试品溶液,绒毛龙芽草供试品溶 液与对照品溶液各20,注入液相色谱仪.HPLC图见图 1,测定结果见表1. ? 072I35496377眦 A.没食子酸对照品溶液B.铁苋菜供试品溶液 C.绒毛龙芽草供试品溶液 图1没食子酸HPLC图 中国药师2004年第7卷第l0期785 2,6不同提取溶剂对没食子酸含量测定的影响 取产自湖北黄冈地区的铁苋菜和绒毛龙芽草,分别以甲 醇,50%甲醇,无水乙醇,水为提取溶剂,按各自供试品溶液 制备方法进行提取和制备,分别精密吸取供试品溶液与对照 品溶液各20l,注入液相色谱仪,测定.结果见表2. 表1不同产地铁苋菜和绒毛龙芽草中 没食子酸含量(%,rl=2) 药材来源湖北黄冈湖北孝感江苏江西安徽毫州安徽太和 表2不同提取溶剂测得铁苋菜和绒毛 龙芽草中没食子酸含量(%,rl=2) 3讨论 3.1没食子酸为可水解鞣质的结构单元,广泛存在于多种 中药中.本文所测铁苋菜和绒毛龙芽草中没食子酸的含量, 为样品中所含游离没食子酸和水解出的没食子酸的含量总 和. 3.2绒毛龙芽草为仙鹤草[蔷薇科植物龙芽草Agrimonia pilosaLedeb.Vat,Japonica(Miq,)Nakai]的变种,其化学 成分和功效与仙鹤草十分相似,但至目前为止,还未见有关 绒毛龙芽草化学成分研究的报道.本文采用HPLC法,证实 糖肾康颗粒多糖提取工艺筛选 陈浩(安徽中医学院第一附属医院合肥230031) 了绒毛龙芽草含有没食子酸. 33铁苋菜和绒毛龙芽草中没食子酸的含量因产地不同而 存在一定的差异.本文通过比较6个不同产地药材含量,结 果以江西产铁苋菜和绒毛龙芽草中没食子酸含量最高,分别 为0,545%和0,062%. 3,4提取溶剂,提取时间和温度不同,对没食子酸的含量测 定结果影响较大.本文通过不同提取溶剂比较,以水为提取 溶剂所测得的铁苋菜和绒毛龙芽草中没食子酸的含量最高, 表明在以水为溶剂提取过程中,铁苋菜和绒毛龙芽草中部分 可水解鞣质水解为没食子酸,故本文在测定铁苋菜和绒毛龙 芽草中没食子酸含量时,采用水为溶剂提取,其测定结果可 以充分反映铁苋菜和绒毛龙芽草中不同药材的内在质量. 参考文献 l江苏新医学院编中药大辞典[M]上海:上海科学技术出版社1986 1853—1855 2董卫峰,林中文,孙汉董铁苋菜中的一个新化合物[J].云南植物研究, 1994,16(4):413—416 3张秀尧,凌罗庆,周志锦铁苋菜的有效成分研究[J]现代应用药学, 1991.8(2):l4 4王美娜,林蓉,刘俊田,等铁苋菜止血作用机理[J]西北药学杂志,1996, l1(5):209—211 5方进波,杨巧容,何再安,等灯心止血糖浆的质量标准研究J]中国中医 药信息杂志,2003,10(3):36—37 (2003—10—17收稿2004一(n26修回) 摘要目的:确定提取糖肾颗粒中多糖的最佳工艺.方法:采取正交设计法以提取时间(A),加入水量(B)和提取次数(C) 作为因素.结果:A因素和C因素对多糖含量的影响具有显着意义,B因素的影响不大.结论:最佳提取工艺为fi,即 提取2次,时间为每次lh,加水量分别为l0倍量和8倍量. 关键词糖肾康颗粒多糖类正交试验提取工艺 中图分类号:R283;R587.2文献标识码:A文章编号:1008—049X(2004)10—0785—02 StudyonExtractingCraftofPolysaccharidesinTangshenkongGranules ChenHao(theFirstMfiliatedhospitalofAnhuiCollegeofChineseMedicine,Hefei230031,PR.China) ABSTRACI”Objective:TodefineoptimumextractingcraftofpolysaccharldesinTangshenkonggranules.Method:Theorthogonal designwasusedandrefluxingtime(A),watertotalling(B),andextractiontime(C)weredefinedasfactorsofthedesignResult: FactorAandfactorChadnotableinfluenceonthecontentofpolysaccharidesConclusion:Optimumextractingcraftwasdefinedas follows:A2Blc2. KEYWORDSTangshenkonggranules;Poly~ccharide;Orthogonaltest;Extractingcraft 糖尿病性肾病(diabeticnephropathy,DN)是糖尿病最严 重的并发症之一,也是糖尿病患者死亡的主要原因.目前治 疗DN尚无特效方法.有效控制血糖是防治DN的重要手 段[.本院名老中医根据DN早期主要表现气阴两虚,瘀血 阻络之候,故治以益气养阴,化瘀通络法而拟科研制剂糖肾 康颗粒,临床上不仅能较好地改善早期DN的临床症状如乏 力,短气,口渴,尿多,尿浑浊等,而且有显着的降低尿微量蛋 白等效果,有预防和治疗早期DN的作用.