葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)

葡萄糖试剂盒(GOD-POD比色法) 简介： 葡萄糖(Glucose, Dextrose，Glu)又称玉米葡糖，简称葡糖，化学式C6H12O6，分子量为180.16，是自然界分布最广、最重要的一种单糖，属于多羟基醛。用酶学方法测定葡萄糖是生化检测中的常用方法，最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法。上述酶学法特点是：1、灵敏度、准确度、精密度均高；2、使用温和的反应条件；3、操作简便；4、适用于自动分析仪。 Leagene葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)又称葡萄糖氧化酶法或葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联法等，其检测原理是在葡萄糖氧化酶的催化下，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，同时消耗溶液中的氧，产生过氧化氢，过氧化氢与氧化色原物质反应生成有色化合物，初始反应中过氧化氢的生成量与葡萄糖浓度成正比，分光光度计进行比色测定。本试剂盒专门用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的葡萄糖含量定量测定，但不宜直接检测尿液中的葡萄糖含量，其中Glu(5mmol/L)=90mg/dl。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 编号 名称 TC0713100T TC0713200T Storage 试剂(A): 酚试剂 50ml 2×50ml RT 避光 试剂(B): 酶试剂 磷酸盐缓冲液(pH7.0) 50ml 2×50ml -20℃ 避光 4-氨基安替比林 葡萄糖氧化酶 过氧化物酶 临用前，按酚试剂：酶试剂混匀，即GOD-POD工作液，4℃保存。 试剂(C): Glu标准(5mmol/L) 1ml 2×1ml -20℃ 试剂(D): ddH2O 1ml 2ml RT 使用说明书 1份           自备材料： 1、 生理盐水或PBS 2、 离心管、小试管或96孔板 3、 水浴锅或恒温箱 4、 分光光度计或酶标仪 5、 全自动或半自动生化分析仪 操作步骤(仅供参考)： 1、 样本处理： ①血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围(25mmol/L)，用生理盐水稀释后检测。 ②细胞样本： a、取适量的细胞(一般推荐>106以上),离心，弃上清，留取沉淀。 b、用PBS或生理盐水清洗，离心，弃上清，留取沉淀。 c、加入 PBS或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，间隔30s。亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心，待用。亦可用Triton X-100冰浴，制备好的裂解液不可离心，待用。 ③组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水或PBS(ml)的比例，加入生理盐水或PBS，冰浴条件下手动或机械匀浆。离心，取上清待用。 2、 普通分光光度计(2ml比色杯)Glu测定操作: ①按下表依次加入试剂：   空白管 标准管 待测管 ddH2O(μl) 20     Glu标准(5mmol/L)(μl)   20   待测样本(μl)     20 GOD-POD工作液(ml) 2.0 2.0 2.0         ②充分混匀,水浴中孵育。 ③分光光度计测定处吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。 3、 分光光度计(1ml比色杯)、半自动生化分析仪Glu测定操作: ①按下表依次加入试剂：   空白管 标准管 待测管 ddH2O(μl) 10     Glu标准(5mmol/L)(μl)   10   待测样本(μl)     10 GOD-POD工作液(ml) 1.0 1.0 1.0         ②充分混匀,水浴中孵育。 ③分光光度计测定处吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。 4、 酶标仪Glu测定操作: ①按下表依次加入试剂：   空白孔 标准孔 待测孔 ddH2O(μl) 3     Glu标准(5mmol/L)(μl)   3   待测样本(μl)     3 GOD-POD工作液(μl) 300 300 300         ②充分混匀,水浴中孵育。 ③酶标仪测定吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。 5、 全自动生化分析仪Glu测定操作: ①按下表依次加入试剂：   空白管 标准管 待测管 ddH2O(μl) 3     Glu标准(5mmol/L)(μl)   3   待测样本(μl)     3 GOD-POD工作液(μl) 300 300 300         ②充分混匀,水浴中孵育。 ③全自动生化分析仪测定处吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。 机器参数： 主波长 505nm 反应类型 终点法 反应方向 升反应(+)     计算公式： 血清、血浆等液体样本(空白调零)： 葡萄糖(mmol/L)=｛(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度-空白吸光度)｝×5mmol/L 血清、血浆等液体样本(全自动生化分析仪)： 葡萄糖(mmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×5mmol/L 细胞、组织等样本(空白调零)： 葡萄糖(mmol/L)=｛(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度-空白吸光度)｝×5mmol/L÷待测样本浓度(mg/ml) 细胞、组织等样本(全自动生化分析仪)： 葡萄糖(mmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×5mmol/L÷待测样本浓度(mg/ml) 参考区间： 健康成年人空腹葡萄糖：3.9~6.1mmol/L(70~110mg/dl) 备注：Glu标准(5mmol/L)=90mg/dl 性能指标： 外观 无色至淡黄色澄清液体 线性范围 0~25mmol/L，r>0.990 变异系数 批内<2~5%，批间<5% 空白吸光值 <0.2(1cm光径) 稳定性 密闭，12个月     注意事项： 1、 上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。 2、 本法可直接用于检测脑脊液中的葡萄糖含量，但不能直接检测尿液中的葡萄糖含量，因为未经处理的尿液中含有还原性物质，影响过氧化物酶反应。 3、 待测样本如不能及时测定，应置于2~8℃保存，3天内稳定。 4、 本法线性范围可达25mmol/L，如果样本葡萄糖浓度过高，结果可能呈假性降低。应用生理盐水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。 5、 配制好的GOD-POD工作液，4℃避光保存，一个月有效。 有效期： 12个月有效。 相关： 编号 名称 DC0032 Masson三色染色液 DM0007 瑞氏-姬姆萨复合染色液 NR0001 DEPC处理水(0.1%) PW0053 Western抗体洗脱液(碱性) TC1243 甘油三脂(TG)检测试剂盒(单试剂GPO-PAP比色法)